[發明專利]一種谷胱甘肽分子檢測用試紙條及檢測方法

有效

• 申請號: 201710632593.7
• 申請日: 2017-07-28
• 公開（公告）號: CN107543809B
• 公開（公告）日: 2019-12-10
• 發明（設計）人: 李朝輝;黃鐘明;陳娟;葛佳;張琳
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N33/558
• 代理公司: 41126 鄭州立格知識產權代理有限公司
• 代理人: 田小伍;任偉柯

1.一種谷胱甘肽分子檢測用試紙條，其特征在于，所述試紙條包括基板，所述基板上依次設置樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述硝酸纖維素膜上標記鏈霉親和素檢測線，所述結合墊須經以下步驟處理：

1)將納米顆粒氨基化制得的氨基化的納米顆粒、羥甲基琥珀酰亞胺化的生物素水溶液于37℃下混合反應30min，沉淀分離，所得沉淀物經水洗得生物素化的納米顆粒；

2)將上述生物素化的納米顆粒加水分散，再向該體系中加入納米片層溶液混合，沉淀分離，所得沉淀物經水洗得生物素化納米顆粒/納米片層復合物；

3)將生物素化納米顆粒/納米片層復合物與吐溫20的水溶液混合，并涂于結合墊上干燥即可。

2.如權利要求1所述的谷胱甘肽分子檢測用試紙條，其特征在于，所述樣品墊和結合墊均由玻璃纖維膜制成；所述基板為PVC板。

3.如權利要求1所述的谷胱甘肽分子檢測用試紙條，其特征在于，所述鏈霉親和素的濃度為0.1～5mg/mL；樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊的長度分別為26mm、6mm、20mm和33mm；試紙條的寬度為3.9mm。

4.如權利要求1所述的谷胱甘肽分子檢測用試紙條，其特征在于，步驟1)中，沉淀分離時，先加入異丙醇混合，再離心分離即可。

5.如權利要求1所述的谷胱甘肽分子檢測用試紙條，其特征在于，步驟1)中，所述氨基化的納米顆粒的濃度為0.01～2μM，羥甲基琥珀酰亞胺化的生物素水溶液的濃度為2～1000μM；氨基化的納米顆粒與羥甲基琥珀酰亞胺化的生物素水溶液的體積比為200μL：(200～300)μL。

6.如權利要求1所述的谷胱甘肽分子檢測用試紙條，其特征在于，步驟2)中，納米片層溶液的濃度為0.3～0.4mg/mL；納米片層溶液與氨基化的納米顆粒的體積比為200μL：60μL～80μL。

7.如權利要求1所述的谷胱甘肽分子檢測用試紙條，其特征在于，步驟3)中，采用真空干燥，干燥溫度為37℃。

8.如權利要求1所述的谷胱甘肽分子檢測用試紙條，其特征在于，步驟3)中，吐溫20水溶液中吐溫20的體積百分比含量為1％～5％。

9.如權利要求1所述的谷胱甘肽分子檢測用試紙條，其特征在于，所述納米顆粒為水溶性金納米簇、水溶性銀納米簇、水溶性銅鋅銦/硫化鋅量子點、水溶性硒化鎘/硫化鋅量子點、碳量子點和石墨烯量子點中的一種；且所述納米顆粒的熒光發射波長為400nm～750nm；所述納米片層為二氧化錳納米片層或氫氧化氧化鈷納米片層。

10.一種谷胱甘肽分子檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

i)將不同濃度的谷胱甘肽標準液滴加到權利要求1-9任一所述的試紙條上跑樣10～30min，測定不同濃度下標準液的熒光強度值A；

ii)以谷胱甘肽標準液的濃度為橫坐標、熒光強度值A為縱坐標作圖，在一定濃度范圍內經線性擬合得谷胱甘肽標準曲線和擬合方程；

iii)將未知濃度的待測樣品滴加到所述試紙條上跑樣10～30min，檢測熒光強度值A1，將該熒光強度值A1代入擬合方程計算得到待測樣品的濃度。