[發明專利]生物合成角膜

有效

• 申請號: 201710620903.3
• 申請日: 2017-07-26
• 公開（公告）號: CN107670107B
• 公開（公告）日: 2021-08-06
• 發明（設計）人: 羅伯特·C·常;詹姆斯·W·波拉里克
• 申請（專利權）人: 琺博進(中國)醫藥技術開發有限公司
• 主分類號: A61L27/24
• 分類號: A61L27/24;A61L27/50;A61L27/58
• 代理公司: 深圳鷹翅知識產權代理有限公司 44658
• 代理人: 黃幸兒;姚偉旗

1.一種生物合成角膜，所述生物合成角膜由酰胺交聯的重組人III型膠原蛋白組成，具有8％至18％(w/w)的膠原蛋白含量并且在300nm的光波長處具有≤0.09的光密度，所述生物合成角膜通過包括以下步驟的過程制備：

(a)在0-3℃，將重組人III型膠原蛋白凝膠與NHS在緩沖至pH5.2-5.3的溶液中混合，以獲得8-18％(w/w)的最終膠原蛋白濃度，膠原蛋白胺基與NHS的摩爾比選自1:0.3，1:0.4，1:0.5或1:0.6；

(b)在0-3℃向混合物中加入EDC，使得EDC與NHS的摩爾比為1:1，使得交聯發生；

(c)在0-3℃進行混合，并且將混合物擠出到具有腔的模具中，所述腔具有適合宿主角膜的尺寸，厚度和曲率；和

(d)在100％濕度在室溫溫育過夜，以允許所述模具內的交聯過程的完成。

2.根據權利要求1所述的生物合成角膜，其中，所述膠原蛋白含量為8％至15％(w/w)。

3.根據權利要求1所述的生物合成角膜，其中，所述重組人III型膠原蛋白以密集有序的小直徑微纖維陣列排列。

4.根據權利要求1所述的生物合成角膜，其中，在380-750nm的光波長處所述光密度≤0.05。

5.根據權利要求1所述的生物合成角膜，其中，使用MES以0.150-0.350M的交聯最終濃度將所述溶液緩沖至pH 5.2-5.3。

6.根據權利要求5所述的生物合成角膜，其中，MES的所述交聯最終濃度為0.157-0.277M。

7.根據權利要求1所述的生物合成角膜，其中，所述最終膠原蛋白濃度為8-15％(w/w)。

8.根據權利要求1所述的生物合成角膜，其中，所述膠原蛋白胺基團與NHS與EDC的摩爾比為1:0.4:0.4。

9.根據權利要求1所述的生物合成角膜，其中，步驟(a)至步驟(c)在0℃發生。

10.根據權利要求1所述的生物合成角膜，所述生物合成角膜通過包括以下步驟的過程制備：

(i)通過在0℃將重組人III型膠原蛋白凝膠與pH5.2，0.625M的MES緩沖液混合；

(ii)分別在pH5.2，0.625M的MES緩沖液中制備7.5％(w/w)的NHS溶液，并且在pH5.2，0.625M的MES緩沖液中制備10％(w/w)的EDC溶液；

(iii)在0℃將等分的NHS溶液與膠原蛋白溶液混合；

(iv)加入EDC溶液；和

(v)將膠原蛋白/NHS/EDC溶液在0℃劇烈混合；

其中，最終混合物的EDC:NHS:膠原蛋白-NH₂摩爾比為0.4:0.4:1。

11.一種生物合成角膜，所述生物合成角膜通過包括以下步驟的過程制備：

(a)在0-3℃將重組人III型膠原蛋白凝膠與NHS在緩沖至pH5.1-5.3的溶液中混合，以得到7-9％(w/w)的最終膠原蛋白濃度，膠原蛋白胺基與NHS的摩爾比為1:0.4；

(b)在0-3℃向混合物中加入EDC，使得EDC與NHS的摩爾比為1:1，使得交聯發生；

(c)在0-3℃進行混合，并且將混合物擠出到具有腔的模具中，所述腔具有適合宿主角膜的尺寸，厚度和曲率；以及

(d)在100％濕度在室溫溫育過夜，以允許所述模具內的交聯過程的完成。