[發(fā)明專利]人胚胎干細(xì)胞的分化有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710606917.X | 申請(qǐng)日: | 2008-11-25 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN107574142B | 公開(kāi)(公告)日: | 2021-07-06 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | A.雷扎尼亞 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 生命掃描有限公司 |
| 主分類號(hào): | C12N5/071 | 分類號(hào): | C12N5/071;C12N5/0735 |
| 代理公司: | 中國(guó)專利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 彭昶;周李軍 |
| 地址: | 美國(guó)加利*** | 國(guó)省代碼: | 暫無(wú)信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 胚胎 干細(xì)胞 分化 | ||
1.一種產(chǎn)生胰腺內(nèi)胚層細(xì)胞的方法,包括如下步驟:通過(guò)用至少導(dǎo)蛋白、成頭蛋白和TGF-βR-1激酶抑制劑處理定形內(nèi)胚層細(xì)胞使所述定形內(nèi)胚層細(xì)胞分化成胰腺內(nèi)胚層細(xì)胞,其中所述定形內(nèi)胚層細(xì)胞來(lái)源于人多能干細(xì)胞,以及所述人多能干細(xì)胞是來(lái)源于確立的人胚胎干細(xì)胞系的細(xì)胞或確立的人胚胎干細(xì)胞系。
2.一種產(chǎn)生胰腺內(nèi)胚層細(xì)胞的方法,包括如下步驟:
a.使多能干細(xì)胞分化成定形內(nèi)胚層細(xì)胞,和
b.通過(guò)用至少導(dǎo)蛋白、成頭蛋白和TGF-βR-1激酶抑制劑處理定形內(nèi)胚層細(xì)胞使所述定形內(nèi)胚層細(xì)胞分化成胰腺內(nèi)胚層細(xì)胞,其中所述多能干細(xì)胞是人多能干細(xì)胞,以及所述人多能干細(xì)胞是來(lái)源于確立的人胚胎干細(xì)胞系的細(xì)胞或確立的人胚胎干細(xì)胞系。
3.權(quán)利要求2的方法,還包括培養(yǎng)多能干細(xì)胞。
4.權(quán)利要求1或2的方法,其中將所述定形內(nèi)胚層細(xì)胞還用至少一種選自如下的因子處理1至6天:視黃酸、FGF-2、FGF-4、FGF-7、FGF-10、音猬蛋白抑制劑、能抑制BMP的因子。
5.權(quán)利要求1或2的方法,其中將所述定形內(nèi)胚層細(xì)胞還用音猬蛋白抑制劑和至少一種選自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子處理1至3天,然后用音猬蛋白抑制劑、視黃酸和至少一種選自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子處理所述細(xì)胞1至4天。
6.權(quán)利要求5的方法,其中將所述定形內(nèi)胚層細(xì)胞還用音猬蛋白抑制劑、視黃酸和至少一種選自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子處理4天。
7.權(quán)利要求1或2的方法,其中將所述定形內(nèi)胚層細(xì)胞還用音猬蛋白抑制劑和至少一種選自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子處理1至3天,然后用音猬蛋白抑制劑、能抑制BMP的因子、視黃酸和至少一種選自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子處理所述細(xì)胞1至4天。
8.權(quán)利要求7的方法,其中將所述定形內(nèi)胚層細(xì)胞還用音猬蛋白抑制劑和至少一種選自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子處理3天。
9.權(quán)利要求1或2的方法,其中將所述定形內(nèi)胚層細(xì)胞還用音猬蛋白抑制劑、能抑制BMP的因子、視黃酸和和至少一種選自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子處理4天。
10.權(quán)利要求1或2的方法,其中將所述定形內(nèi)胚層細(xì)胞用音猬蛋白抑制劑和至少一種選自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子處理1至3天,然后用音猬蛋白抑制劑、能抑制BMP的因子、導(dǎo)蛋白、視黃酸和至少一種選自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子處理所述細(xì)胞1至4天。
11.權(quán)利要求10的方法,其中將所述定形內(nèi)胚層細(xì)胞用音猬蛋白抑制劑和至少一種選自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子處理3天。
12.權(quán)利要求10的方法,其中將所述定形內(nèi)胚層細(xì)胞用音猬蛋白抑制劑、能抑制BMP的因子、所述導(dǎo)蛋白、視黃酸和至少一種選自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子處理4天。
13.權(quán)利要求1或2的方法,其中將所述定形內(nèi)胚層細(xì)胞還用所述選自FGF-2、FGF-4、FGF-7和FGF-10的因子處理。
14.權(quán)利要求13的方法,其中將所述定形內(nèi)胚層細(xì)胞用FGF-7以50pg/ml至50μg/ml的濃度處理。
15.權(quán)利要求1或2的方法,其中將所述定形內(nèi)胚層細(xì)胞還用視黃酸處理。
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