[發明專利]一種提高超聲破碎大腸桿菌效率的懸浮液及方法在審
| 申請號： | 201710602125.5 | 申請日： | 2017-07-21 |
| 公開（公告）號： | CN107177504A | 公開（公告）日： | 2017-09-19 |
| 發明（設計）人： | 寶福凱;麻明彪;柳愛華;陶律延;彭蕓;白若蘭;戴熙廷;簡苗苗;計震華 | 申請（專利權）人： | 昆明醫科大學 |
| 主分類號： | C12N1/06 | 分類號： | C12N1/06;C12R1/19 |
| 代理公司： | 昆明今威專利商標代理有限公司53115 | 代理人： | 賽曉剛 |
| 地址： | 650500 云南省昆*** | 國省代碼： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 提高 超聲 破碎 大腸桿菌 效率 懸浮液 方法 | ||
1.一種提高超聲破碎大腸桿菌效率的懸浮液，其特征在于，所述懸浮液包括以下濃度的組分：0.8～1.2M的Tris-HCl，3～7M的NaCl，0.3～1M的EDTA，0.05～0.2M的DTT+15～25wt％的蔗糖和0.08～0.15v/v％的TritonX-100，pH為7.1～8.0。
2.如權利要求1所述的提高超聲破碎大腸桿菌效率的懸浮液，其特征在于，所述懸浮液包括以下濃度的成分：1MTris-HCl+5M NaCl+0.5M EDTA+0.1M DTT+20wt％蔗糖+0.1v/v％TritonX-100+dH2O。
3.如權利要求1所述的提高超聲破碎大腸桿菌效率的懸浮液，其特征在于，所述懸浮液的pH為7.5～7.6。
4.一種提高超聲破碎大腸桿菌效率的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
步驟(1)室溫下將大腸桿菌菌液離心，收取大腸桿菌菌體，將菌體與懸浮液混勻，在冰浴中進行超聲破碎；
步驟(2)將破碎后的菌液分裝，離心，合并上清液，使用濾菌器將上清液進行過濾，收集濾液。
5.如權利要求4所述的提高超聲破碎大腸桿菌效率的方法，其特征在于，步驟(1)超聲條件為：功率為90W，超聲10～15s，停頓20～25s，超聲總時間為20～30min。
6.如權利要求4所述的提高超聲破碎大腸桿菌效率的方法，其特征在于，步驟(1)所述大腸桿菌菌體與懸浮液的質量體積比為1：10～15。
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