[發(fā)明專利]一種同時測定止咳寧嗽膠囊中三種活性成分的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710600193.8
• 申請日: 2017-07-21
• 公開（公告）號: CN107247106A
• 公開（公告）日: 2017-10-13
• 發(fā)明（設計）人: 孫艷濤;趙磊;崔克宇;王麗;王龍;趙艷方;袁美玉
• 申請（專利權）人: 吉林師范大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 吉林省長春市新時代專利商標代理有限公司22204
• 代理人: 唐盼

技術領域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術領域，涉及一種中成藥止咳寧嗽膠囊中活性成分的檢測方法，具體的說是一種切換波長法同時測定止咳寧嗽膠囊中三種活性成分的方法。

背景技術

止咳寧嗽膠囊收錄于《衛(wèi)生部藥品標準·中藥成方制劑(第九冊)》，由苦杏仁、防風、桔梗、荊芥、陳皮等11味中藥組成，具有疏風散寒、宣肺解表、鎮(zhèn)咳祛痰的功效，臨床用于風寒咳嗽、嘔吐、咽喉腫痛等癥狀。

目前，已有報道采用高效液相色譜法測定止咳寧嗽膠囊中橙皮苷、苦杏仁或橙皮苷與綠原酸的含量。例如：將樣品用甲醇超聲提取，在ZorbaxSB-C18(3.0mm×250mm，5μm)色譜柱上分離，以含1％乙酸的水(A)-乙腈(B)體系為流動相進行階梯洗脫，程序為0min(82﹕18)～5min(82﹕18)～5.1min(75﹕25)～20min(75﹕25)；流速為0.35mL·min^-1；327nm紫外檢測，可同時測定止咳寧嗽膠囊中的綠原酸和橙皮苷的含量(具體見“高效液相色譜法測定止咳寧嗽膠囊中的綠原酸和橙皮苷”，許海棠等人，廣西民族大學化學與生態(tài)工程學院，南寧530006)。

然而，上述色譜條件由于流動相中乙酸的濃度過高，測定過程中對儀器和色譜柱會有一定的腐蝕；同時，流速需要控制在0.35mL·min^-1，這對儀器的選擇也有一定要求，色譜條件過于苛刻。最重要的是，止咳寧嗽膠囊中成分較多，在上述色譜條件下，綠原酸與橙皮苷的色譜峰之間仍存在沒有被完全分開的單一的樣品峰，無法將止咳寧嗽膠囊中其它活性成分有效的分離出來。流動相組成在5分鐘左右由(82﹕18)快速變成(75﹕25)，容易引起基線飄移。

為有效監(jiān)控藥品質量，確保該制劑的療效，需要進一步完善高效液相色譜法，保證其能夠快速準確的分析出多種活性成分的含量。

發(fā)明內容

本發(fā)明目的在于提供一種利用高效液相色譜切換波長法同時測定止咳寧嗽膠囊中的綠原酸、金絲桃苷和橙皮苷含量的方法，為判斷該藥的質量標準提供理論依據。該方法操作簡單、穩(wěn)定、重現性好，對儀器和色譜柱不會產生不良影響，可用于該藥品的質量控制。

本發(fā)明的目的是這樣實現的：該測定方法是利用高效液相色譜(HPLC)切換波長法在同一實驗條件下同時分離并測定止咳寧嗽膠囊中的綠原酸、金絲桃苷和橙皮苷的含量，具體步驟如下：

(1)混合對照品溶液的制備：精密稱取綠原酸0.00234g、橙皮苷0.00230g和金絲桃苷0.00305g，分別置于5mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度線處；制得濃度分別為468μg·mL^-1、460μg·mL^-1和610μg·mL^-1的標準品溶液；分別移取每種標準品溶液150μL混合，制得混合對照品溶液；

(2)供試品溶液的制備：取16粒止咳寧嗽膠囊，除去膠囊外殼，精密稱取4.18535g，用80mL甲醇為溶劑進行索式提取5h，將提取液冷卻至室溫后轉移到100mL容量瓶中，甲醇定容，作為供試品溶液，供檢測使用；

(3)分離檢測：色譜柱：TC-C₁₈(4.6mm×250mm，5μm)；流動相：A為乙腈，B為0.2％冰乙酸的水溶液梯度洗脫，梯度洗脫條件為：

流速：1.0mL·min^-1；檢測器：VWD檢測器；檢測波長：0-10min：327nm；10-48min：280nm；柱溫：25℃；進樣量：10μL。

本發(fā)明具有以下優(yōu)點和積極效果：

1、本發(fā)明方法采用高效液相色譜法，利用梯度洗脫方式，實現了同時測定止咳寧嗽膠囊中三種有效成分；能夠較好的分離、測定止咳寧嗽膠囊中綠原酸、金絲桃苷和橙皮苷有效成分的含量，色譜峰峰形好，分離度較高，在此色譜條件下止咳寧嗽膠囊中綠原酸、金絲桃苷和橙皮苷的濃度與峰面積呈現良好的線性關系。

2、本發(fā)明所述方法操作簡單、精密度、準確度、重現性和穩(wěn)定性好，能夠更好地對該藥物進行質量監(jiān)控，為全面評價和控制止咳寧嗽膠囊質量和藥效評價的進一步研究奠定了理論基礎和科學依據。

附圖說明

圖1為本發(fā)明混合對照品溶液的色譜圖。

圖2為本發(fā)明實施例1供試品溶液的色譜圖。

圖3為本發(fā)明線性關系曲線圖。

圖4為本發(fā)明對比例1混合對照品溶液的色譜圖。

圖5為本發(fā)明不同提取方法下供試品溶液的色譜圖。