[發明專利]鹽生草耐鹽基因HgS3及其應用

有效

• 申請號: 201710593807.4
• 申請日: 2017-07-20
• 公開（公告）號: CN107287212B
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 汪軍成;王化俊;姚立蓉;李葆春;孟亞雄;馬小樂;任盼榮;司二靜;楊軻;鄒蘭;閆棟;張燕
• 申請（專利權）人: 甘肅農業大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C07K14/415;C12N15/10;C12N15/82;C12N15/66;A01H5/00;A01H6/20;A01H6/02
• 代理公司: 蘭州振華專利代理有限責任公司 62102
• 代理人: 張真

本發明涉及從鹽生植物鹽生草中分離的一個耐鹽基因HgS3及其應用。其目的在于提供一個新的耐鹽基因HgS3及其編碼蛋白與其在提高植物耐鹽性和培育耐鹽新品種(系)中的應用。耐鹽基因HgS3包含如SEQ ID NO.1cDNA的核苷酸序列，分子量為468bp，其cDNA編碼序列為SEQ ID NO.1中第208至第336位所述的核苷酸序列，分子量為129bp，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3，由42個氨基酸組成，該基因能夠顯著提高轉基因擬南芥幼苗的耐鹽特性。本發明所述的耐鹽基因將有助于耐鹽植物(作物)新品系(種)的培育。

技術領域

本發明屬于植物生物工程和轉基因技術領域，具體涉及鹽生植物鹽生草耐鹽基因及其在提高植物耐鹽性中的應用。

背景技術

土壤鹽漬化是影響作物生長和產量的最主要非生物脅迫之一。隨著全球氣候的逐漸變暖，更是加劇了土壤鹽漬化進程，尤其是針對我國西北廣大旱區和半干旱地區來講，原本極為有限的降雨量進一步減少，蒸發進一步的加強，致使土壤鹽漬化形勢更加嚴峻，且由于傳統農業過度灌溉，只灌不排，更是讓大面積寶貴的可耕作土地資源被鹽漬化所吞噬，最終不得不被農業生產所拋棄，逐漸演變成荒漠化和沙漠化土地。因此，提高植物(作物)耐鹽性，使得植物(作物)能夠在這些荒廢的鹽漬地上生長，做到充分利用和有效改良這些鹽漬土壤對保障我國糧食安全和改善生態環境，實現農業可持續發展具有重要意義。

我國西北地區廣泛分布著多種耐鹽植物，這些植物對當地嚴酷的自然環境形成了良好的適應性，從耐鹽植物(作物)培育的角度來考慮，這些植物是寶貴的耐鹽基因發掘優異材料。而關于西北旱區本土鹽生植物耐鹽基因發掘的研究較少，尤其是抗鹽先鋒植物鹽生草(Halogeton glomeratus)，從中發掘優異耐鹽基因對培育耐鹽植物(作物)材料具有重要的運用價值。

發明內容

本發明的目的在于避免現有技術的不足之處而提供一種鹽生草耐鹽基因HgS3，以應對當前對優良耐鹽基因的需求。

本發明的又一目的在于提供了一種鹽生草耐鹽基因HgS3的制備方法，從而實現高效、快速獲得該基因。

本發明的還一目的在于提供了一種所述的鹽生草耐鹽基因HgS3在提高植株耐鹽性的應用。

本發明依據前期鹽生草鹽脅迫響應轉錄組學測序結果(Transcriptomicprofiling of the salt-stress response in the halophyte Halogeton glomeratus[J].BMC genomics,2015,16(1):169)，篩選鑒定到鹽脅迫誘導表達基因HgS3，進一步在鹽生草葉片中分離出HgS3基因，并將該基因連接到超表達載體pCAMBIA3300上，而后通過農桿菌浸染法轉化擬南芥，連續抗生素Kan篩選，獲得T2代轉基因純系，經幼苗耐鹽性分析證實，HgS3基因能夠顯著提高擬南芥植株的耐鹽性。

為實現上述目的，本發明采取的技術方案為：一種鹽生草耐鹽基因HgS3，其主要特點在于從鹽生草葉片中分離得到的HgS3基因的核苷酸序列SEQ ID NO.1如下，分子量468bp:

所述的鹽生草耐鹽基因HgS3，其特征在于所述的基因cDNA編碼序列為分離到的HgS3基因的核苷酸序列中第208至第336位所述的核苷酸序列SEQ ID NO.2如下，分子量為219bp：

所述的鹽生草耐鹽基因HgS3，所述的基因cDNA編碼序列的基因編碼蛋白氨基酸序列SEQ ID NO.3，由42個氨基酸組成：

所述的鹽生草耐鹽基因HgS3，其特異引物為：

HgS3-F1為5’-AAAAGACACTCCATAATCTTGTGTT-3’，