[發明專利]用于檢測孢子絲菌病的血清凝集劑的制備方法有效
| 申請號： | 201710584396.2 | 申請日： | 2017-07-18 |
| 公開（公告）號： | CN107478820B | 公開（公告）日： | 2019-06-14 |
| 發明（設計）人： | 田晶晶;尹煥才 | 申請（專利權）人： | 中國科學院蘇州生物醫學工程技術研究所 |
| 主分類號： | G01N33/531 | 分類號： | G01N33/531 |
| 代理公司： | 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369 | 代理人： | 韓飛 |
| 地址： | 215163 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 檢測 孢子 絲菌病 血清 凝集 制備 方法 | ||
1.一種用于檢測孢子絲菌病的血清凝集劑的制備方法，其特征在于，包括：
1)培養孢子絲菌酵母相；
2)取出培養的孢子絲菌酵母相，用PBS緩沖液離心洗滌，去除上清，得到所述孢子絲菌的菌體沉淀；
3)向所述菌體沉淀中加入-20℃預冷的預固化液，混勻，置于4℃中反應0.5-2小時；隨后在4℃下離心，去除上清，加入2-4％多聚甲醛，震蕩混勻后，在4℃下固定保存過夜；
4)繼續加入0.1-0.5％TritonX-100、0.5-1％BSA、5-10％的蛋白保護劑和0.02-0.05％的ProClin300，混勻，得到固化孢子絲菌；
5)取所述固化孢子絲菌，加入染色劑，反應10-20min后，離心去上清，以PBS緩沖液稀釋，得到稀釋的孢子絲菌指示菌株，即為所述血清凝集劑；
其中，所述預固化液中至少包括有乙二醇、甘油磷酸酯和乙醇。
2.根據權利要求1所述的用于檢測孢子絲菌病的血清凝集劑的制備方法，其特征在于，所述乙二醇、甘油磷酸酯和乙醇的質量比為10-15∶2-3∶100。
3.根據權利要求1所述的用于檢測孢子絲菌病的血清凝集劑的制備方法，其特征在于，所述蛋白保護劑包括有甘油和氯化鉀。
4.根據權利要求3所述的用于檢測孢子絲菌病的血清凝集劑的制備方法，其特征在于，所述蛋白保護劑中，甘油和氯化鉀的質量比為100∶5-8。
5.一種如權利要求1-4中任一項所述的制備方法所制得的血清凝集劑。
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