[發(fā)明專利]一種抗PEDV的單克隆抗體及其化學發(fā)光方法檢測方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710575302.5 | 申請日： | 2017-07-14 |
| 公開（公告）號： | CN107286236A | 公開（公告）日： | 2017-10-24 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王隆柏;周倫江;王晨燕;吳學敏;陳如敬;車勇良;劉玉濤 | 申請（專利權(quán)）人： | 福建省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所 |
| 主分類號： | C07K16/10 | 分類號： | C07K16/10;G01N33/569 |
| 代理公司： | 福州元創(chuàng)專利商標代理有限公司35100 | 代理人： | 蔡學俊 |
| 地址： | 350013 *** | 國省代碼： | 福建;35 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 pedv 單克隆抗體 及其 化學 發(fā)光 方法 檢測 | ||
1.一種抗豬流行性腹瀉病毒的單克隆抗體，其特征在于：從豬流行性腹瀉-豬傳染性胃腸炎-豬輪狀病毒的三聯(lián)活疫苗中純化獲得豬流行性腹瀉病毒毒株，作為制備豬流行性腹瀉病毒單克隆抗體的抗原；通過病毒培養(yǎng)、免疫Balb/c小鼠，單抗制備技術(shù)，經(jīng)克隆，獲得豬流行性腹瀉病毒單克隆抗體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗豬流行性腹瀉病毒的單克隆抗體，其特征在于：其為IgG2a亞型單克隆抗體。
3.一種利用權(quán)利要求1所述單克隆抗體的檢測豬流行性腹瀉病毒的化學發(fā)光檢測方法，其特征在于：利用所述單克隆抗體，通過包被液、單抗包被濃度、封閉液、酶標二抗?jié)舛燃胺磻?yīng)時間的優(yōu)化，建立了一種檢測豬流行性腹瀉病毒的化學發(fā)光檢測方法。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的化學發(fā)光檢測方法，其特征在于：具體包括如下步驟：
（1）抗體包被：采用磷酸鹽緩沖液為包被液，以4ug/ml 豬流行性腹瀉病毒單克隆抗體濃度包被于固相載體微孔板上，100ul/孔，37℃孵育2h或4℃過夜，洗滌3次；
（2）封閉：以2.5%BSA作為封閉液體封閉覆蓋微孔板，每孔300ul/孔，4℃過夜，洗板3次；
（3）加樣：依次加入樣品，100ul/孔37℃溫育1h，洗板3次；
（4）加酶標2抗：加入HRP酶標記的豬流行性腹瀉病毒單克隆抗體，以1:4000稀釋后的液體加100ul/孔，37℃ 45min，洗板6次；
（5）加檢測底物：加入化學發(fā)光底物液100ul/孔，避光反應(yīng)3min；
（6）檢測：用發(fā)光檢測儀測定發(fā)光計數(shù)。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于福建省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所，未經(jīng)福建省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201710575302.5/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
- 一種豬腸道上皮細胞系及其應(yīng)用
- 一種區(qū)分PEDV變異株和經(jīng)典株的套式RT-PCR檢測方法
- 一種PEDV S基因主要抗原表位串聯(lián)的重組基因及其制備方法和應(yīng)用
- 一種重組豬流行性腹瀉病毒抗體的制備方法
- 用于檢測PRRSV和PEDV雙重RT?PCR的方法及引物
- 抗仔豬PEDV腹瀉的藥物組合物及其制備方法與應(yīng)用
- 一種豬流行性腹瀉病毒低含量樣品的病毒分離方法
- 豬流行性腹瀉病毒G1/G2型RT-PCR鑒別引物組及其診斷試劑盒
- PDCoV和PEDV共感染仔豬發(fā)病模型及其建立方法和應(yīng)用
- 一種治療由豬流行性腹瀉病毒PEDV引發(fā)腹瀉的單原子制劑及其制備方法
