[發明專利]用于滅蚊救急的植物揮發油噴霧劑

在審

• 申請號: 201710560407.3
• 申請日: 2017-07-11
• 公開（公告）號: CN107372648A
• 公開（公告）日: 2017-11-24
• 發明（設計）人: 孫成齋;劉乾泰;楊留洋
• 申請（專利權）人: 孫成齋;劉乾泰;孫洪標
• 主分類號: A01N65/28
• 分類號: A01N65/28;A01N25/06;A01P7/04;A01P3/00;A01P1/00;A61K36/54;A61K36/61;A61K36/575;A61K9/12;A61P17/02;A61P31/02;A61P31/04;A61P29/00
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• 代理人: 暫無信息

1.四種復方揮發油噴霧劑的組方：殺孑孓滅蚊蟲救急噴霧劑按下述處方配成：列為君藥的是樟果油、桉葉油、辛夷油、樟葉油；荊芥油、青蒿油、艾葉油，白朮油、白芷油、紫蘇油為臣藥；薄荷油是以四種君藥組成的四種噴霧劑的共同佐使藥。具體處方組成如下：

①、噴霧劑甲種：樟果油為君3份，荊芥油、青蒿油為臣各2份，薄荷油為佐使2份，甘油0.5份，新鮮蒸餾水40.5份，充分混合，待分裝。

②、噴霧劑乙種：桉葉油為君2份，荊芥油、艾葉油為臣藥各3份，薄荷油為佐使1份，甘油0.5份，新鮮蒸餾水40.5份，充分混合，待分裝。

③、噴霧劑丙種：辛夷油為君4份，白朮油、紫蘇油為臣各2份，薄荷油為佐使1份，甘油0.5份，新鮮蒸餾水40.5份，充分混合，待分裝。

④、噴霧劑丁種：樟葉油為君3份，艾葉油、白芷油為臣各2.5份，薄荷油為佐使1份，甘油0.5份，新鮮蒸餾水40.5份，充分混合，待分裝。

噴霧劑種類選擇可因環境和香型宜人性差異而定，甲、乙兩種以環境為主，丙、丁兩種以室內為主，亦可通用。

本發明揮發油配伍原則，系參照《神農本草經》“藥有一百二十種為君，主養命以應天，無毒，有君臣佐使，以相宣攝合和，宜一君、二臣、三佐、五使，又可一君三臣九佐使也”，本發明變通為一君二臣一佐使，令配伍原則各有所本。

2.揮發油制法：本發明所指樟果油，系每年八至十一月摘取的樟樹青果，人工采摘曬干備用。至冬季樟果成熟發黑落地或人工摘取曬干備用。蒸餾時用全果之皮肉，不粉碎、碾壓。荊芥、薄荷、紫蘇用地上之莖、葉、花穗；青蒿、艾葉則用葉和花穗為主；桉葉、樟葉則用新鮮或晾干的葉、嫩枝；辛夷、白朮、白芷系自藥材公司購買。

桉葉、紫蘇、樟葉、黃(青)蒿、艾葉、薄荷使用水蒸氣蒸餾萃取，其原料隨地可得，雖然收獲率偏低，但足以提供實驗用揮發油。以薄荷為例，取粉碎的薄荷200克，置揮發油提取器內，加水1升，按《中國藥典》2000版附錄XD揮發油測定法提取。粉碎物用濾紙包成小包防阻塞冷凝管。白芷、白朮、樟果、辛夷在使用水蒸氣蒸餾萃取時，大塊的先搗碎，浸六小時后再進行加熱蒸餾。其注意事項與莖葉類提取過程相似。

3.本發明揮發油殺孑孓試管法定量實驗，是基于了解不同稀釋度揮發油在不同時間內對于孑孓的殺滅作用。此次研發中規定觀察時間最長不得超過半小時，稀釋度從最低到最高為10個滴度，所用試管為20ml容量，故實驗操作極為方便。揮發油在水中易于擴散，但不溶解，實驗必須先將各滴度的含油試管放振蕩器或手工1分鐘以上混合，勿在加入孑孓后再振蕩，避免非實驗因素致孑孓死亡。實際操作時擺放二排試管，每個滴度都設空白對照。孑孓死亡指標，以孑孓完全僵死、失去運動能力判定為死亡，對照管則活躍自如。

4.本發明所用揮發油油膜覆蓋滅孑孓定量實驗，基于揮發油質輕，在水面擴散形成油膜，孑孓呼吸必定定時浮出水面，置身于各稀釋度的孑孓，被迫呼吸時頭胸部與揮發油直接接觸，所用器皿為白色小瓷碗，面積計算公式：S＝π·r²，加去氯的自來水或井水，置實驗室放置六小時以上，防止水溫過低、過高，防止被試孑孓非實驗原因死亡。和上述試管內定量實驗相反，本實驗順序是每碗加水150ml左右后，再加定量孑孓，再用微量吸管分別加揮發油于碗內水面，不搖動，讓油滴自行擴展。同樣設空白對照，由專人觀察并記錄死亡時間。注意盡量不使用蛹幼，其耐性較其他日齡幼蟲抵抗力大。

5.本發明所用揮發油噴霧殺蚊實驗，是在特別的捕蚊網內實施。捕蚊網大小為35cm×45cm，在黃昏時成蚊“群舞”交配，人工捕獲最為方便，動作要輕柔，避免暴力和擠壓，防止非實驗因素致死。事先將揮發油用蒸餾水作1∶20-1∶60倍稀釋，用5ml容量的微型噴霧器，分裝各稀釋度的揮發油供噴霧用。先觀察使用的蚊蟲是否正常，逐藥逐濃度均勻對網噴霧，讓所有被捕入網的蚊蟲盡量與揮發油接觸。有專人記錄，定時觀察蚊蟲存活情況。2小時后倒出網內蚊蟲，記錄死亡和存活蚊數。應注意，揮發油高倍稀釋后擊倒的蚊蟲常可蘇醒，故用藥后觀察時間必須持續2小時以上，區別真死和假死。

6.本發明所做各種揮發油殺(抑)菌實驗，所用稀釋液和培養基分別為：0.03MPP pH7.2磷酸鹽緩沖液(PBS)、0.85％生理鹽水、普通肉湯培養基、營養瓊脂培養基。作對照的菌種：大腸桿菌為Atcc 25922(以下簡稱大腸菌)、金黃色葡萄球菌為Atcc 29213(以下簡稱金葡菌)。

實驗步驟是：先將菌種用普通肉湯培養基增菌，備用活菌記數大腸菌達1.3×10⁷CFU/ml、金葡菌達1.7×10⁷CFU/ml。操作方法是：①、將菌液進行活菌計數。②、將滅菌試管排列于試管架上，用記號筆記管號。③、每管加滅菌PBS2.5ml。④、于第一管內加1∶10被試揮發油稀釋液2.5ml，混勻后取2.5ml移入第二管，再次混勻，從第二管移入第三管，以此類推至最后一管，混勻后棄去2.5ml，不加揮發油的作空白對照。⑤、加菌懸液2.5ml于各管中，混勻置恒溫搖床并記錄加菌液時間。⑥、各管分別于加菌后記錄時間，以接種環取菌液接種營養瓊脂平板，恒溫培養，37℃培養24小時。本實驗所用各種植物揮發油質地很輕，混合后稍停即有油層析出，浮于液體培養液表面，實驗的全過程使用搖床恒溫培養，使油水不會分離，以保證液體培養基中所含揮發油與細菌接觸，反應每個稀釋度揮發油的真實殺(抑)菌情況，在1h、2h、4h、8h分別接種觀察。