[發明專利]一種黃色肉棒菌菌種的分離純化方法

在審

• 申請號: 201710550010.6
• 申請日: 2017-07-07
• 公開（公告）號: CN107287126A
• 公開（公告）日: 2017-10-24
• 發明（設計）人: 李傳華;張勁松;奚莉萍;陳明杰;汪虹
• 申請（專利權）人: 上海市農業科學院
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/02;C12R1/645
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所31233
• 代理人: 黃志達,魏峯

技術領域

本發明屬于食藥用菌領域，特別涉及一種黃色肉棒菌菌種的分離純化方法。

背景技術

我國是生物多樣性最豐富的國家之一，中國估計有10萬種食藥用菌，已被認識的只有1000種左右，而被利用的只有100種左右，由此可見大多數野生食藥用菌未被發現、認識和利用。因此找到更好的食藥用菌是我國食藥用菌工作者的重要工作之一。

肉棒菌(Podostroma sp.)是一種具有16個子囊孢子的特殊大型真菌物種，目前世界有記載的肉棒菌屬只有20個記錄，由此可見肉棒菌的珍惜程度。肉棒菌在中國還沒有被絕大多數人認識和了解，甚至多數從事菌物研究的人還沒有這種物種的概念，且目前中國只有幾個種被描述和記錄，至今還未有分離純化菌種和栽培等利用的報道。據初步研究，肉棒菌具有特殊的食用和藥用價值，因此研究如何分離純化肉棒菌菌種，從而可以進行相應的開發研究，是開發食藥用菌新品種，開發新藥物的重要途徑。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種黃色肉棒菌菌種的分離純化方法，該方法操作簡單，可進一步研制和開發潛在肉棒菌新資源食品，開創了我國潛在新資源食品肉棒菌的研制和開發利用先河。

本發明的一種黃色肉棒菌菌種的分離純化方法，包括：

(1)取采集自野外苔蘚叢中的黃色肉棒菌，并對表面殘余物進行處理，待進行菌種分離；

(2)從黃色肉棒菌中部取16孢子囊，接種于預先配制并滅菌的特殊培養基中，在20-23℃暗光下進行培養10-12天，獲得黃色肉棒菌菌種；其中，特殊培養基的組成為：土豆200g、葡萄糖10g、乳糖10g、蛋白胨10g、酵母膏10g、氯化鉀0.05g、硫酸鈉0.15g、磷酸氫二鉀0.5g、氯化鈣0.025g、磷酸二氫氨0.25g、2％三氯化鐵溶液1.2ml、瓊脂25g、維生素B₁100mg、麥芽汁15g、蒸餾水1000ml；

(3)將黃色肉棒菌菌種轉接到具有抗生素的培養基中，在23-25℃暗光下進行培養10-12天，獲得經過抗生素篩選的黃色肉棒菌菌種；其中，具有抗生素的培養基的組成為：土豆200g、蛋白胨10g、酵母膏10g、葡萄糖20g、瓊脂20g，滅菌分別加入1％鏈霉素、1％青霉素、1％慶大霉素抗生素各1ml；

(4)將步驟(3)得到的黃色肉棒菌菌種轉接到PDA培養基中，在20-23℃暗光下進行培養10-12天，即可。

所述步驟(1)中的對表面殘余物進行處理包括清理、消毒、晾干。

所述步驟(2)中的特殊培養基的配制步驟為：土豆煮水過濾，加入瓊脂融化后一次加入融化好的蛋白胨、酵母膏，再依次加入其它原料，待完全溶解后定容至1000ml，分裝試管后滅菌備用。

有益效果

本發明操作簡單，可進一步研制和開發潛在肉棒菌新資源食品，開創了我國潛在新資源食品肉棒菌的研制和開發利用先河。

附圖說明

圖1為野生黃色肉棒菌照片；

圖2為黃色肉棒菌菌種照片。

具體實施方式

下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之后，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。

實施例1

1)收集生長于苔蘚叢中的野生黃色肉棒菌：取采集自野外的黃色肉棒菌，并對表面殘余物進行清理、消毒、晾干等處理，待進行菌種分離。

2)特殊培養基配制：特殊培養基成分為土豆200g、葡萄糖10g、乳糖10g、蛋白胨10g、酵母膏10g、氯化鉀0.05g、硫酸鈉0.15g、磷酸氫二鉀0.5g、氯化鈣0.025g、磷酸二氫氨0.25g、2％三氯化鐵溶液1.2ml、瓊脂25g、維生素B₁100mg、麥芽汁15g、蒸餾水1000ml。配制步驟為，土豆煮水過濾，加入瓊脂融化后依次加入融化好的蛋白胨、酵母膏，再依次加入其它原料，等完全溶解后定容至1000ml，分裝試管后滅菌備用。

3)菌種分離：從黃色肉棒菌中部取16孢子囊，用鑷子夾取接種于預先配制并滅菌的特殊培養基中，在23-25℃暗光下進行培養10天左右，初步獲得黃色肉棒菌菌種。