[發明專利]一株提高竹紅菌素發酵產率的伴生細菌菌株及其應用

有效

• 申請號: 201710525022.3
• 申請日: 2017-06-30
• 公開（公告）號: CN107099489B
• 公開（公告）日: 2020-10-09
• 發明（設計）人: 王劍文;馬燕軍;田浩
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P15/00;C12R1/38
• 代理公司: 蘇州創元專利商標事務所有限公司 32103
• 代理人: 陶海鋒

本發明公開了一株提高竹紅菌素發酵產率的伴生細菌菌株及其應用，菌株的分類名稱為：黃褐假單胞菌（Pseudomonas fulva），其保藏編號為CGMCC No.13931。將所述不同濃度伴生細菌活菌（10³～10⁵/mL）加入到培養了5～7 d的竹黃菌發酵液中，繼續培養獲得竹紅菌素。本發明能有效提高竹紅菌素的產量，且對人畜無毒害作用，對環境無污染。

技術領域

本發明涉及一種生物菌株，具體涉及一株天然藥用真菌子實體伴生細菌-黃褐假單胞菌，本發明還涉及該菌株在提高竹紅菌素產量中的應用。

背景技術

竹黃菌（Shiraia bambusicola P. Heen）又名天竹花、竹三七等，屬于子囊菌亞門（Ascomycotina）、肉座菌科（Hypocreaceae）、竹黃屬（Sharaia）。竹黃菌主要寄生于短穗竹屬（Brachystachyum Keng.）竹子的細嫩枝干上，形成粉紅色、龜裂瘤狀的子實體，稱作竹黃，其主要分布在中國南部的浙江、云南等地，作為我國傳統珍稀藥用真菌，具有止咳祛痰、祛風利濕等功效，常被用于治療虛寒胃痛、坐骨神經痛、氣管炎等疾癥。現代藥理學研究表明竹紅菌素（hypocrellins, Has）是竹黃菌的主要活性成分，包括竹紅菌甲素（hypocrellin A, HA）、乙素（hypocrellin B, HB）、丙素（hypocrellin C, HC）及丁素（hypocrellin D, HD），其中竹紅菌甲素HA是最主要的成分。目前竹紅菌素在臨床上用于治療外陰白斑、皮膚白色病變以及瘢痕疙瘩等皮膚病。同時，竹紅菌素作為非卟啉類的新型光敏劑，有更廣的吸收光譜、更好的光誘導單線態氧（Molecular single oxygen, ¹O₂）產生能力、較低的光暗毒性等優點，使其在各種皮膚病、腫瘤、病毒等的光化學療法（photodynamictherapy，PDT）上的應用潛能受到人們廣泛的關注，具有廣泛的應用價值。

由于竹黃野生資源有限，竹紅菌素產量低成為了其醫療及工業中應用最大的障礙，因此竹黃菌液態深層發酵成了生產竹紅菌素的首選方法。但目前通過人工發酵方法所產竹紅菌素產量較低，為了提高竹紅菌素產量，常用的方法包括人工培育子實體、化學合成、選育高產菌株、優化培養條件、添加誘導子等。而通過外源誘導提高竹紅菌素產量的研究較少。如：Du等人從竹子中分離得到的內生真菌的甲醇/氯仿提取物能夠刺激提高竹紅菌素產量，但粗提物有效成分未見報道，所以并不能確定發揮刺激作用的有效成分（Du W,Liang Z, Zou X, et al. Effects of microbial elicitor on production ofhypocrellin by Shiraia bambusicola. Folia microbiologica, 2013, 1-7.）。另有在竹黃菌中轉入竹紅菌素合成過程中關鍵基因來提高其含量，如Deng等人將竹紅菌素合成關鍵酶基因多銅氧化酶 (MCO) 在竹黃菌中過表達，該方法對于提高竹紅菌素產量效果顯著（Deng H, Gao R, Chen J, et al. An efficient polyethylene glycol-mediatedtransformation system of lentiviral vector in Shiraia bambusicola. ProcessBiochemistry, 2016, 1357-1362.），但由于基因工程目前處于嘗試階段，尚無大規模生產的應用。

因此，尋求新的外源誘導培養方法，以提高竹紅菌素產量，對于竹紅菌素的推廣應用有著重要的意義。

發明內容

本發明的發明目的是提供一株提高竹紅菌素發酵產率的伴生細菌菌株，并提供利用該菌株提高竹紅菌素產量的方法。