[發(fā)明專利]重金屬離子吸附系統(tǒng)及其宿主菌、重金屬離子回收方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710502203.4 | 申請日: | 2017-06-27 |
| 公開(公告)號: | CN107217067A | 公開(公告)日: | 2017-09-29 |
| 發(fā)明(設計)人: | 趙勁;魏煒;孫培卿;崔漢立;劉祥志 | 申請(專利權)人: | 深圳勁宇生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/62 | 分類號: | C12N15/62;C12N15/63;C07K19/00;C02F3/34 |
| 代理公司: | 深圳中一專利商標事務所44237 | 代理人: | 官建紅 |
| 地址: | 518000 廣東省深圳市坪山新區(qū)坪*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 重金屬 離子 吸附 系統(tǒng) 及其 宿主 回收 方法 | ||
1.一種重金屬離子吸附系統(tǒng),其特征在于,包括相互連接的枯草芽孢桿菌生物膜蛋白TasA DNA序列和重金屬離子結合蛋白DNA序列,且所述枯草芽孢桿菌生物膜蛋白TasA DNA序列與啟動子連接。
2.如權利要求1所述的重金屬離子吸附系統(tǒng),其特征在于,所述啟動子為Pcot或Pveg,所述Pcot的序列如SEQ ID NO:18所示,所述Pveg的序列如SEQ ID NO:21所示;且
所述枯草芽孢桿菌生物膜蛋白TasA DNA序列如SEQ ID NO:3所示。
3.如權利要求1所述的重金屬離子吸附系統(tǒng),其特征在于,所述重金屬離子結合蛋白DNA序列為鉛離子結合蛋白PbrR DNA序列,如SEQ ID NO:6所示;或
所述重金屬離子結合蛋白DNA序列為金離子結合蛋白GolB DNA序列,如SEQ ID NO:9所示;或
所述重金屬離子結合蛋白DNA序列為鈾酰離子結合蛋白SUP DNA序列,如SEQ ID NO:12所示。
4.如權利要求1所述的重金屬離子吸附系統(tǒng),其特征在于,所述重金屬離子結合蛋白DNA序列的下游連接有綠色熒光蛋白EGFP DNA序列,如SEQ ID NO:15所示。
5.一種重金屬離子吸附蛋白表面展示系統(tǒng),其特征在于,包括由權利要求1-3任一所述的重金屬離子吸附系統(tǒng)表達的枯草芽孢桿菌生物膜蛋白TasA和重金屬離子結合蛋白。
6.一種表達載體,其特征在于,包括如權利要求1-3任一所述的重金屬離子吸附系統(tǒng)。
7.一種宿主菌,其特征在于,所述宿主菌包括如權利要求6所述的表達載體;或
所述宿主菌表達如權利要求5所述的重金屬離子吸附蛋白表面展示系統(tǒng)。
8.一種重金屬離子吸附系統(tǒng)的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:
從枯草芽孢桿菌基因組中擴增出枯草芽孢桿菌生物膜蛋白TasA DNA序列;
從表達重金屬離子結合蛋白的菌種基因組中擴增出所述重金屬離子結合蛋白DNA序列;
將啟動子、所述枯草芽孢桿菌生物膜蛋白TasA DNA序列和所述重金屬離子結合蛋白DNA序列依次連接。
9.如權利要求8所述的重金屬離子吸附系統(tǒng)的制備方法,其特征在于,擴增所述枯草芽孢桿菌生物膜蛋白TasA DNA序列的引物如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示;和/或
所述啟動子為Pcot或Pveg;且擴增所述Pcot的引物如SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17所示,擴增所述Pveg的引物如SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20所示;和/或
所述重金屬離子結合蛋白DNA序列為鉛離子結合蛋白PbrR DNA序列或金離子結合蛋白GolB DNA序列或鈾酰離子結合蛋白SUP DNA序列;且擴增所述鉛離子結合蛋白PbrR DNA序列的引物如DNA SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5所示;擴增所述金離子結合蛋白GolB DNA序列的引物如DNA SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8所示;擴增所述鈾酰離子結合蛋白SUP DNA序列的引物如SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11所示。
10.一種重金屬離子回收方法,其特征在于,包括如下步驟:
提供含有重金屬離子的液體;
將權利要求7所述的宿主菌培養(yǎng)后加入所述液體中,靜置處理;
待所述溶液中出現(xiàn)沉淀后,進行過濾處理得到吸附有重金屬離子的所述宿主菌;
用酸處理吸附有重金屬離子的所述宿主菌,分離后得到重金屬離子。
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