[發(fā)明專利]一種食藥用菌復合保水顆粒菌種的制備方法及應用

在審

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• 申請日: 2017-06-26
• 公開（公告）號: CN107142221A
• 公開（公告）日: 2017-09-08
• 發(fā)明（設計）人: 尹立偉;楊春成;孫廷哲;吳甘霖;武琳;李莉;王傳順
• 申請（專利權）人: 安慶師范大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 合肥市浩智運專利代理事務所(普通合伙)34124
• 代理人: 王志興

技術領域

本發(fā)明涉及微生物技術領域，尤其涉及一種食藥用菌復合保水顆粒菌種的制備方法及應用。

背景技術

傳統(tǒng)的食藥用菌菌種一般為固體粉料或液體培養(yǎng)液，接種時菌絲斷裂，粉碎性損傷嚴重，抗壓強度低，崩解時間短，保水能力差，營養(yǎng)配方不合理。栽培種常為袋裝或瓶裝，取用不方便，使用時在空氣中暴露時間長，雜菌感染機會大，接種成活率相對較低；傳統(tǒng)的瓶(袋)裝栽培種接種孔的大小不一，加上取種量不容易控制，接種口的縫隙往往較大，在菌棒的搬運和操作過程中，人為擠壓造成空氣從縫隙處進出，夾帶雜菌孢子或花粉孢子進入棒內，造成感染。致使菌種中途退化或引起子實體畸形變異，導致產量降低。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于克服現有技術的不足，提供了一種可有效解決菌絲斷裂、損傷嚴重、抗壓強度高，崩解時間長，保水能力強，且采用合理的顆粒菌種營養(yǎng)配方的食藥用菌復合保水顆粒菌種的制備方法及應用。

本發(fā)明是通過以下技術方案實現的：一種食藥用菌復合保水顆粒菌種的制備方法及應用，包括如下步驟：

(1)食藥用菌菌絲發(fā)酵液的獲得

①配制發(fā)酵培養(yǎng)基：玉米粉12-17g/L，葡萄糖28-32g/L，蛋白胨3-5g/L，黃豆粉8-12g/L，KH₂PO₄ 1-2g/L，硫酸鎂0.7-0.8g/L，pH 5.5-6.0；

②將發(fā)酵培養(yǎng)基經115-125℃高溫滅菌15-30分鐘，冷卻后待用；

③將食藥用菌的菌種接種于上述發(fā)酵培養(yǎng)基中進行發(fā)酵液培養(yǎng)，獲得相應的食藥用菌菌絲發(fā)酵液；

(2)營養(yǎng)顆粒的制備

①準備營養(yǎng)顆粒原料：棉籽殼，木屑，麩皮，豆餅粉，單糖或二糖，石膏粉，保水劑，粘合劑，水；再按照棉籽殼：木屑：麩皮：豆餅粉：單糖或二糖：石膏粉：保水劑：粘合劑：水(w/v)為(50-60)：(20-30)：(8-15)：(8-20)：(0.5-3)： (0.5-3)：(5-9)：(40-70)：(50-70)的配比進行營養(yǎng)顆粒原料的混配；

②按上述配比將營養(yǎng)顆粒原料混勻后送入制粒機中制成營養(yǎng)顆粒；

③將上述制成的營養(yǎng)顆粒經滅菌、干燥、降溫后備用；

(3)食藥用菌復合保水顆粒菌種的獲得

將步驟(1)中制備的食藥用菌菌絲發(fā)酵液接種于步驟(2)中制備的營養(yǎng)顆粒中，常溫下萌發(fā)9-11天，真空封裝，即得食藥用菌復合保水顆粒菌種；其中，接種時，食藥用菌菌絲發(fā)酵液體積與營養(yǎng)顆粒重量之比為1.1:1。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方式之一，所述步驟(1)中食藥用菌的菌種獲取方法如下：

①配制固體PDA斜面培養(yǎng)基：馬鈴薯180-220g/L，葡萄糖15-25g/L，蛋白胨4-6g/L，瓊脂粉18-22g/L，pH 7.0；無菌條件下，將1-2cm²的食藥用菌菌塊接入配制好的固體PDA斜面培養(yǎng)基的試管中，置于24-26℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 7-10d，備用為食藥用菌搖瓶液體菌種；

②配制種子培養(yǎng)基：玉米粉18-22g/L，葡萄糖18-22g/L，酵母膏4-6g/L，麥麩18-22g/L，豆餅粉8-12g/L，KH₂PO₄ 0.5-1.5g/L，硫酸鎂0.4-0.6g/L，pH 5.5；無菌條件下，將1-3塊1-2cm²的食藥用菌搖瓶液體菌種接入裝有種子培養(yǎng)基的搖瓶中，在轉速為140-160r/min的控溫搖床上24-26℃振蕩培養(yǎng)6-8d，最終獲得用于后期發(fā)酵培養(yǎng)的食藥用菌的菌種。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方式之一，所述步驟(1)中發(fā)酵液培養(yǎng)的培養(yǎng)方法為：將食藥用菌的菌種按照接種量10％接入裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的搖瓶中，置27-29℃和140-160r/min搖床上振蕩培養(yǎng)4-5d，獲得相應的食藥用菌菌絲發(fā)酵液。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方式之一，所述步驟(2)中營養(yǎng)顆粒原料還包括以下原料：酵母粉0.8-1.2g，MgSO₄ 0.08-0.12％，KH₂PO₄ 0.18-0.22％，葡萄糖18-22g，維生素B₁ 1-2片，180-220g玉米粉末煮水過濾液1000mL。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方式之一，所述步驟(2)中保水劑為高吸水性樹脂。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方式之一，所述高吸水性樹脂具體為聚丙烯酸鹽。