[發明專利]一株哈茨木霉及其應用

在審

• 申請號: 201710495758.0
• 申請日: 2017-06-26
• 公開（公告）號: CN107245456A
• 公開（公告）日: 2017-10-13
• 發明（設計）人: 仲乃琴;劉寧;趙盼;鈔亞鵬;趙東
• 申請（專利權）人: 中國科學院微生物研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/20;C12N1/18;C05F17/00;C05G3/00;C12R1/885;C12R1/125;C12R1/865;C12R1/69;C12R1/01
• 代理公司: 北京律和信知識產權代理事務所(普通合伙)11446
• 代理人: 項榮,劉國偉

技術領域

本發明屬于微生物發酵技術領域，尤其涉及禽畜糞便復合微生物腐熟技術領域。

背景技術

隨著養殖業數量的增多和生產規模的不斷擴大，畜禽糞便的排放量也隨之提高，大量的畜禽糞便如果不經處理就排放到環境中，不僅污染了環境，而且也會導致病原菌的擴散，嚴重危害了畜禽和人類的健康。因此，需要利用微生物技術對畜禽糞便進行處理并消滅病原菌的擴散。

發明內容

本發明的第一目的是提供一株哈茨木霉(Trichodema harzianum)lzz-001，已于2017年3月17日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號)，保藏號為CGMCC No.13764。

本發明所提供的哈茨木霉(Trichodema harzianum)lzz-001 CGMCC No.13764：

(1)菌種獲得

1)、將從山東采集的秸稈腐熟樣品在PDA培養基上進行稀釋分離培養。

2)、將分離培養基上生長較快的一株純化到新的PDA培養基上。

3)、利用28s rDNA序列進行分子鑒定，鑒定為哈茨木霉菌，編號為lzz-001。

(2)菌株功能鑒定

1)、從市面上購買其它公司的哈茨木霉菌與分離的哈茨木霉菌lzz-001分別與其它菌劑按比例混合。

2)、將制得的混合菌劑進行秸稈腐熟，發現含有分離的哈茨木霉菌lzz-001的效率更高。

本發明的第二目的提供一種禽畜糞便復合微生物腐熟菌劑，活性成分為哈茨木霉(Trichodema harzianum)lzz-001 CGMCC No.13764，包括：哈茨木霉lzz-001、戊糖片球菌、枯草芽孢桿菌、米曲霉、釀酒酵母，其質量比為：4:3:1:1:1。

其中，孢子含量分別是≥100億/克的哈茨木霉菌；≥200億/克的戊糖片球菌；≥1000億/克的枯草芽孢桿菌；≥100億/克的米曲霉；≥200億/克的釀酒酵母。

本發明的第三目的是提供了一種禽畜糞便復合微生物腐熟菌劑的制備方法，包括：

(1)將哈茨木霉lzz-001接種于9cm的PDA培養基平板中，待木霉長滿平板后。

(2)將長滿木霉的平板切塊，大小0.5cm*0.5cm，接種與液體PDA培養基中，350ml接種2塊。27℃培養3d，作為液體種備用。

(3)將麥麩加水，濕度20％，121℃滅菌20min。作為固體培養基。

(4)350ml接種到6kg固體培養基上，27℃暗培養7d。

(5)將發酵好的木霉菌劑40℃烘干，水分15％以下，烘干后將菌劑粉碎。

(6)復合微生物腐熟菌劑孢子含量分別是≥100億/克的哈茨木霉菌；≥200億/克的戊糖片球菌；≥1000億/克的枯草芽孢桿菌；≥100億/克的米曲霉；≥200億/克的釀酒酵母。

(7)五種菌：≥100億/克的哈茨木霉菌；≥200億/克的戊糖片球菌；≥1000億/克的枯草芽孢桿菌；≥100億/克的米曲霉；≥200億/克的釀酒酵母。

(8)將五種粉劑菌劑按質量比：哈茨木霉4：枯草芽孢桿菌3：戊糖片球菌1：米曲霉1：釀酒酵母1，混合均勻。

本發明的禽畜糞便復合微生物腐熟菌劑可以快速去除臭味，縮短發酵時間，腐熟的有機肥可以提高肥力，減少病蟲害。

具體實施方式：

現結合具體實施方式和實施例說明本發明，但發明不限于以下內容。

本發明公開的復合微生物菌劑是由以保藏號為13764的哈茨木霉lzz-001，配以戊糖片球菌、枯草芽孢桿菌、米曲霉、釀酒酵母復配而成。孢子含量分別是≥100億/克的哈茨木霉菌；≥200億/克的戊糖片球菌；≥1000億/克的枯草芽孢桿菌；≥100億/克的米曲霉；≥200億/克的釀酒酵母。按重量百分比分別是哈茨木霉40％，枯草芽孢桿菌30％，戊糖片球菌10％，米曲霉10％，釀酒酵母10％。

本發明提供了一種禽畜糞便復合微生物腐熟菌劑的生產方法，所述方法包括：

(1)將哈茨木霉lzz-001接種于9cm的PDA培養基平板中，待木霉長滿平板后。

(2)將長滿木霉的平板切塊，大小0.5cm*0.5cm，接種與液體PDA培養基中，350ml接種2塊。27℃培養3d，作為液體種備用。

(3)將麥麩加水，濕度20％，121℃滅菌20min。作為固體培養基。

(4)350ml接種到6kg固體培養基上，27℃暗培養7d。