[發(fā)明專利]海鰻活性多肽的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710482524.2
• 申請日: 2017-06-22
• 公開（公告）號: CN107200778A
• 公開（公告）日: 2017-09-26
• 發(fā)明（設計）人: 江愛華
• 申請（專利權(quán)）人: 樂清瑞耀食品技術(shù)有限公司
• 主分類號: C07K14/46
• 分類號: C07K14/46;C12P21/02;C12R1/685
• 代理公司: 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙)11548
• 代理人: 李靜

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及魚類產(chǎn)品深加工技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及海鰻活性多肽的制備方法。

背景技術(shù)

海鰻又名為鰻魚、虎鰻、牙魚、狼牙鱔、門鱔、長魚、即勾、勾魚。體長一般約0.5~1.5米，大的可達2米。體細長，軀干部近圓筒狀，尾部較側(cè)扁，無鱗。口大，上下領(lǐng)延長，具強尖銳齒，鰓孔寬大。背、臀、尾鰭相連，胸鰭發(fā)達。海鰻為暖水性的底層魚類，一般喜棲息于水深一米泥沙底海區(qū)，有季節(jié)性洞游。分布于印度洋和太平洋，在中國沿海均有分布，尤以浙、閩、粵沿海產(chǎn)量最多，目前我國的年產(chǎn)量大約為巧萬噸左右。海水養(yǎng)殖魚一般呈高蛋白、高水分、高脂肪的特點。海鰻的肉質(zhì)細嫩，味道鮮美，脂肪含量高，蛋白含量高于牛肉、牛乳及禽蛋，營養(yǎng)豐富，具有補虛養(yǎng)血、祛濕、抗痊等功效，是久病、虛弱、貧血、肺結(jié)核等病人的良好營養(yǎng)品海鰻富含鈣質(zhì)，經(jīng)常食用，能使血鈣值有所增加，使身體強壯；且鰻魚的維生素和微量元素含量極高，維生素B1、維生素B2、維生素A含量分別是牛奶的25倍、5倍和45倍，鋅含量腦黃金是牛奶的9倍。

我國是世界上最大的海鰻養(yǎng)殖、加工和出口國家，海鰻產(chǎn)品己成為我國單項農(nóng)產(chǎn)品出口創(chuàng)匯最多的商品，每年產(chǎn)值逾億元，出口一萬，創(chuàng)匯一億美元，我國海鰻產(chǎn)品出口量占世界貿(mào)易量的。海鰻產(chǎn)業(yè)在我國漁業(yè)經(jīng)濟中占重要地位，己成為一些地方經(jīng)濟的支柱產(chǎn)業(yè)。海鰻消費市場主要集中在烤鰻、活鰻和凍鰻為主。日本是世界最大的鰻魚消費國，年進口量萬一萬，占我國烤鰻生產(chǎn)總量的。目前，在各類海鰻加工產(chǎn)品中，干制品以及在此基礎(chǔ)上深加工的熏制品由于具有獨特風味而受到人們的青睞，如烤鰻片、鰻鰲等是世界很多地區(qū)人們非常喜愛的食品。但這類產(chǎn)品都是基礎(chǔ)類產(chǎn)品，附加值不高。

現(xiàn)有技術(shù)如授權(quán)公告號為CN 101869172 B的中國發(fā)明專利，公開了一種活性鰻肽的生產(chǎn)方法，其生產(chǎn)方法為：選擇宰殺好的鮮鰻魚或鮮凍鰻魚經(jīng)絞肉機絞碎、滅菌后再進入初發(fā)酵車間進行降解水解，通過魚骨刺分離將得到的水解清液經(jīng)過滅酶，油脂分離，超濾，膜分離、真空濃縮，生香處理，噴霧干燥生產(chǎn)出活性鰻肽。采用生物酶解及酶修飾在溫和的條件下進行降解水解，提取濃縮高活性鰻魚蛋白多肽-鰻肽，但該制備方法繁瑣，油脂分離不徹底，產(chǎn)品易產(chǎn)生油哈敗味。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種溶解性好，可直接被小腸吸收，改善腸道內(nèi)環(huán)境，促進食物中營養(yǎng)成分的消化吸收利用的海鰻活性多肽的制備方法。

本發(fā)明針對上述技術(shù)中提到的問題，采取的技術(shù)方案為：海鰻活性多肽的制備方法，包括預處理、酶法脫脂、發(fā)酵培養(yǎng)基制備、黑霉菌種子液制備、啤酒酵母種子液制備、發(fā)酵、純化，具體步驟為：

所用菌種及其購買的公司為：黑霉菌和啤酒酵母均購自上海復祥生物科技有限公司。

預處理：將冷凍海鰻解凍后，清洗，去頭、去尾及內(nèi)臟，從背部切開分兩半，去中間的骨頭，然后切成質(zhì)量在20~30g之間的魚片，備用；

酶法脫脂：用pH為9~10的甘氨酸-氫氧化鈉緩沖液配制40~50U/mL的堿性脂肪酶液，將魚片與酶液按重量比為1:3~4的比例在28~33℃下浸泡脫脂48~55min，取出海鰻片，用清水沖洗，瀝干水分，備用，脂肪酶作用于油脂的脂鍵，使油脂水解成甘油和脂肪酸，甘油溶于水，脂肪酸與堿形成皂鹽漂洗掉，酶法脫脂反應條件溫和、控制方便，能專一性水解油脂的酯鍵、不破壞制品的其他營養(yǎng)成分，生物降解性好，使用量少，不會產(chǎn)生化學品殘留或二次污染等環(huán)境問題；

發(fā)酵培養(yǎng)基制備：將脫脂魚片蒸煮35~40min，冷卻后與水按重量比為1:1~2的比例勻漿，調(diào)節(jié)pH至5~6，封口，滅菌，備用，該發(fā)酵培養(yǎng)基碳、氮豐富，為菌體的生長繁殖提供能源，能使種子接種后能迅速生長，達到一定的菌絲濃度，使長好的菌體能迅速合成需產(chǎn)物；

黑霉菌種子液制備：將活化好的黑霉菌接種到查氏液體培養(yǎng)基中，在28~33℃培養(yǎng)45~48h，即得黑霉菌種子液；

啤酒酵母種子液制備：將活化好的啤酒酵母接種到Y(jié)DP液體培養(yǎng)基中，在28~33℃培養(yǎng)35~38h，即得啤酒酵母種子液；

發(fā)酵：將種子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)液中，黑霉菌種子液的接種量為4~6%，啤酒酵母種子液的接種量為3~5%，在35~42℃下培養(yǎng)26~28h，滅菌，離心，抽濾，留取濾液，濃縮，備用，該步驟采用混合菌種發(fā)酵，相較于單一菌種純種發(fā)酵有很大的局限性，作用效果的差異性，混合菌種發(fā)酵可利用了不同菌株的生理生化反應，使分泌的酶系統(tǒng)更加復雜多樣，使酶活大大提高，酶系比例協(xié)調(diào)，利用兩種菌種之間的共生作用或營養(yǎng)作用，使水解與發(fā)酵能夠同時進行；