[發明專利]基于對比染色的深部真菌形態學快速檢測方法及試劑

有效

• 申請號: 201710481814.5
• 申請日: 2017-06-22
• 公開（公告）號: CN107167357B
• 公開（公告）日: 2020-05-15
• 發明（設計）人: 崔舜
• 申請（專利權）人: 崔舜
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30;G01N1/28;G01N21/84
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 王敏鋒

1.基于對比染色的深部真菌形態學快速檢測方法，其特征在于：它包括如下步驟，

步驟一：無菌處理檢測深部真菌所需的器具，并無菌保存檢測所需的器具；

步驟二：取靜脈血1毫升；

步驟三：先在無菌環境中將一滴未凝固的靜脈血滴入盛有0.8ml檢測試劑的安瓿瓶中，然后輕搖安瓿瓶直至靜脈血在安瓿瓶內呈均勻分布，最后將安瓿瓶靜置20分鐘，使芝加哥天藍對靜脈血進行染色；

其中，0.8ml檢測試劑的制備方法為：先將0.8～1.5克芝加哥天藍粉劑溶入到100ml無菌生理鹽水中，然后將芝加哥天藍和生理鹽水的混合液經一次性針頭濾器過濾消毒，接著將芝加哥天藍和生理鹽水的混合液放入到經過無菌處理的安瓿瓶中，最后將帶有芝加哥天藍的無菌生理鹽水以每安瓿0.8ml分裝于規格為5ml的安瓿瓶中備用；

步驟四：對載玻片和蓋玻片進行無菌處理或消毒處理；

其中，對載玻片和蓋玻片進行無菌處理或消毒處理的方式可以為如下兩種中的一種，其中，第一種對載玻片和蓋玻片進行無菌處理或消毒處理的方式為：先在75％酒精溶液中將載玻片和蓋玻片浸泡3個小時以上，然后在制片時用酒精燈對載玻片和蓋玻片進行燃燒消毒，接著將載玻片和蓋玻片放置于直徑大于100mm的無菌密封容器中進行冷卻，直至染色完成；

第二種對載玻片和蓋玻片進行無菌處理或消毒處理的方式為：將載玻片和蓋玻片直接放置在超凈臺中進行紫外線消毒并無菌保存，直至染色完成；

步驟五：用1ml規格的一次性無菌注射器或無菌滴管吸取安瓿內已染色的混合液，在無菌條件下將一滴經過染色的混合液滴于步驟四中的載玻片上，蓋上蓋玻片；

步驟六：當蓋上蓋玻片后，先依次通過4倍物鏡、10倍物鏡、40倍物鏡及100倍油鏡對載玻片上的混合液進行觀察，再由500萬以上像素的目鏡放大，然后用高分辨率顯像軟件將載玻片上的混合液的圖像顯示于電腦屏幕，最后在電腦上對載玻片上的混合液進行觀察記錄。

2.如權利要求1所述基于對比染色的深部真菌形態學快速檢測方法中 所用 的檢測試劑，其特征在于：它由芝加哥天藍粉劑和無菌生理鹽水混合而成，所述芝加哥天藍粉劑與無菌生理鹽水的重量比為(0.8～1.5):100，所述的試劑用于對比染色的深部真菌形態學快速檢測。

3.根據權利要求2所述的 基于對比染色的深部真菌形態學快速檢測方法中所用 的檢測 試劑，其特征在于：所述芝加哥天藍粉劑與無菌生理鹽水的重量比為1:100。