[發明專利]一種犬C反應蛋白膠體金免疫層析試紙條

在審

• 申請號: 201710468614.6
• 申請日: 2017-06-20
• 公開（公告）號: CN107085100A
• 公開（公告）日: 2017-08-22
• 發明（設計）人: 何方洋;羅曉琴;龍光宗;萬宇平;曹東山;魯亞輝;彭鴿;張瑜;吳廣
• 申請（專利權）人: 北京勤邦生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/543
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及生物檢測領域，特別是涉及一種犬C反應蛋白膠體金免疫層析試紙條，其特別適用于犬的CRP檢測。

背景技術

C反應蛋白(CRP)是機體非免疫系統的組成成分，在多種哺乳動物疾病的急性期有重要的診斷警示作用。CRP在肝臟的合成反應主要由IL-1、IL-6和TNF-α等炎癥因子所調節。CRP濃度受年齡、性別和體重的影響不大。在人類臨床醫學診斷中，CRP作為炎性或非炎性疾病的診斷標志物進行檢測已超過30年。在獸醫臨床上，犬CRP的檢測在臨床應用中也比較廣泛，包括急性感染性疾病的診斷和鑒別診斷、手術后感染的監測、抗生素療效的觀察、病程監測及預后判斷等。犬CRP對疾病敏感度高，能在疾病早期快速升髙，及時反映病情；而且CRP的濃度不受到抗生素及免疫抑制劑的影響，在治療中可以準確地對疾病的發展進行監測，在臨床診療中具有很高的價值。因此作為炎癥標記物，CRP在獸醫臨床上的作用日趨顯著，檢測犬CRP對臨床診斷、療效及預后觀察等具有重要價值。

CRP是由肝臟合成的一種能與肺炎鏈球菌C多糖反應形成復合物的急性時相反應蛋白。它由5個相同的亞基單位以非共價方式聯接，與人CRP不同，犬CRP的5個亞基中有兩個被糖基化。研究表明，各種抗其他物種CRP蛋白的抗血清，都不能和急性期犬血清或者分離的犬CRP發生交叉反應，說明人和犬CRP沒有共同的抗原性，這種現象也說明犬CRP的快速檢測方法不能依賴于人的商品化CRP快速檢測試紙條。目前，臨床中快速檢測犬CRP的方法多是依賴于臨床檢測儀器，這在普通寵物醫院并不具備。而且，對于動物疫病診斷行業，很多情況下，對于疾病的診斷需要在野外進行，這對于現行犬CRP檢測方法是沒有辦法完成的。膠體金免疫層析是一種建立在膠體金層析技術和抗原-抗體特異性免疫反應基礎上的一種免疫檢測技術。膠體金免疫層析試紙一般包括依次設于底板上且緊密搭接的樣品吸收墊、結合墊、反應膜和吸水墊，底板設于塑料卡內，塑料卡上設有分別與樣品吸收墊與反應膜配合的加樣孔和顯示窗口。

發明內容

鑒于以上所述現有產品的技術缺點，本發明的目的在于提供一種犬CRP膠體金免疫層析試紙條及其制備方法和用途，用于解決現有技術中的問題。

為實現上述目的及其他相關目的，本發明采取了以下技術方案：

一種犬C反應蛋白膠體金免疫層析試紙條，由樣品吸收墊、結合物釋放墊、反應膜、吸水墊、底板依次組成，所述結合物釋放墊上包被有鼠抗犬C反應蛋白單克隆抗體-膠體金標記物，所述反應膜上包括檢測區和質控區，所述檢測區包被有雞抗犬C反應蛋白多克隆抗體，所述質控區包被有羊抗鼠抗抗體。

所述結合物釋放墊1/3～1/2被覆蓋于樣品吸收墊下。

所述鼠抗犬C反應蛋白單克隆抗體和雞抗犬C反應蛋白多克隆抗體是以昆蟲細胞桿狀病毒載體系統所表達的犬C反應蛋白作為抗原制備獲得。

本發明的另一個目的是提供一種制備上述試紙條的方法，該方法包括以下步驟：

1)制備噴涂有鼠抗犬C反應蛋白單克隆抗體-膠體金標記物的結合物釋放墊；

2)制備包被有雞抗犬C反應蛋白多克隆抗體的檢測區和包被有羊抗鼠抗抗體的質控區的反應膜；

3)將1)和2)制備好的結合物釋放墊、反應膜與樣品吸收墊、吸水墊和底板組裝成試紙條。

本發明的另一個目的是提供一種檢測犬C反應蛋白的方法，該方法包括以下步驟：

1)樣品前處理；

2)用上述的犬C反應蛋白膠體金免疫層析試紙條進行檢測；

3)分析檢測結果。

所述檢測樣品是犬全血、犬血清或犬血漿中的一種或多種物質。

本發明的有益效果為：

本發明所提供的犬CRP膠體金免疫層析試紙條可用于對犬全血、血清或血漿的檢測，兼具高靈敏性和高特異性，能夠快速檢測犬CRP。此外，所述犬CRP膠體金免疫層析試紙條具有操作快速簡便、結果準確、經濟適用等特點。

附圖說明

圖1為試紙條剖面結構示意圖。

圖2為試紙條檢測結果判定圖。

圖3為犬C反應蛋白樣本相關性統計圖。

圖1中：1：樣品吸收墊；2：結合物釋放墊；3：反應膜；4：吸水墊；5：檢測區；6：質控區；7：底板。

具體實施方式