[發明專利]一種對四種人體體液來源進行鑒定的方法和系統有效
| 申請號： | 201710452729.6 | 申請日： | 2017-06-15 |
| 公開（公告）號： | CN109136382B | 公開（公告）日： | 2022-06-14 |
| 發明（設計）人： | 孫啟凡;季安全;李冉冉;李彩霞 | 申請（專利權）人： | 公安部物證鑒定中心 |
| 主分類號： | C12Q1/6888 | 分類號： | C12Q1/6888 |
| 代理公司： | 北京同立鈞成知識產權代理有限公司 11205 | 代理人： | 陶敏;黃健 |
| 地址： | 100038 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 人體 體液 來源 進行 鑒定 方法 系統 | ||
1.一種對四種人體體液來源進行鑒定的方法，其特征在于，包括以下步驟：
1）提取待鑒定的人體體液樣本中的RNA，其中，所述人體體液樣本的可能來源包括外周血、月經血、精液或唾液；
2）對所述RNA中的體液特異性miRNA進行逆轉錄，并對得到的逆轉錄產物進行擴增，獲得相應的擴增結果，其中，所述體液特異性miRNA包括miRNA214、miRNA451、miRNA144、miRNA888、miRNA891和miRNA205，
同時，對內參基因進行逆轉錄，并對得到的內參逆轉錄產物進行擴增，獲得內參擴增結果；
3）根據上述擴增結果和內參擴增結果，確定所述人體體液樣本的來源；
在步驟2）中，采用與所述體液特異性miRNA一一對應的逆轉錄引物對其進行逆轉錄，分別得到相應的逆轉錄產物，其中，所述逆轉錄引物為序列表中SEQ ID No.1至SEQ ID No.6的核苷酸序列；
采用與所述逆轉錄產物一一對應的擴增引物對其進行擴增，并獲得相應的Ct值，其中，所述擴增引物為序列表中SEQ ID No.7至SEQ ID No.18的核苷酸序列；
所述內參基因為RNU6b，采用序列表中SEQ ID No.20的核苷酸序列對所述內參基因進行逆轉錄，得到所述內參逆轉錄產物；
采用序列表中SEQ ID No.19和SEQ ID No.20的核苷酸序列對所述內參逆轉錄產物進行擴增，得到所述內參擴增結果；
其中，miRNA451和miRN144作為血液的特異性標記；miRNA214作為月經血的特異性標記；miRNA888和miRNA891作為精液特異性標記，miRNA205作為唾液特異性標記。
2.一種用于實施權利要求1所述的對四種人體體液來源進行鑒定的方法的檢測體系，其特征在于，包括：待鑒定的人體體液樣本中的RNA、內參基因、內參逆轉錄引物、內參擴增引物、逆轉錄引物和擴增引物，其中：
所述檢測體系用于對所述RNA中的體液特異性miRNA進行逆轉錄，并對得到的逆轉錄產物進行擴增，獲得相應的擴增結果，
所述檢測體系還用于對內參基因進行逆轉錄，并對得到的內參逆轉錄產物進行擴增，獲得內參擴增結果，
其中，所述體液特異性miRNA包括miRNA214、miRNA451、miRNA144、miRNA888、miRNA891和miRNA205；
所述逆轉錄引物與所述體液特異性miRNA一一對應，所述逆轉錄引物為序列表中SEQID No.1至SEQ ID No.6的核苷酸序列；
所述擴增引物與所述逆轉錄產物一一對應，所述擴增引物為序列表中SEQ ID No.7至SEQ ID No.18的核苷酸序列；
所述內參基因為RNU6b，所述內參逆轉錄引物為序列表中SEQ ID No.20的核苷酸序列，所述內參擴增引物為序列表中SEQ ID No.19和SEQ ID No.20的核苷酸序列。
3.一種檢測試劑盒，其特征在于，包括權利要求2所述的檢測體系。
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