[發(fā)明專利]一種雪霉葉枯病抗性小麥育種新方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710445923.1
• 申請(qǐng)日: 2017-06-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107182774A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-09-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉漢平
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇強(qiáng)農(nóng)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A01H1/02
• 分類(lèi)號(hào): A01H1/02;A01H1/04
• 代理公司: 長(zhǎng)沙新裕知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司43210
• 代理人: 趙登高

1.一種雪霉葉枯病抗性小麥育種新方法，其特征在于：該育種新方法的步驟如下：

（1）選取待改良小麥品種/系和小麥雪霉葉枯病抗源，雜交獲得F1：選擇農(nóng)藝性狀優(yōu)良、雪霉葉枯病抗性待改良的小麥品種/系作為雜交母本，選擇高抗雪霉葉枯病的小麥雪霉葉枯病抗源作為雜交父本，大田種植父母本，抽穗后雜交獲得F1；

（2）F1回交獲得BCF1：將上步收獲的F1雜交種和母本大田種植，抽穗后回交獲得BCF1雜交種；

（3）分期播種父母本和BCF1：大田正季種植雜交父本、母本和BCF1雜交種，分期播種，父母本提前播種，使父母本的抽穗期比BCF1雜交種早15～25天；

（4）梯度濃度的雪霉病菌粗毒素處理父母本，選定BCF1抗性篩選壓：采用梯度濃度的雪霉病菌粗毒素分別處理父本和母本抽穗期植株的小花，處理完成后將植株回栽到大田，待小麥籽粒進(jìn)入“多半仁”期時(shí)即統(tǒng)計(jì)籽粒結(jié)實(shí)率，由于父本的雪霉葉枯病抗性要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于母本，因此父本自交受精卵對(duì)雪霉病菌粗毒素的耐性要高于母本自交受精卵，選擇母本小麥籽粒結(jié)實(shí)率為0且20%＜父本小麥籽粒結(jié)實(shí)率＜50%的濃度的雪霉病菌粗毒素作為BCF1抗性篩選壓；

（5）BCF1抗性篩選壓處理BCF1，獲得BCF2：采用BCF1抗性篩選壓處理抽穗期BCF1雜交種小麥植株小花，處理完成后將植株回栽到大田，結(jié)實(shí)后收種，獲得BCF2；

（6）分期播種父母本和BCF2，預(yù)試驗(yàn)選定BCF2抗性篩選壓，進(jìn)而處理BCF2，獲得BCF3：大田正季種植雜交父本、母本和BCF2雜交種，分期播種，父母本提前播種，使父母本的抽穗期比BCF2雜交種早15～25天，采用梯度濃度的雪霉病菌粗毒素處理父母本抽穗期植株小花，確定BCF2抗性篩選壓，農(nóng)藝性狀篩選淘汰部分BCF2（如株高不適、分蘗力差、抽穗期過(guò)遲），采用BCF2抗性篩選壓處理抽穗期BCF2小麥植株小花，結(jié)實(shí)后收種，獲得BCF3；

（7）BCF3農(nóng)藝性狀篩選，高世代自交篩選獲得雪霉葉枯病抗性小麥新品系：BCF3大田種植，農(nóng)藝性狀篩選優(yōu)良的單株，單株自交加代，高世代自交篩選，以待改良小麥品種/系親本為對(duì)照，篩選獲得農(nóng)藝性狀良好且雪霉葉枯病抗性得到改良的雪霉葉枯病抗性小麥新品系。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雪霉葉枯病抗性小麥育種新方法，其特征在于：所述步驟（1）中的農(nóng)藝性狀優(yōu)良、雪霉葉枯病抗性待改良的小麥品種/系是指產(chǎn)量高、米質(zhì)優(yōu)良、抗倒伏、雪霉葉枯病抗性有待改良的小麥品種/系；小麥雪霉葉枯病抗源是指多年多點(diǎn)雪霉葉枯病抗性鑒定試驗(yàn)中，感病指數(shù)低于抗病對(duì)照小偃6號(hào)感病指數(shù)的小麥品種/系。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雪霉葉枯病抗性小麥育種新方法，其特征在于：所述的雪霉病菌粗毒素的制備方法為：將雪腐格氏霉菌株接入PDA培養(yǎng)基，20℃斜面培養(yǎng)5d后，接種到麥粒與玉米粒重量比為1：1的培養(yǎng)基上擴(kuò)大繁殖，培養(yǎng)條件控制為：溫度15～17℃、光照強(qiáng)度1500～2000lx、光周期12h光/12h暗，培養(yǎng)20天后，稱取固體培養(yǎng)物，按照2：9的重量比加入85%酒精，浸提72h，浸提液用雙層紗布過(guò)濾1次，然后用濾紙過(guò)濾2次，每100g固體培養(yǎng)物浸提液的濾液定容于1L，即成粗毒素原液，置冰箱備用。

4.根據(jù)權(quán)利要求1和3所述的雪霉葉枯病抗性小麥育種新方法，其特征在于：所述的雪霉病菌粗毒素和BCF1、BCF2抗性篩選壓處理抽穗期小麥植株小花的具體操作流程為：前天下午挖取小麥抽穗期植株，于當(dāng)天晚上剪掉已經(jīng)開(kāi)花的小花，第2天下午開(kāi)花后再剪掉未開(kāi)花的幼嫩的小花，只留取當(dāng)天開(kāi)花的小穗用于雪霉病菌粗毒素浸泡處理，浸泡處理時(shí)間為挖取植株的第2天晚上18點(diǎn)到第3天早上8點(diǎn)，浸泡結(jié)束后將麥穗用流水沖洗10min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1、3和4所述的雪霉葉枯病抗性小麥育種新方法，其特征在于：所述的雪霉病菌粗毒素需現(xiàn)用現(xiàn)配，保存期不超過(guò)4個(gè)月。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的雪霉葉枯病抗性小麥育種新方法，其特征在于：所述的感病指數(shù)的獲取方法為：小麥雪霉葉枯病抗性鑒定試驗(yàn)中，調(diào)查上部?jī)善δ苋~，統(tǒng)計(jì)病葉數(shù)和病情嚴(yán)重度；病情嚴(yán)重度按如下標(biāo)準(zhǔn)分級(jí)：

0級(jí)：無(wú)病斑；

l級(jí)：病斑面積占葉片面積的1/4以下；

2級(jí)：病斑面積占葉片面積的1/4～1/2；

3級(jí)：病斑面積占葉片面積的1/2～3/4；

4級(jí)：病斑面積占葉片面積的3/4以上；

然后計(jì)算感病指數(shù)，感病指數(shù)=各級(jí)病葉數(shù)（0～4）×相應(yīng)級(jí)別的總和/（調(diào)查葉數(shù)×4）。