[發(fā)明專(zhuān)利]一種固相萃取?液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定水體中六類(lèi)24種抗生素的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710434449.2
• 申請(qǐng)日: 2017-06-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107543877A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-01-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡雙慶;沈根祥;張洪昌;錢(qián)曉雍;王振旗;朱英;張玉;袁哲軍
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 上海市環(huán)境科學(xué)研究院
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02;G01N30/08
• 代理公司: 上海精晟知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司31253
• 代理人: 肖愛(ài)華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于水環(huán)境中微量有機(jī)污染物質(zhì)殘留檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種水中微量有機(jī)污染物的檢測(cè)方法，特別涉及一種以固相萃取(SPE)前處理結(jié)合液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)(HPLC-MS/MS)，能夠高效、同時(shí)檢測(cè)出水體中六類(lèi)多達(dá)24種抗生素的分析檢測(cè)方法。

技術(shù)背景

抗生素因其具有抗菌性能而被大量用于人類(lèi)、動(dòng)物的疾病治療，促進(jìn)農(nóng)作物的生長(zhǎng)和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。全球范圍內(nèi)，每年抗生素使用情況約為200萬(wàn)噸，僅在中國(guó)每年就有25萬(wàn)噸。而這些抗生素只有少部分在生物體中，高達(dá)80％以上會(huì)通過(guò)尿液和糞便排泄進(jìn)入自然環(huán)境中。抗生素在動(dòng)物體內(nèi)殘留后有積累效應(yīng)，達(dá)到一定量時(shí)會(huì)產(chǎn)生毒害作用，若長(zhǎng)期攝入抗生素，藥物在體內(nèi)緩慢蓄積達(dá)到一定濃度時(shí)可導(dǎo)致急慢性中毒甚至是器官的病變。此外，抗生素可以直接殺死某些環(huán)境介質(zhì)中的微生物或抑制微生物的生長(zhǎng)，從而影響微生物群落結(jié)構(gòu)和活性。同時(shí)，抗生素由水體進(jìn)入土壤環(huán)境后可被植物吸收富集，通過(guò)食物鏈進(jìn)入人體。因此，在準(zhǔn)確測(cè)定水環(huán)境中抗生素含量的基礎(chǔ)上，采取相應(yīng)的控制措施已成為重中之重。

目前，有關(guān)水體環(huán)境中抗生素檢測(cè)的分析方法已經(jīng)引起了廣泛關(guān)注，研究進(jìn)展如下：中國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)CN101639466A公開(kāi)了一種針對(duì)水環(huán)境中磺胺類(lèi)抗生素的 SPE-HPLC方法；中國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)CN101696964A公開(kāi)了一種測(cè)定水環(huán)境中氟喹諾酮的SPE-HPLC-熒光方法；中國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)CN103336080A公開(kāi)了一種同時(shí)檢測(cè)水中四環(huán)素類(lèi)的HLB-HPLC-MS/MS方法。中國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)CN103344715A公開(kāi)了一種采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法定量檢測(cè)水中青霉素類(lèi)抗生素的方法。中國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)CN103278587A公開(kāi)了一種針對(duì)水環(huán)境中三種頭孢類(lèi)抗生素的HLB-HPLC-MS 方法。中國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)CN102269747A公開(kāi)了一種一次性測(cè)定養(yǎng)殖場(chǎng)動(dòng)物糞便、土壤、水體等環(huán)境樣本中四環(huán)素類(lèi)、氯霉素類(lèi)和磺胺類(lèi)共6種抗生素含量的方法。

但上述這些方法仍存在一些缺陷，由于實(shí)際環(huán)境中污染物的種類(lèi)多、濃度較低，不同抗生素的理化性質(zhì)和存在形態(tài)差異性較大，環(huán)境基質(zhì)較為復(fù)雜，準(zhǔn)確地測(cè)定環(huán)境中抗生素含量具有很大的挑戰(zhàn)。之前多數(shù)研究?jī)H針對(duì)幾種或某一類(lèi)抗生素的共檢測(cè)，但環(huán)境中抗生素的種類(lèi)繁多，人們對(duì)飲用水安全標(biāo)準(zhǔn)的要求日益提高，擁有高效、快速、準(zhǔn)確富集凈化和同步分析水環(huán)境中抗生素的技術(shù)是必不可少的。固相萃取(SPE)結(jié)合液相色譜-質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)具有應(yīng)用范圍廣、分離能力強(qiáng)、靈敏度高和分析速度快等特點(diǎn)，目前已成為有機(jī)物預(yù)處理和分析的重要方法之一。但現(xiàn)有的固相萃取結(jié)合液相色譜-質(zhì)譜法用于水環(huán)境中抗生素的檢測(cè)時(shí)，大多由于預(yù)處理不好，或固相萃取前處理?xiàng)l件、液相色譜條件和/或質(zhì)譜條件選得不好，或多或少存在著檢測(cè)結(jié)果不夠準(zhǔn)確、不穩(wěn)定、干擾多、有機(jī)試劑消耗大、檢測(cè)抗生素?cái)?shù)量和范圍有限等問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的旨在克服現(xiàn)有方法中存在的有機(jī)試劑消耗大、耗時(shí)久、干擾多以及檢測(cè)抗生素?cái)?shù)量和范圍有限等問(wèn)題，提供一種檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定，干擾少，有機(jī)試劑用量少，檢測(cè)過(guò)程耗時(shí)少，能同時(shí)測(cè)定水環(huán)境(飲用水、自來(lái)水、地表水、污水處理廠(chǎng)進(jìn)出水)中六類(lèi)(磺胺類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)、氟喹諾酮類(lèi)、大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、酰胺醇類(lèi)和青霉素類(lèi))24種不同結(jié)構(gòu)抗生素的方法，即一種固相萃取前處理技術(shù)結(jié)合液質(zhì)聯(lián)用測(cè)定水體中24種抗生素的方法。它通過(guò)對(duì)固相萃取前處理、液相色譜條件和質(zhì)譜條件的優(yōu)化，最終能夠?qū)崿F(xiàn)快速檢測(cè)，適用對(duì)象廣，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確，穩(wěn)定，靈敏，干擾少，從而為水體中微量有機(jī)物的安全檢測(cè)提供了一種新型可靠的方法。

本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：

一種固相萃取-液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)檢測(cè)水體中六類(lèi)24種抗生素的方法，即一種富集凈化并同時(shí)檢測(cè)水中磺胺類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)、氟喹諾酮類(lèi)、大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、酰胺醇類(lèi)和青霉素類(lèi)這六類(lèi)24種抗生素的方法(24種抗生素分別為磺胺甲惡唑、磺胺嘧啶、磺胺氯噠嗪、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺二甲異惡唑、磺胺間二甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、阿奇霉素、克拉霉素、紅霉素、螺旋霉素、替米考星、環(huán)丙沙星鹽酸鹽、氟羅沙星、氧氟沙星、恩諾沙星、鹽酸土霉素、金霉素鹽酸鹽、阿莫西林三水合物、青霉素G甲鹽、甲砜霉素、氟甲砜霉素、氯霉素、鹽酸氯苯胍)，按以下步驟實(shí)施：

(1)水樣的預(yù)處理

采集水樣，水樣過(guò)濾除去懸浮顆粒物，用酸調(diào)節(jié)pH至3.0-4.0；固相萃取前加入內(nèi)標(biāo)物指示回收率；