[發明專利]一種黑木耳液體菌種及其制備方法

在審

• 申請號: 201710426245.4
• 申請日: 2017-06-08
• 公開（公告）號: CN107245454A
• 公開（公告）日: 2017-10-13
• 發明（設計）人: 孫德光;張強;鄭偉基;譚英群;王磊
• 申請（專利權）人: 威海鑫寶食品有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業)37240
• 代理人: 李茜

技術領域

本發明涉及食用菌技術領域，尤其涉及一種黑木耳液體菌種及其制備方法。

背景技術

黑木耳是一種營養豐富的食用菌，又是我國傳統的保健食品和出口商品。目前，大多數黑木耳栽培仍然采用傳統的母種、原種、栽培種的固體培養模式，這種方式存在周期長，污染率高，菌齡不一致等缺點。

基于上述周期長的缺點，越來越多的人們采用液體菌種來栽培黑木耳，這種液體菌種栽培方式的周期短，通常液體菌種是通過發酵罐一次發酵獲得，這種方式獲得的液體菌種存在發酵不均勻，成活率低，菌種萌發期長等缺點。

發明內容

本發明針對現有技術的不足，提供一種黑木耳液體菌種及其制備方法，提高菌種成活率。

本發明是通過如下技術方案實現的，提供一種黑木耳液體菌種的制備方法，所述方法包括如下步驟：

S01：購買黑木耳菌種，并保存于PDA斜面培養基上；

S02：將150ml液體培養基加入至500ml的三角瓶中，滅菌并冷卻后接入所述步驟S01中的菌種，旋轉式搖床，轉速160～200r/min，在溫度24～28℃條件下培養5～8天；

S03：將所述步驟S02獲得的菌種接入滅菌并冷卻后的發酵罐一次發酵培養基上，在發酵罐內保持恒溫24～28℃，通入無菌空氣培養4～6天；

S04：將所述步驟S03獲得的菌種接入滅菌并冷卻后的發酵罐二次發酵培養基上，在發酵罐內保持溫度24～28℃，通入無菌空氣培養2～3天，獲得黑木耳液體菌種。

本發明的方法中采用兩次發酵制備黑木耳液體菌種，相比一次發酵，二次發酵在等量原種的情況下增大接種量三到四倍，節約生產成本；且二次發酵使液體發酵液中的營養成分維持在適宜的水平，既利于菌絲在液體環境中生長，又能讓菌絲在接入菌棒后的萌發階段更快適應；最主要的是二次發酵使菌種發酵的更均勻，更充分，提高了菌種的成活率。

作為優選，所述步驟S02中，所述液體培養基包括如下質量分數的組分：

麩皮：10%，玉米粉：5%．葡萄糖：1%，KH₂P0₄：0.1%，MgS0₄：0.1%，蛋白胨：0.1%，余量為水。

蛋白胨作為速效氮源，滿足菌種快速萌發的需要。磷酸二氫鉀提供微量元素，并且起到緩沖PH值的作用。

作為優選，所述步驟S02中，所述液體培養基的滅菌方法為：將所述液體培養基加熱至121～125℃保持1～3小時。

作為優選，所述步驟S03中，所述發酵罐一次發酵培養基包括如下質量分數的組分：

麩皮：5%，玉米粉：10%．葡萄糖：2%，KH₂P0₄：0.2%，MgS0₄：0.1%，余量為水。

玉米粉既是氮源，又是碳源，為培養基提供較為全面的營養。硫酸鎂能激發酶活性，提高菌絲活力。

作為優選，所述步驟S03中，所述發酵罐一次發酵培養基的滅菌方法為：將所述發酵罐一次發酵培養基在發酵罐中加熱至118～125℃保持1～3小時。

作為優選，所述步驟S04中，所述發酵罐二次發酵培養基包括如下質量分數的組分：

土豆汁：15%，玉米粉：5%．葡萄糖：2%，KH₂P0₄：0.2%，MgS0₄：0.1%，余量為水。

土豆汁作為碳源。

作為優選，所述步驟S04中，所述發酵罐二次發酵培養基的滅菌方法為：將所述發酵罐二次發酵培養基在發酵罐中加熱至118～125℃保持1～3小時。

本發明還提供一種采用上述方法制備得到的黑木耳液體菌種。

本發明實施例提供的技術方案可以包含以下有益效果：

本發明提供一種黑木耳液體菌種的制備方法，所述方法包括母種制備、液體搖瓶制備、發酵罐一次發酵、發酵罐二次發酵等步驟，在發酵罐進行一次發酵之后繼續進行二次發酵，相比一次發酵制備的液體菌種，本發明的二次發酵方法在等量原種的情況下增大接種量三到四倍，節約生產成本；且二次發酵使液體發酵液中的營養成分維持在適宜的水平，既利于菌絲在液體環境中生長，又能讓菌絲在接入菌棒后的萌發階段更快適應；最主要的是二次發酵使菌種發酵的更均勻，更充分，提高了菌種的成活率。

具體實施方式