[發明專利]小球藻的丙環唑抗性突變體

在審

• 申請號: 201710408148.2
• 申請日: 2017-06-02
• 公開（公告）號: CN107619789A
• 公開（公告）日: 2018-01-23
• 發明（設計）人: 池傳舒·庫馬爾;尼拉嘉·索尼;拜德瑞施·然基特勒·索尼;高特姆·達斯;桑塔駑·達斯古塔
• 申請（專利權）人: 瑞來斯實業公司
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12N13/00;C12N15/01;C12R1/89
• 代理公司: 北京商專永信知識產權代理事務所(普通合伙)11400
• 代理人: 葛強,黃謙

技術領域

本發明涉及小球藻(Chlorella species)的丙環唑抗性突變體(propiconazole resistant mutants)。

背景技術

定義

正如本發明所使用的，除非在文中另有所指，否則以下術語通常旨在具有如下所述的含義。

草食性動物：術語“草食性動物”是指水生害蟲，如輪蟲類(rotifers)、腰鞭毛蟲類(dinoflagellates)、纖毛蟲類(ciliates)，原生動物以及真菌，其降低了藻類生物量/生產的產量。

污染生物體：術語“污染生物體”是指在利用資源的同時與藻類競爭并隨后導致藻類生物量減少的絲狀單細胞藍藻細菌(cyanobacteria)、鞭毛蟲類(flagellates)、硅藻類(diatoms)等。

藻類：術語“藻類”是指一個大型、多樣化的真核生物群體的非正式術語，真核生物不一定密切相關，因此是多樣性的。所包括的生物體范圍從單細胞屬(如小球藻)到多細胞形態(如巨藻，一種長達50米長的大型褐藻)。

丙環唑：丙環唑是一種三唑殺真菌劑，也被稱為DMI，或脫甲基化抑制殺真菌劑，由于與14-α脫甲基酶的結合以及抑制14-α脫甲基酶將前體脫甲基為麥角固醇。沒有該脫甲基化步驟，麥角固醇不被并入生長的真菌細胞膜中，并停止細胞生長。

背景技術

以非常低的成本獲得大量藻類生物量的主要挑戰是獲得藻類的連續穩定的生產。為了達到這個目的，藻類必須在開放式池塘中以足夠高的密度在近一年內穩定地培養。然而，在開放式池塘培養的藻類容易受到非生物和生物脅迫，導致頻繁的培養沖突和生產力損失。在很大程度上可以通過生物勘探、篩選和為特定地理位置和季節選擇正確種類的藻類菌株來提防非生物脅迫。管理開放式池塘中的污染物，同時為保證生物燃料成功生產所需的藻類的高生產力是非常困難的。

草食性動物和污染生物體是藻類培養中的主要問題。纖毛蟲類、腰鞭毛蟲類、輪蟲類、硅藻類、絲狀單細胞藍藻細菌、鞭毛蟲類等與藻類喂養或競爭營養物質，導致藻類生物量減少。已知各種化學物質，其可以用于殺死草食性動物和污染生物體，然而，這些化學物質對藻類生長也具有有害影響。

因此，感到需要大規模生產藻類，以減輕上述缺點。

發明內容

發明目的

此處的至少一種實施方案滿足的本發明的一些目的如下：

本發明的一個目的是改善現有技術中的一個或多個問題或至少提供一種有用的替代方案。

本發明的一個目的是提供小球藻(Chlorella sp.)的丙環唑抗性突變體。

本發明的另一個目的是提供一種用于制備小球藻的丙環唑抗性突變體的方法。

本發明的另一個目的是提供使用丙環唑抗性選擇而呈現增強的作物保護、增加的生物量的小球藻的丙環唑抗性突變體。

本發明的另一個目的是提供一種使用小球藻的丙環唑抗性突變體通過控制水生環境中的草食性動物和污染生物體來選擇性地提高小球藻的產量的方法。

本發明的其它目的和優點將在以下描述中更加明顯，但以下的描述并不意味著限制本發明的范圍。

發明內容

本發明涉及小球藻的丙環唑抗性突變體。一方面，小球藻的丙環唑抗性突變體具有藻類和原生動物保藏中心(The Culture Collection of Algae and Protozoa，CCAP)保藏號CCAP 211/133的特征，對丙環唑具有增加的耐受性。相對于使用小球藻的丙環唑抗性突變體后的生物量產率的增加來確定耐受性的增加，其中生物量產率的增加在10％至30％的范圍內。

具有保藏號CCAP 211/133的小球藻的丙環唑抗性突變體通過以下方式制備：對小球藻細胞進行UV輻射，復原經UV處理的小球藻培養物，并用預先確定濃度的丙環唑處理復原的經UV處理的小球藻培養物，以獲得對丙環唑具有抵抗性的小球藻的丙環唑抗性突變體的藻種(strains)。然后將藻種分離，并將各藻種在培養基中分別培養，以鑒定并獲得在10％至30％的范圍內呈現出生物量產率增加的藻種，具有保藏號CCAP 211/133。