[發明專利]一種利用聚苯乙烯球的細胞周期散射光強模型建立方法

有效

• 申請號: 201710404246.9
• 申請日: 2017-06-01
• 公開（公告）號: CN107202773B
• 公開（公告）日: 2019-07-05
• 發明（設計）人: 林曉鋼;翁凌冬;宛楠;朱濠
• 申請（專利權）人: 重慶大學
• 主分類號: G01N21/47
• 分類號: G01N21/47
• 代理公司: 重慶博凱知識產權代理有限公司 50212
• 代理人: 黃河

本發明提供了一種利用聚苯乙烯球的細胞周期散射光強模型建立方法，該方法利用不同粒徑聚苯乙烯球的懸液建立得到用以作為對活體生物細胞周期進行散射光強檢測參照標準的細胞周期散射光強模型，且聚苯乙烯球的性質穩定，也不會產生因細胞分裂生長而導致細胞周期不斷變化，因此能夠得以永久保存，解決了現有技術中永久保存的細胞周期散射光強檢測參照標準難以制作的問題；并且，由于不同粒徑聚苯乙烯微球稀釋成不同梯度的濃度時，呈現出角度依賴光散射特性與細胞周期中不同時相的光散射特性相符合或經過修正后符合，因此采用本發明方法建立的細胞周期散射光強模型具有很好的普適性，為未來完善更多種類細胞周期光散射光強模型提供了可擴展的思路。

技術領域

本發明涉及生物檢測技術領域，尤其涉及細胞檢測技術，具體涉及一種利用聚苯乙烯球的細胞周期散射光強模型建立方法。

背景技術

細胞周期是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程，分為間期與分裂期兩個階段。其中，間期又分為三期、即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成后期（G2期）。分裂期（M期）分為前期、中期、后期和末期。

細胞周期理論不僅為腫瘤的研究提供重要的理論依據，而且細胞周期是腫瘤化療的理論基礎。精準的抗腫瘤藥物可以直接針對不同周期的癌細胞進行滅殺，從而達到治療的目的。因此，利用相關散射光強技術對不同周期的癌細胞進行分析測量對癌癥的治療診斷具有重要意義。

在利用散射光強技術對活體生物細胞周期進行檢測時，其標準散射光強信息的建立至關重要。然而，由于活體生物細胞在培養器皿內難以永久的存活，并且生物細胞在存活期間也會不斷分裂生長而導致細胞周期不斷變化，因此很難利用生物細胞制作和保存每個固定細胞周期的散射光強檢測參照標準。目前尚無其他有效的細胞周期散射光強模型建立方法。

發明內容

針對現有技術中存在的上述不足，本發明的目的在于提供一種利用聚苯乙烯球的細胞周期散射光強模型建立方法，其利用不同粒徑聚苯乙烯球的懸液建立各個不同細胞周期的細胞周期散射光強模型，能夠用以作為永久保存的對活體生物細胞周期進行散射光強檢測的參照標準，解決現有技術中永久保存的細胞周期散射光強檢測參照標準難以制作的問題。

為解決上述技術問題，本發明采用了如下的技術方案：

一種利用聚苯乙烯球的細胞周期散射光強模型建立方法，預先制作具有指定濃度的不同粒徑聚苯乙烯球的懸液，利用廣角光散射儀分別進行散射光強度測量，得到各不同粒徑聚苯乙烯球的懸液各自對應的散射光強度分布曲線；然后采用各不同細胞周期的細胞樣品分別制成具有同樣指定濃度的對應各不同細胞周期的細胞懸液，在相同測量條件下利用廣角光散射儀分別進行散射光強度測量，得到各個細胞周期的細胞懸液各自對應的散射光強度分布曲線，并與預先得到的各不同粒徑聚苯乙烯球的懸液的散射光強度分布曲線進行對比，分別確定各個不同細胞周期的細胞懸液的散射光強度分布曲線各自所匹配的聚苯乙烯球懸液，從而將匹配得到的各粒徑聚苯乙烯球的懸液作為細胞周期散射光強模型。

上述利用聚苯乙烯球的細胞周期散射光強模型建立方法中，具體而言，具體包括下述步驟：

1）預先制作具有指定濃度的不同粒徑聚苯乙烯球的懸液并裝入玻璃試管內，分別搖勻后，利用廣角光散射儀分別測量每種粒徑聚苯乙烯球的懸液在0~180°范圍內每間隔5°上的散射光強度，根據測量結果，得到各不同粒徑聚苯乙烯球的懸液各自對應的散射光強度分布曲線；

2）采用G1期、S期、G2期和M期的細胞樣品，分別制成具有同樣指定濃度的對應G1期、S期、G2期和M期的細胞懸液并裝入玻璃試管內，分別搖勻后，在相同測量條件下，利用廣角光散射儀分別測量每個細胞周期的細胞懸液在0~180°范圍內每間隔5°上的散射光強度，根據測量結果，得到G1期、S期、G2期和M期的細胞懸液各自對應的散射光強度分布曲線；