[發明專利]含有FGFR，磷脂雙分子層和膜骨架蛋白MSP的類膜體系及其制備方法

在審

• 申請號: 201710402086.4
• 申請日: 2017-05-31
• 公開（公告）號: CN107090030A
• 公開（公告）日: 2017-08-25
• 發明（設計）人: 王俊峰;趙宏鑫;劉娟娟
• 申請（專利權）人: 中國科學院合肥物質科學研究院
• 主分類號: C07K14/71
• 分類號: C07K14/71;C07K16/00
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司11021
• 代理人: 穆彬

技術領域

本發明屬于生物技術領域，尤其是涉及含有磷脂雙分子層的FGFR的類膜體系及其組裝方法。

背景技術

成纖維細胞生長因子受體屬于酪氨酸(Fibroblast Growth Factor Receptor，FGFRs)激酶超家族中的成員。人類FGFR家族具有四個成員，FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4。FGFR家族在生物體的生理和代謝活動中具有十分重要的功能，包括胚胎發育、受傷組織修復、血管的生成、細胞增殖、細胞遷移和細胞分化等，異常的信號通路可能會導致癌癥的發生。因此，FGFRs成為了腫瘤學中潛在的藥物靶標，研究FGFRs的信號通路、作用機制和原理對相關的疾病研究和藥物開發具有十分重要的意義。

FGFR在結構上一般分為三個部分，膜外配體結合區、跨膜區、膜內激酶區。在蛋白質水平上FGFR1、FGFR2、FGFR3和FGFR4大約有55％～72％的同源序列，因此具有很高的同源性。膜外區主要包括一個疏水的信號肽段，2～3個類免疫球蛋白結構域(D1～D3)，在D1區和D2區之間有一個～30個蘇氨酸的酸盒，D2和D3結構區是結合配體(FGF)和硫酸肝素(HPSG)的區域；跨膜區的功能是把物質和信號從膜外區傳送到膜內區；在膜內區的部分，靠近細胞膜的區段被稱為近膜區，近膜區連接著膜內的酪氨酸激酶區域；在膜內區最末端是C端。體外對FGFR的研究還只限制在FGFR的單結構域的研究，沒有在整體的結構水平下對FGFR的功能進行研究，因此，如果能夠在體外構建一種含有磷脂雙分子層的FGFR的類膜體系(包括FGFR的包含跨膜區，膜外配體結合區，膜內激酶區)，模擬天然的FGFR的生理條件，對于真實和準確的研究FGFR的功能具有深遠的意義，同時利用所述類膜體系為FGFR的功能研究，FGFR抗體的制備及FGFR抑制劑的篩選及改造，提供了有利的工具。

發明內容

為了解決上述問題，本發明人經過深入研究，開發出人造的含有磷脂雙分子層的FGFR的類膜體系及其制備方法，并在多個方面利用所述人造的含有磷脂雙分子層的FGFR的類膜體系。

具體而言，本發明提供一種人造的含有磷脂雙分子層的FGFR的類膜體系，所述類膜體系包含：

1)成纖維細胞生長因子受體(fibroblastgrowthfactorreceptor，FGFR)，

2)磷脂雙分子層，

3)膜骨架蛋白(Membrane Scaffoldprotein，MSP)，

其中，MSP包裹磷脂形成磷脂雙分子層，FGFR的胞外區在磷脂雙分子層的一側，FGFR的胞內區在磷脂雙分子層的另一側，FGFR的跨膜區由磷酸雙分子層包裹，并貫穿整個磷脂雙分子層。

在優選的實施方案中，所述磷脂雙分子層是碟狀的。

在優選的實施方案中，所述FGFR包括FGFRlc(其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示)、FGFR1b(其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示)、FGFR2c(其氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示)、FGFR2b(其氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示)、FGFR3c(其氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示)、FGFR3b(其氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示)、FGFR4(其氨基酸序列如SEQ ID NO：7所示)，或在包含跨膜區的前提下與上述任意一種具有60％以上，優選80以上，還優選95％以上，更優選99％以上的同源性的氨基酸序列。