[發明專利]一種毒死蜱抗原及其制備方法在審
| 申請號： | 201710383757.7 | 申請日： | 2017-05-26 |
| 公開（公告）號： | CN107163081A | 公開（公告）日： | 2017-09-15 |
| 發明（設計）人： | 鄒曉蘭;徐波;周麗;袁杰;李林 | 申請（專利權）人： | 無錫中德伯爾生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C07F9/58 | 分類號： | C07F9/58;C07K14/765 |
| 代理公司： | 北京品源專利代理有限公司11332 | 代理人： | 鞏克棟 |
| 地址： | 214174 江蘇省無錫市惠山區惠*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 毒死 抗原 及其 制備 方法 | ||
1.一種毒死蜱半抗原，其特征在于，所述毒死蜱半抗原的化學結構式如式(I)所示：
2.如權利要求1所述的毒死蜱半抗原的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
將毒死蜱與巰基丙酸按照1:(2～2.5)的摩爾比反應，得到所述毒死蜱半抗原。
3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述反應在有機溶劑中進行；
優選地，所述有機溶劑為含有NaOH的乙醇溶液；
優選地，所述反應的時間為2～4h。
4.如權利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：
(1)向毒死蜱的乙醇溶液中邊攪拌邊加入NaOH，再加入巰基丙酸的乙醇溶液，毒死蜱與巰基丙酸的摩爾比為1:(2～2.5)，回流反應2～4h；
(2)反應完全后，抽濾出固體，濾液旋轉蒸發干，殘余物中加入5％的NaHCO3溶液，用正己烷萃取，棄去有機相，水相用鹽酸調pH值至3～4，再用二氯甲烷萃取三次，有機相用無水NaSO4干燥過夜后，旋轉蒸發干，過硅膠柱純化，得到所述毒死蜱半抗原。
5.一種毒死蜱抗原，其特征在于，所述毒死蜱抗原由權利要求1所述的毒死蜱半抗原與載體蛋白偶聯得到。
6.如權利要求5所述的毒死蜱抗原，其特征在于，所述毒死蜱半抗原與載體蛋白通過酰胺鍵偶聯；
優選地，所述毒死蜱半抗原與載體蛋白偶聯的摩爾比為(25～30):1。
7.如權利要求5或6所述的毒死蜱抗原，其特征在于，所述載體蛋白為牛血清白蛋白；
優選地，所述毒死蜱抗原的化學結構式如式(II)所示：
8.如權利要求5-7之一所述的毒死蜱抗原的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
將所述毒死蜱半抗原、載體蛋白、三正丁胺和氯甲酸異丁酯在硼酸鹽緩沖液中反應，得到所述毒死蜱抗原。
9.如權利要求8所述的方法，其特征在于，所述載體蛋白、毒死蜱半抗原、三正丁胺、氯甲酸異丁酯和硼酸鹽緩沖液的配比為：100mg:0.09mol:23μl:11μl:5ml；
優選地，所述硼酸鹽緩沖液的pH值為8.5，其濃度為0.1mol/L。
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