[發(fā)明專利]一種L型淀粉酶變體及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710377634.2
• 申請日: 2017-05-25
• 公開（公告）號: CN107326020B
• 公開（公告）日: 2020-06-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 范巖;杜秀貞;郝名慧;盧嫣紅;孫燕;徐紅
• 申請（專利權(quán)）人: 南京百斯杰生物工程有限公司
• 主分類號: C12N9/28
• 分類號: C12N9/28;C12N15/56;C12N15/75;C12P19/14;C12P19/04
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 32218
• 代理人: 傅婷婷;夏平

1.一種α淀粉酶變體， 其特征在于所述的α淀粉酶變體的氨基酸序列如序列表中SEQID NO.4所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的α淀粉酶變體，其特征在于所述的α淀粉酶變體的核苷酸編碼序列如序列表中SEQ ID NO.3所示。

3.編碼權(quán)利要求1~2中任一項(xiàng)所述的α淀粉酶變體的基因。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基因，其特征在于核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.3所示。

5.用于表達(dá)權(quán)利要求1~2中任一項(xiàng)所述的α淀粉酶變體的表達(dá)載體，其特征在于所述的表達(dá)載體包括主要由SEQ ID NO .5所示的啟動子序列，一個天然或合成的核糖體結(jié)合位點(diǎn)aaaggagg， SEQ ID NO.3所示的編碼α淀粉酶變體的基因序列和SEQ ID NO.6所示的合成的終止序列同組成了一個表達(dá)組件，以及SEQ ID: NO.7所示的被插入到α淀粉酶變體編碼基因啟動子的上游的天然信號序列。

6.一種用于表達(dá)權(quán)利要求1~2中任一項(xiàng)所述的α淀粉酶變體的重組細(xì)胞，其特征在于包含權(quán)利要求5所述的表達(dá)載體；重組細(xì)胞的宿主細(xì)胞選自經(jīng)過基因工程改造失活了AprE和/或Blase的B. licheniformis。

7.一種權(quán)利要求1~2中任一項(xiàng)所述的α淀粉酶變體的生產(chǎn)方法，其特征在于包括在適宜α淀粉酶變體表達(dá)的條件下對權(quán)利要求6所述的重組細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，并從重組細(xì)胞或者其培養(yǎng)上清液中獲得α淀粉酶變體。

8.權(quán)利要求1~2中任一項(xiàng)所述的α淀粉酶變體在水解多糖的α-1,4糖苷鍵中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于所述的α淀粉酶變體在高溫和/或低pH條件下水解多糖的α-1,4糖苷鍵中的應(yīng)用。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于所述的高溫為80℃~110℃。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的應(yīng)用，其特征在于所述的高溫為100℃~110℃。

12.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于所述的低pH為5.0~5.8。