[發(fā)明專利]甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710371468.5
• 申請日: 2017-05-24
• 公開（公告）號: CN107267412B
• 公開（公告）日: 2020-04-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 謝曉梅;廖敏;呂婷;方至萍
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01P3/00;C12R1/07
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

本發(fā)明公開了一種甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌及其在制備植物病原菌殺菌劑中的應(yīng)用，本發(fā)明甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌CGMCC No.13541對多種植物病原菌，如草莓灰霉病菌、小麥赤霉病菌、立枯絲核菌具有拮抗作用，是一種防治植物病害防治效果顯著并且環(huán)境友好的拮抗菌株，具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。在牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基培養(yǎng)得到的發(fā)酵液均可用于防治植物病害，對草莓灰霉病菌抑菌率高達(dá)84％，高出普通生防菌8％左右，為新的防病微生物資源的開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。抗逆能力強(qiáng)，使用范圍廣。生長速度快，能夠快速大量定殖，便于制備生物防治制劑在田間進(jìn)行推廣應(yīng)用。

(一)技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種分離自草莓大棚土壤的甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌(Bacillusmethylotrophicus)LM-N，及其在防治草莓灰霉病中的應(yīng)用。

(二)背景技術(shù)

由葡萄孢屬真菌(Botrytis spp.)引起的灰霉病是一類重要的植物病害，在草莓、葡萄、番茄、萵苣、黃瓜等果蔬上都較常有侵害的發(fā)生。不同時(shí)期發(fā)病可能引起植物在幼苗期的猝倒病或花朵和果實(shí)的腐爛病，已發(fā)展成為影響保護(hù)地蔬菜、水果和花卉生產(chǎn)或儲藏過程中防腐保鮮的重要病害之一。灰霉病可使保護(hù)地蔬菜減產(chǎn)達(dá)到20％以上，病源控制或栽培措施不當(dāng)?shù)膰?yán)重地區(qū)甚至面臨絕產(chǎn)。在我國草莓已被列入發(fā)展農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的十大支柱產(chǎn)業(yè)之一，可見其經(jīng)濟(jì)和營養(yǎng)價(jià)值之高。草莓的栽培都采用大棚技術(shù)，使生育期縮短，產(chǎn)量提高，然而大棚內(nèi)的小氣候環(huán)境一般濕度較高，且冬、春季節(jié)平均溫度也高于室外，這些環(huán)境條件對于灰霉病害的發(fā)生都十分有利，已經(jīng)成為限制草莓品質(zhì)和產(chǎn)量提高的重要因素，草莓灰霉病的防治措施直接決定了草莓的產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)效益。

目前，對草莓灰霉病的防治主要通過抗病育種、農(nóng)業(yè)栽培防治、化學(xué)農(nóng)藥防治和生物防治這幾條途徑同時(shí)進(jìn)行。由于灰霉病是一種兼性寄生菌，也存在腐生階段，而目前尚未發(fā)現(xiàn)其的抗原，使得抗病育種難以實(shí)施；農(nóng)業(yè)栽培防治則主要通過加強(qiáng)對田間的水肥管理，調(diào)節(jié)溫度、濕度和光照等，這樣一來就要求田間條件的控制設(shè)施齊全，在我國草莓種植戶的現(xiàn)有條件下還未能實(shí)現(xiàn)；目前化學(xué)農(nóng)藥防治仍然是我國防治草莓灰霉病的主要手段，但是由于連續(xù)使用化學(xué)藥劑，特別是連續(xù)使用單一的藥劑，導(dǎo)致灰霉病病菌逐漸產(chǎn)生了抗藥性，化學(xué)農(nóng)藥的防治效果也逐年下降,而且施藥時(shí)農(nóng)藥噴灑無法避免直接噴灑到果實(shí)表面上，果實(shí)上殘留的藥劑也造成了果實(shí)的農(nóng)藥污染。近年來人們著眼于開發(fā)利用有益微生物及其代謝產(chǎn)物等來防治灰霉病，因?yàn)槠鋵Νh(huán)境安全且效果顯著，受環(huán)境條件影響較小，用這種生物防治的手段來控制草莓灰霉病己經(jīng)逐漸發(fā)展成為一條重要且有潛力的防治途徑，應(yīng)用前景廣泛，是未來防治草莓灰霉病必然趨勢之一。

(三)發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是提供一株對多種植物病原菌具有良好拮抗作用的菌株-甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌(Bacillus methylotrophicus)LM-N。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

本發(fā)明提供一種分離自草莓灰霉病患病植株根圍土壤的甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌(Bacillus methylotrophicus)LM-N，該菌株的形態(tài)特征如下：形狀為桿狀，革蘭氏陽性，芽孢橢圓，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上30℃培養(yǎng)48h，菌落呈圓形，乳白色、不透明、中央隆起有褶皺，邊緣呈鋸齒狀。保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學(xué)院微生物研究所，100101，保藏編號：CGMCCNo.13541，保藏日期：2017年01月06日。

本發(fā)明還提供一種所述甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌LM-N在制備植物病原菌殺菌劑中的應(yīng)用，所述的植物病原菌為草莓灰霉病菌、小麥赤霉病菌或立枯絲核菌。

進(jìn)一步，所述殺菌劑含有甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌LM-N經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)獲得的發(fā)酵液。