[發明專利]一種檢測生鮮乳中4種巴比妥類鎮靜藥物的方法

有效

• 申請號: 201710368585.6
• 申請日: 2017-05-23
• 公開（公告）號: CN107202840B
• 公開（公告）日: 2019-06-28
• 發明（設計）人: 田懷香;周興鑫;陳臣;何亞斌;孟瑾
• 申請（專利權）人: 上海應用技術大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 吳寶根

本發明公開了一種檢測生鮮乳中4種巴比妥類鎮靜藥物的方法，將待測生鮮乳和乙腈溶液混合，震蕩，超聲，加入無機鹽A，離心；上清液氮氣吹干，用乙腈水溶液定容，待凈化用；所述酸為甲酸或乙酸；先用甲醇和乙腈水溶液預洗柱，將待凈化定容液過柱后，超純水洗柱，真空抽干；二氯甲烷洗脫，控制流速，洗脫液于氮氣吹干，乙腈水溶液定容，待上機用；將預處理方法得到的待測生鮮乳溶液進行高效液相色譜?質譜聯用檢測分析。本發明檢測方法中的預處理方法能有效地提高生鮮乳中巴比妥類藥物的提取率，且顯著提高了巴比妥類藥物在生鮮乳中的回收率，方法簡便、經濟、可靠，有效地降低了生鮮乳的基質影響，靈敏度、重復率和回收率好。

技術領域

本發明屬于食品領域，涉及一種食品的安全檢測方法，具體來說是一種檢測生鮮乳中4種巴比妥類鎮靜藥物的方法。

背景技術

巴比妥類(Barbiturates)是普遍性中樞抑制藥，包括苯巴比妥(Phenobarbital)、戊巴比妥(Pentobarbital)、異戊巴比妥(Amobarbital)、司可巴比妥(Secobarbital)等安眠鎮靜藥物，獸藥臨床用作鎮靜劑和化學保定，可引起近似生理性睡眠，主要表現在對中樞神經系統的抑制，還能抑制延腦的呼吸中樞及血管運動中樞。抑制中樞神經的深度，一般與劑量成比例。小劑量起鎮靜作用，中等劑量有催眠作用，大劑量起麻醉作用。量大時對循環系統和呼吸系統也產生抑制作用，服用過量易造成急性死亡，致死期一般多在服藥后10天左右，長期服用易產生藥物積累，導致死亡。人食入殘留有巴比妥類藥物的動物組織，可導致頭暈、惡心、嘔吐，長期攝入可能產生耐受性和成癮性。許多國家嚴禁將巴比妥藥物用于人類，也禁止其作為飼料添加劑，我國的農業部第178號公告中就明確規定嚴禁將巴比妥、苯巴比妥、苯巴比妥鈉、戊巴比妥、戊巴比妥鈉添加到飼料和動物飲用水中。此外，獸藥臨床規定了巴比妥藥物的休藥期，防止動物體內該類藥物蓄積濃度過高而影響食用者安全。

牛奶的安全質量問題關系國計民生，其中生鮮乳的質量控制是牛奶生產的重要前提。然而，從我國國內養殖環境來看，在我國大部分地區，特別是廣大農村地區的動物和飼料生產過程中仍存在使用違禁獸藥的情況。為了防止巴比妥類藥物在產品化過程中的傳播與積累，將生鮮乳作為重要的一種生物檢材并對其巴比妥類藥物進行檢測對于保障乳制品安全具有重要意義。

目前，現有技術公開的測定巴比妥類藥物殘留的生物檢材主要是人血、血清、血漿、飼料、尿液等其他生物組織。方法主要有薄層色譜法、毛細管電泳法、高效液相色譜法、氣相色譜法、氣相色譜-質譜聯用法、液相色譜-質譜聯用法等。其中，液相色譜法以及液相色譜-質譜聯用法對于巴比妥類藥物的檢測制備要求較低，只要能將巴比妥類藥物制備成溶液且凈化后，就能用于液相分析。另外，液相色譜相對氣相色譜而言，靈敏度高，分析范圍廣，分析時間短等優點，近年來已經廣泛運用于巴比妥等類別獸藥化合物的分析，且涵蓋的生物檢材也十分廣泛。除此之外，由于不同樣品的基質特點不同，預處理方法會有很大的差異。然而，目前還沒有將生鮮乳作為生物檢材并檢測其中巴比妥類藥物的方法報導。由于生鮮乳中富含蛋白質和脂肪，如何對其中可能含有的巴比妥類獸藥化合物進行提取、凈化，提高其在生鮮乳中的回收率和靈敏度已經成為亟待解決的問題。

發明內容

針對現有技術中的上述技術問題，本發明提供了一種檢測生鮮乳中4種巴比妥類鎮靜藥物的方法，所述的這種檢測生鮮乳中4種巴比妥類鎮靜藥物的方法要解決現有技術在檢測生鮮乳中巴比妥類鎮靜藥物困難的技術問題。

本發明提供了一種檢測生鮮乳中4種巴比妥類鎮靜藥物的方法，包括如下步驟：

1)一個對待測新鮮乳中的巴比妥類鎮靜藥物進行預提取的步驟，將生鮮乳和乙腈溶液混合，震蕩，超聲，加入無機鹽A，離心，所述的生鮮乳、乙腈溶液、無機鹽A的物料比為10～20mL：5～20g：2～10g；上清液采用氮氣吹干，用乙腈水溶液定容，待凈化用；所述無機鹽A為無水硫酸鎂、無水硫酸鈉、無水氯化鈉、無水碳酸鈉中的任意一種或兩種以上的組合；