[發明專利]一種檢測生鮮乳中4種巴比妥類鎮靜藥物的方法

有效

• 申請號: 201710368585.6
• 申請日: 2017-05-23
• 公開（公告）號: CN107202840B
• 公開（公告）日: 2019-06-28
• 發明（設計）人: 田懷香;周興鑫;陳臣;何亞斌;孟瑾
• 申請（專利權）人: 上海應用技術大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 吳寶根

1.一種檢測生鮮乳中4種巴比妥類鎮靜藥物的方法，其特征在于包括如下步驟：

1)一個對待測新鮮乳中的巴比妥類鎮靜藥物進行預提取的步驟，所述的巴比妥類鎮靜藥物為苯巴比妥、戊巴比妥、異戊巴比妥或者司可巴比妥中的任意一種，將生鮮乳和乙腈溶液混合，震蕩，超聲，加入無機鹽A，離心，所述的生鮮乳、乙腈溶液、無機鹽A的物料比為10～20mL：5～20g：2～10g；上清液采用氮氣吹干，用乙腈水溶液定容，待凈化用；所述無機鹽A為無水硫酸鎂、無水硫酸鈉、無水氯化鈉、無水碳酸鈉中的任意一種或兩種以上的組合；

2)一個凈化的步驟，先用甲醇和乙腈水溶液預洗柱，將待凈化定容液過柱后，超純水洗柱，真空抽干；然后采用二氯甲烷洗脫，控制流速，洗脫液于氮氣吹干，乙腈水溶液定容，待上機用；凈化所用柱為SPE柱；所述的SPE柱購買廠家為BESEP；

3)將預處理方法得到的溶液進行高效液相色譜-質譜聯用檢測分析；

所述的高效液相色譜法檢測的色譜柱為HPLC CSH C18柱；

所述的高效液相色譜法檢測的流動相為：

流動相A：水；

流動相B：乙腈；所述的乙腈溶液中還添加酸；所述的酸為甲酸和/或乙酸；所述酸的添加量為所述乙腈添加量的0.1～0.3％，所述百分比為占乙腈的體積百分比；

所述的高效液相色譜法檢測的柱溫為25～35℃；

所述的高效液相色譜法檢測的待測樣品的流速為0.3～0.6mL/min；

所述的高效液相色譜法檢測的進樣體積為5～15μL；

所述的高效液相色譜法檢測的梯度洗脫的條件為：

所述的質譜檢測條件為：

離子源：電噴霧離子源；

掃描模式：負離子模式；

毛細管電壓：3.5kv；

離子源溫度：100℃；

去溶劑溫度：350℃。

2.根據權利要求1所述的一種檢測生鮮乳中4種巴比妥類鎮靜藥物的方法，其特征在于：

1)在一個對待測新鮮乳中的巴比妥類鎮靜藥物進行預提取的步驟中，將生鮮乳樣品、乙腈溶液混合，震蕩混勻，超聲后加入無機鹽A，離心；取上清液10mL于15mL離心管中，50℃氮氣吹干，用2mL含乙腈水溶液定容，待凈化用；

2)在一個凈化的步驟中，將步驟1)中定容待凈化溶液用SPE柱凈化，先用甲醇和乙腈水溶液過柱，控制流速0.5mL/min；將2mL待凈化液過柱后，用超純水洗柱，真空抽干；用二氯甲烷洗脫，控制流速，洗脫液于50℃氮氣吹干，1mL乙腈水溶液定容，過濾，待上機用。

3.根據權利要求2所述的一種檢測生鮮乳中4種巴比妥類鎮靜藥物的方法，其特征在于：

步驟(1)中，所述的乙腈的添加量為每5～20g待測樣品添加10～20mL；

步驟(1)中，所述無機鹽A的添加量為2～10g。

4.根據權利要求2所述的一種檢測生鮮乳中4種巴比妥類鎮靜藥物的方法，其特征在于：步驟(1)中，所述的震蕩的時間為0.5～3min；

步驟(1)中，所述的超聲時間為20～40min；

步驟(1)中，所述的離心的轉速為5000～10000rpm；

步驟(1)中，所述的離心時間為5～15min。

5.根據權利要求2所述的一種檢測生鮮乳中4種巴比妥類鎮靜藥物的方法，其特征在于：步驟(2)中所述的SPE柱規格為6mL或150mg；

步驟(2)中，所述甲醇、乙腈水、超純水為5～10mL；所述二氯甲烷體積為10～30mL；所述乙腈水溶液濃度為30～50％；所述百分比為占水溶液的體積百分比；

步驟(2)中，所述的過濾方法為將溶液經有機微孔濾膜過濾。

6.根據權利要求5所述的一種檢測生鮮乳中4種巴比妥類鎮靜藥物的方法，其特征在于：步驟(2)中，所述的有機微孔濾膜的孔徑為0.22μm。