[發(fā)明專利]LSMEM1基因作為強(qiáng)直性脊柱炎的診斷工具

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710368107.5
• 申請(qǐng)日: 2017-05-23
• 公開（公告）號(hào): CN107058566A
• 公開（公告）日: 2017-08-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖楓;李曙光
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京泱深生物信息技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及強(qiáng)直性脊柱炎診斷領(lǐng)域，更具體地，本發(fā)明涉及LSMEM1基因作為強(qiáng)直性脊柱炎的診斷工具。

背景技術(shù)

強(qiáng)直性脊柱炎又名別赫捷列夫氏(VonBechterev)病或馬-施二氏(Maritstrumpell)病，是一種慢性、進(jìn)行性，中軸關(guān)節(jié)受累的慢性炎癥性疾病。主要影響骨盆的骶髂關(guān)節(jié)、脊柱關(guān)節(jié)和椎旁組織。主要癥狀為下腰痛、脊椎僵硬及運(yùn)動(dòng)范圍受限、X線顯示兩側(cè)骶髂關(guān)節(jié)炎(sacroilitis)為其特征。由于該病一般先侵犯骶髂關(guān)節(jié)，并重點(diǎn)累及脊柱，最終導(dǎo)致脊柱骨性強(qiáng)直，故目前國內(nèi)外多稱之為強(qiáng)直性脊柱炎(AnkglosingSpondytitis，AS)。

強(qiáng)直性脊柱炎(Ankylosing spondylitis，AS)是一種自身免疫性疾病，多發(fā)于16-40歲的青壯年，男女患病比例約為4-10：1。AS在白種人群中的發(fā)病率約為1％-3％，我國AS患病率約為0.2-0.6％，其中60％以上的患者伴有髖關(guān)節(jié)受累，致使20％以上AS患者殘疾。AS屬多基因疾病，具有明顯的遺傳傾向，雖然通常認(rèn)為遺傳與免疫因素在AS發(fā)病中起主導(dǎo)作用，但確切的病因與發(fā)病機(jī)制仍不清楚。

但該病從發(fā)病到明確診斷往往需要5-7年的時(shí)間。雖然近幾年，國內(nèi)外在本病的診斷及治療方法上均有不少進(jìn)展，但由于本病是慢性進(jìn)展性疾病，致殘率較高，目前仍缺乏特異治療，到后期病情不可逆轉(zhuǎn)，嚴(yán)重影響患者生活自理能力和工作能力，給患者及家人帶來沉重的精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此早期診斷和合理治療對(duì)延緩病理進(jìn)展、降低致殘、改善預(yù)后起到至關(guān)重要的作用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種通過檢測(cè)LSMEM1基因或蛋白表達(dá)差異來診斷強(qiáng)直性脊柱炎的方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了檢測(cè)LSMEM1基因或LSMEM1蛋白的產(chǎn)品在制備強(qiáng)直性脊柱炎診斷工具中的用途。

進(jìn)一步，所述檢測(cè)LSMEM1基因或LSMEM1蛋白的產(chǎn)品包括檢測(cè)LSMEM1基因或LSMEM1蛋白的表達(dá)水平的產(chǎn)品。所述產(chǎn)品包括能夠結(jié)合LSMEM1基因的核酸或者能夠結(jié)合LSMEM1蛋白的物質(zhì)(例如抗體)。所述核酸能夠檢測(cè)LSMEM1基因的表達(dá)水平；所述物質(zhì)能夠檢測(cè)LSMEM1蛋白的表達(dá)水平。

本發(fā)明的檢測(cè)LSMEM1基因的產(chǎn)品可基于使用核酸分子的已知方法來發(fā)揮其功能：如PCR、如Southern雜交、Northern雜交、點(diǎn)雜交、熒光原位雜交(FISH)、DNA微陣列、ASO法、高通量測(cè)序平臺(tái)等。使用該產(chǎn)品可以定性地、定量地、或半定量地實(shí)施分析。

包含在上述產(chǎn)品中的核酸可以通過化學(xué)合成來獲得，或通過從生物材料制備含有期望核酸的基因，然后使用設(shè)計(jì)用于擴(kuò)增期望核酸的引物擴(kuò)增它來獲得。

進(jìn)一步，所述PCR方法為已知方法，例如，ARMS(Amplification Refractory Mutation System，擴(kuò)增不應(yīng)突變系統(tǒng))法、RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄酶-PCR)法、嵌套PCR法等等。擴(kuò)增的核酸可以通過使用點(diǎn)印跡雜交法、表面等離子共振法(SPR法)、PCR-RFLP法、原位RT-PCR法、PCR-SSO(序列特異性寡核苷酸)法、PCR-SSP法、AMPFLP(可擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性)法、MVR-PCR法、和PCR-SSCP(單鏈構(gòu)象多態(tài)性)法來檢測(cè)。

上面所述的核酸包括擴(kuò)增LSMEM1基因的引物，產(chǎn)品中包括的引物可以通過通過化學(xué)合成來制備，通過使用本領(lǐng)域技術(shù)人員知道的方法參考已知信息來適當(dāng)?shù)卦O(shè)計(jì)，并通過化學(xué)合成來制備。

在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，所述核酸為QPCR實(shí)驗(yàn)中使用的擴(kuò)增引物，所述引物的序列如SEQ ID NO.1(正向序列)和SEQ ID NO.2(反向序列)所示。

上面所述的核酸還可包括探針，所述探針可以通過化學(xué)合成來制備，通過使用本領(lǐng)域技術(shù)人員知道的方法參考已知信息來恰當(dāng)設(shè)計(jì)，并通過化學(xué)合成來制備，或者可以通過從生物材料制備含有期望核酸序列的基因，并使用設(shè)計(jì)用于擴(kuò)增期望核酸序列的引物擴(kuò)增它來制備。

本發(fā)明的檢測(cè)LSMEM1蛋白的產(chǎn)品可基于使用抗體的已知方法來發(fā)揮其功能：例如，可以包括ELISA、放射免疫測(cè)定法、免疫組織化學(xué)法、Western印跡等。