[發(fā)明專利]滇橄欖多酚的高濃縮發(fā)酵方法及其活性制品

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710355635.7
• 申請日: 2017-05-19
• 公開（公告）號: CN107177638A
• 公開（公告）日: 2017-09-19
• 發(fā)明（設計）人: 郭佳琛;陳韋廷
• 申請（專利權(quán)）人: 惠州嘉聯(lián)生物科技開發(fā)有限公司
• 主分類號: C12P7/22
• 分類號: C12P7/22;C12N1/14;C12N1/20;A61K36/47;A61P37/04;A23L33/105;C12R1/89;C12R1/645;C12R1/01
• 代理公司: 惠州市超越知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙)44349
• 代理人: 魯慧波

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于食品加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種滇橄欖多酚的高濃縮發(fā)酵方法及其活性制品。

背景技術(shù)

滇橄欖又名余甘子，余甘子為大戟科葉下珠屬植物余甘子（PhyllanthusemblicaL）的果實，別名油柑子，橄欖子（四川），滇橄欖（云南），青果等。《唐本草》稱之為庵摩勒，余甘，《南方草木狀》謂“樹葉細，似合昏，花黃，食似李，青黃色，核圓作六七棱，食之先苦后甜”，《本草綱目》稱之為庵摩落迦果，載有“其味初食苦澀，良久更甘，故曰余甘”。

余甘子為一種常用藏藥，與訶子，毛訶子三者在藏藥中常被稱為“三大果”使用頻率很高，在《藏藥標準》所載的290種藏藥成藥中，含余甘子的有72種，占總數(shù)的25%，衛(wèi)生部藥品標準1995年版藏藥標準所載200種成藥中，有59種含余甘子，占29%，余甘子被載入《中國藥典》1977年版一部。

余甘子果實味酸微澀，清熱涼血，消食健脾，生津止渴。主治血熱血瘀，消化不良，腹脹，咳嗽，喉痛，口干及維生素C缺乏癥。在藏藥中，余甘子主治培根病、赤巴病、血病、高血壓病等。近年研究結(jié)果表明，余甘子具有抗炎，抗氧化，抗衰老，保肝等作用。

果實(余甘子)：甘、微澀，涼。清熱利咽，潤肺止咳。用于感冒發(fā)熱，咽喉痛，咳嗽，口千煩渴，耳痛，維生素丙缺乏癥。根(油柑根)：辛，寒。有毒。消食，利水，化痰，殺蟲。用于高血壓癥，胃痛，泄瀉，瘰疬。葉(油柑葉)：辛、平。祛濕利尿。用于水腫，皮膚濕疹。樹皮(油柑木皮)：甘、酸，寒。殺菌祛腐，止血。用于口瘡，療瘡，痔瘡，陰囊濕疹，外傷出血。樹枝的蟲癭(油柑蟲節(jié))：用于胃痛，疝氣，遺精，小兒疳積，牙痛。

但是目前對滇橄欖的食用方式還只停留于直接食用或榨汁以果汁的方式飲用，食用方式比較單調(diào)，滇橄欖中多酚類物質(zhì)含量高，在滇橄欖加工領(lǐng)域內(nèi)，大多都是滇橄欖果汁和飲料，基本上都是利用新鮮滇橄欖榨汁后調(diào)制而成，從而導致滇橄欖渣大量浪費，利用效率不高。因此，亟待開發(fā)一種滇橄欖的高濃縮發(fā)酵方法。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明提供一種滇橄欖多酚的高濃縮發(fā)酵方法，能夠充分利用滇橄欖資源，提供一種高效率、低成本、純度高且易于推廣的滇橄欖多酚活性物質(zhì)制備方法，并提供一種能夠改善人體免疫功能，提高免疫力的滇橄欖多酚制品。

本發(fā)明的技術(shù)方案為：一種滇橄欖多酚的高濃縮發(fā)酵方法，包括如下步驟：

（1）原料預處理：滇橄欖的新鮮果實為原料，用水清洗干凈，放入含0.1％檸檬酸的沸水中熱燙4min，冷卻，破碎去核，加1∶1的水打漿，果漿經(jīng)真空干燥，粉碎過40目篩得滇橄欖果肉粉；

（2）將步驟（1）制得滇橄欖果肉粉按料液比1:4接種于液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在溫度22℃的條件下，液體發(fā)酵培養(yǎng)3-6天，然后加入裂壺藻發(fā)酵蛋白產(chǎn)物以及植物內(nèi)生菌，使裂壺藻發(fā)酵蛋白產(chǎn)物的濃度為0.15-0.85mg/mL，植物內(nèi)生菌的濃度為1.9×10⁶CFU/ml-4.6×10⁷CFU/ml然后繼續(xù)培養(yǎng)1-4天，分離，得到滇橄欖果肉粉發(fā)酵液；

（3）從步驟（2）制得的發(fā)酵液中提取滇橄欖多酚；

所述步驟（2）中的液體發(fā)酵培養(yǎng)基，每升組分如下：

3g乳糖、2g糖蜜、2g豆粕粉、1.5g蛋白胨，0.1gMgSO4、0.03gCaCl2、0.1gKH2PO4、0.1gK2HPO4；

所述裂壺藻發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法為：

取經(jīng)過清洗的裂壺藻原料，設定酶解條件為料液比1∶10（m/V）、纖維素酶CellulaseACCF-4740添加量2%、溫度55℃、pH4.5、反應時間1.3h，進行酶解，纖維素酶水解結(jié)束后，沸水浴滅酶15min，9000r/min離心，收集上清液得到裂壺藻纖維素酶水解液；裂壺藻酶解液滅酶活后，調(diào)節(jié)pH值至6.2-6.6，高壓蒸汽滅菌（121℃，20min），然后接種體積分數(shù)1%的MRS培養(yǎng)基活化的戊糖片球菌液到裂壺藻酶解液，37℃恒溫培養(yǎng)箱靜置，進行發(fā)酵；發(fā)酵結(jié)束后，9000r/min離心，收集上清液得到裂壺藻發(fā)酵產(chǎn)物；