[發明專利]一種沼澤小葉樺離體芽快繁方法

在審

• 申請號: 201710344595.6
• 申請日: 2017-05-16
• 公開（公告）號: CN107155884A
• 公開（公告）日: 2017-09-15
• 發明（設計）人: 汪貴斌;王新;吳雅瓊;陸越
• 申請（專利權）人: 南京林業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙)32274
• 代理人: 邱興天

1.一種沼澤小葉樺的離體芽快繁方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）挑選株高1~1.5 m的未萌動的健壯植株，4~5月份采主枝頂芽、主枝側芽、側枝頂芽的新生芽作為外植體；

2）在超凈工作臺上，先用70%的酒精處理外植體20 s，再用0.1%升汞消毒5~20 min，10% NaClO消毒0~20 min，用無菌水沖洗數次；

3）將處理好的外植體在無菌的條件下接種到初代培養基上，初代培養基成分為：MS +0.6~1.5mg/L 6-BA +0.5~1.0 g/L PVP，培養20d以上；

4）將外植體轉入增殖培養基，增殖培養基成分為：MS +0.4~0.6 mg/L 6-BA + 0.02 mg/L NAA，培養時間20d以上獲得小苗；

5）將小苗進行生根培養，生根培養基成分：MS + 0.1~0.5 mg/L NAA，或1/2MS + 0~0.5 mg/L NAA，培養20d以上；

7）煉苗移栽：選擇健壯的無菌苗，用多菌靈溶液浸泡清洗后，移栽到已消毒的蛭石+珍珠巖的基質中，先保濕培養一周，逐漸去掉蓋子，繼續生長即可。

2.根據權利要求1所述的沼澤小葉樺的離體芽快繁方法，其特征在于：步驟1）中，在新生芽萌動前，用50%的多菌靈可濕性粉劑噴灑植株，一周兩次，直到植株吐芽、取材為止。

3.根據權利要求1所述的沼澤小葉樺的離體芽快繁方法，其特征在于：步驟2）中，先用70%酒精處理20s，再配合0.1%升汞處理10 min，后用無菌水沖洗4-5次。

4.根據權利要求1所述的沼澤小葉樺的離體芽快繁方法，其特征在于：步驟3）中，初代培養基成分為：MS +0.8~1.0 mg/L 6-BA +1.0 g/L PVP。

5.根據權利要求1所述的沼澤小葉樺的離體芽快繁方法，其特征在于：步驟4）中，增殖培養基成分為：MS + 0.6 mg/L 6-BA + 0.02 mg/L NAA，或MS + 0.4 mg/L 6-BA + 0.02 mg/L NAA。

6.根據權利要求1所述的沼澤小葉樺的離體芽快繁方法，其特征在于：步驟5）中，生根培養基成分：MS或1/2MS + 0.1或0.5 mg/L NAA。