[發(fā)明專利]一種酶法處理麥芽糊精制備分支環(huán)糊精的方法及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710343350.1
• 申請日: 2017-05-16
• 公開（公告）號: CN107177647B
• 公開（公告）日: 2019-11-26
• 發(fā)明（設計）人: 柏玉香;金征宇;夏柳溪;吳云;徐學明;謝正軍;王金鵬;周星
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12P19/20
• 分類號: C12P19/20;C12P19/18;C12P19/04
• 代理公司: 32228 無錫華源專利商標事務所(普通合伙)
• 代理人: 聶啟新<國際申請>=<國際公布>=<進入

1.一種酶法處理麥芽糊精制備分支環(huán)糊精的方法，其特征在于所述方法包括如下具體步驟：

(1)將麥芽糊精溶于磷酸鹽緩沖液中，加入0.36U的CGTase酶反應12-24h；

(2)采用物理的方法降低酶活至0.003U或0.011U；

(3)向步驟(2)的反應體系中加入0.72U糖化酶反應12-24h，高溫滅酶，可制得分支環(huán)糊精。

2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于步驟(1)中所述磷酸鹽緩沖液的pH在3.5-8.0。

3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于步驟(1)中所述麥芽糊精的質(zhì)量濃度為1％-5％。

4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于步驟(2)中所述物理方法為70-100℃水浴加熱。

5.一種權利要求1所述酶法處理麥芽糊精制備分支環(huán)糊精的方法的應用，其特征在于所述方法可用于制備葡萄糖基-α-環(huán)糊精、葡萄糖基-β-環(huán)糊精、葡萄糖基-γ-環(huán)糊精。

6.根據(jù)權利要求5所述的應用，其特征在于用于制備葡萄糖基-α-環(huán)糊精時，具體步驟為：

(1)將麥芽糊精溶于磷酸鹽緩沖液中，加入0.36U的α-CGTase酶反應12-24h；

(2)采用物理的方法降低酶活至0.003U或0.011U；

(3)向步驟(2)的反應體系中加入0.72U糖化酶反應12-24h，高溫滅酶，可制得含有葡萄糖基-α-環(huán)糊精的混合物；

(4)利用高效液相的方法對步驟(3)所得到的混合物進行分離純化，最終制得所述葡萄糖基-α-環(huán)糊精；

所述磷酸鹽緩沖液的pH在3.5-8.0；所述麥芽糊精的質(zhì)量濃度為1％-5％；所述物理方法為70-100℃水浴加熱。

7.根據(jù)權利要求5所述的應用，其特征在于用于制備葡萄糖基-β-環(huán)糊精時，具體步驟為：

(1)將麥芽糊精溶于磷酸鹽緩沖液中，加入β-CGTase酶反應12-24h；

(2)采用物理的方法降低酶活至0.003U或0.011U；

(3)向步驟(2)的反應體系中加入糖化酶反應12-24h，高溫滅酶，可制得含有葡萄糖基-β-環(huán)糊精的混合物；

(4)利用高效液相的方法對步驟(3)所得到的混合物進行分離純化，最終制得所述葡萄糖基-β-環(huán)糊精；

所述磷酸鹽緩沖液的pH在3.5-8.0；所述麥芽糊精的質(zhì)量濃度為1％-5％；所述物理方法為70-100℃水浴加熱。

8.根據(jù)權利要求5所述的應用，其特征在于用于制備葡萄糖基-γ-環(huán)糊精時，具體步驟為：

(1)將麥芽糊精溶于磷酸鹽緩沖液中，加入0.36U的γ-CGTase酶反應12-24h；

(2)采用物理的方法降低酶活至0.003U或0.011U；

(3)向步驟(2)的反應體系中加入0.72U糖化酶反應12-24h，高溫滅酶，可制得含有葡萄糖基-γ-環(huán)糊精的混合物；

(4)利用高效液相的方法對步驟(3)所得到的混合物進行分離純化，最終制得所述葡萄糖基-γ-環(huán)糊精；

所述磷酸鹽緩沖液的pH在3.5-8.0；所述麥芽糊精的質(zhì)量濃度為1％-5％；所述物理方法為70-100℃水浴加熱。

9.一種權利要求1所述酶法處理麥芽糊精制備分支環(huán)糊精的方法的應用，其特征在于所述方法可用于普 魯蘭酶逆向合成法制備單一分支環(huán)糊精；具體步驟為：

(1)取通過普魯蘭酶逆向合成方法制備得到的含分支環(huán)糊精的混合物粉末，溶于pH4.5磷酸鹽緩沖液中；

(2)將步驟(1)所得溶液置于0℃-20℃條件下，結晶12-24h；

(3)將步驟(2)所得溶液離心，取上清液加入pH4.5緩沖溶液中，充分溶解；

(4)向反應體系中同時加入CGTase和糖化酶，45℃的條件下反應1-10h；

(5)通過膜分離的方法對步驟(4)的反應產(chǎn)物進行分離純化，即得所述單一分支環(huán)糊精；

所述單一分支環(huán)糊精為葡萄糖基-α-環(huán)糊精、葡萄糖基-β-環(huán)糊精、葡萄糖基-γ-環(huán)糊精、麥芽糖基-α-環(huán)糊精、麥芽糖基-β-環(huán)糊精、麥芽糖基-γ-環(huán)糊精、半乳糖基-α-環(huán)糊精、半乳糖基-β-環(huán)糊精、半乳糖基-γ-環(huán)糊精中的一種。