[發明專利]一種櫻桃酵素脂質體的制備方法

有效

• 申請號: 201710334869.3
• 申請日: 2017-05-12
• 公開（公告）號: CN107183685B
• 公開（公告）日: 2020-07-28
• 發明（設計）人: 高大威;李磊;朱瑞艷
• 申請（專利權）人: 燕山大學
• 主分類號: A23L33/00
• 分類號: A23L33/00;A23L33/10;A23L33/11;A23L5/30;A23L2/38
• 代理公司: 秦皇島一誠知識產權事務所(普通合伙) 13116
• 代理人: 續京沙

1.一種櫻桃酵素脂質體的制備方法，其特征在于：它包括以下步驟：

一、混合菌發酵制備櫻桃酵素

原料按質量計量，包括以下組分：安琪酵母菌1-5份，植物乳桿菌2-8份，奧爾蘭醋桿菌1-3份，櫻桃5000-7000份，白砂糖1000-6000份；

(1)將櫻桃洗凈晾干去核去蒂，將發酵容器洗凈滅菌烘干；

(2)按照比例，將三株菌種按質量濃度0.05-0.2g/mL分別溶于櫻桃汁，25-35℃恒溫水浴中均速攪拌10-40min以活化菌株；

(3)將櫻桃和白砂糖裝入發酵容器中反復堆疊至容器體積的70-75％，加入容器體積15-20％的無菌水，將步驟(2)中活化后的三種菌液加入到瓶中，于28-35℃環境中密封保存；

(4)15-20天后將瓶中發酵液取出過濾除去濾渣；

(5)將發酵液在干冰-水體系和35℃溫水中循環浸泡2-5次，使發酵液經歷迅速凍結和融解的循環，以破壞發酵菌和櫻桃的細胞壁結構，獲取其內酶類；

(6)對步驟(5)制得的酵素采用0.45μm無菌微孔濾膜過濾除菌，于4℃保存；

二、櫻桃酵素脂質體的制備

原料按質量計量，包括以下組分：磷脂40-60份，豆甾醇4-7份，聚乙二醇3-8份，櫻桃酵素6000-15000份；

(1)將磷脂、豆甾醇、聚乙二醇溶于無水乙醇中，在溫度30-60℃，轉速30-80rpm條件下，真空旋蒸1.5-6h除去無水乙醇，在瓶壁形成透明脂質薄膜；

(2)將步驟一制得的櫻桃酵素倒入到步驟(1)的脂質薄膜中，在溫度40-50℃，轉速50-120rpm條件下，常壓旋轉水化0.5-2h，形成脂質體乳濁液；

(3)對步驟(2)得到的乳濁液進行超聲處理，使用水浴超聲或者冰浴探頭超聲，水浴超聲100％功率，時間為15-30min；冰浴探頭超聲功率為300-600w，超聲模式為工作2-5秒/間歇2-5秒，時間為5-15min，得到脂質體溶液；

(4)將步驟(3)得到的脂質體溶液經過無菌微孔濾膜除菌后，在-20℃冷凍長期保存，或者放置4℃冰箱隨時飲用。

2.根據權利要求1所述的櫻桃酵素脂質體的制備方法，其特征在于：所述安琪酵母菌數大于1-2×10⁹個/g、植物乳桿菌菌數大于2×10⁸個/g、奧爾蘭醋桿菌菌數大于2×10⁸個/g。