[發明專利]一種核酸適配體修飾的磁性納米顆粒及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710333803.2
• 申請日: 2017-05-12
• 公開（公告）號: CN107050452B
• 公開（公告）日: 2019-12-10
• 發明（設計）人: 李艷;張文懿;武昊安;張宇;張天柱;顧寧
• 申請（專利權）人: 東南大學
• 主分類號: A61K49/12
• 分類號: A61K49/12;A61K49/18;A61K41/00
• 代理公司: 32200 南京經緯專利商標代理有限公司
• 代理人: 唐循文

1.核酸適配體修飾的磁性納米顆粒的制備方法，其特征在于制備步驟為：

將0.7g的乙酰丙酮鐵溶解于20mL的二芐醚；先后加入12mmol油酸和6 mmol油胺；在氮氣氛圍下，設定溫控儀程序，體系以3.3℃/min的速率升溫至220℃，在220℃停留60min，后繼續以3.3℃/min的速率升溫至290℃，在290℃下停留30min，結束反應；冷卻至室溫后，加入乙醇磁分離洗滌，重復多次以去除體系中殘留的二芐醚、油酸和油胺，最后將制備出的油酸修飾的磁性Fe₃O₄納米顆粒，記為Fe₃O₄@OA，保存于氯仿中；

取60mg DSPE-PEG2000-COOH溶于5mL氯仿中；加入3mL的Fe₃O₄@OA，濃度為5mg Fe/mL，70℃下超聲10min；加入5mL去離子水，水浴70℃，抽至真空后旋轉蒸發至有機溶劑蒸發殆盡；待其冷卻至室溫后，超聲分散15min；樣品經220nm濾膜過濾后再超濾離心，去除底部沉淀物，取上層黑色透明的水相納米結構Fe₃O₄@PEG；

移取1mL 5mg/mL Fe₃O₄@PEG，加入500μL 500mM EDC·HCl 和500μL 100mM NHS，室溫下反應半小時，10KDa超濾離心，去離子水4mL×4次洗滌；加入經85℃變性10min ，冰浴10min復性的5’-NH₂ AS1411的10 OD適配體，震蕩反應5h，超濾離心，30KDa,4mL×4次，直至超濾液中檢測不到適配體，最終得到適配體修飾的Fe₃O₄納米顆粒Fe₃O₄@Apt。

2.權利要求1所制得的磁性納米顆粒在制備乳腺癌核磁共振成像造影劑和同時作為乳腺癌熱療用磁性介質中的應用。