[發(fā)明專利]一種橡膠樹開花調(diào)控基因HbFT2及其克隆與應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710324233.0 | 申請日: | 2017-05-10 |
| 公開(公告)號: | CN107119057B | 公開(公告)日: | 2019-08-23 |
| 發(fā)明(設計)人: | 李季;畢政鴻;黃天帶;華玉偉;黃華孫 | 申請(專利權)人: | 中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院橡膠研究所 |
| 主分類號: | C12N15/29 | 分類號: | C12N15/29;C07K14/415;C12N15/82;C12N15/10;A01H6/38 |
| 代理公司: | 北京中譽威圣知識產(chǎn)權代理有限公司 11279 | 代理人: | 蔣常雪 |
| 地址: | 57173*** | 國省代碼: | 海南;46 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 橡膠樹 開花調(diào)控 基因 克隆 基因工程技術 巴西橡膠樹 核苷酸序列 特異性表達 基因組織 全長cDNA 應用 分析 | ||
1.一種橡膠樹開花調(diào)控基因HbFT2,其特征在于,所述基因HbFT2的cDNA核苷酸序列如SEQ ID No:1所示。
2.一種權利要求1所述的橡膠樹開花調(diào)控基因HbFT2編碼的蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID No:2所示。
3.一種橡膠樹開花調(diào)控基因HbFT2,其特征在于,所述基因HbFT2的基因組DNA核苷酸序列如SEQ ID No:3所示。
4.一種含有權利要求1或3所述的橡膠樹開花調(diào)控基因HbFT2的重組植物表達載體,其特征在于,所述表達載體為重組質(zhì)粒pXCS-HbFT2。
5.根據(jù)權利要求4所述的重組植物表達載體,其特征在于,所述重組植物表達載體中的載體為pMD19-T載體。
6.一種克隆權利要求1或3所述的橡膠樹開花調(diào)控基因HbFT2的方法,其特征在于,包括如下步驟:
(1)分別以巴西橡膠樹的葉片基因組DNA,或者葉片和花序的cDNA混合為模板,設計如下引物進行PCR擴增,獲得HbTF1基因開放閱讀框;HbFT2OF:
GGAATTCATGCCTAGAGATCCTCTGGTT;HbFT2OR:
CCCCCCGGGTTGTCCTCGCCTTCTT;
(2)以HbTF1基因開放閱讀框為基礎,設計如下引物合成5’UTR及3’UTR;HbFT2-5UF:
TGGAAAGCATATTGGCATAGAAAGT;HbFT2-5UR:
CCTTAAATCATCTCCACCTACATCA;HbFT2-GSP31st:
CGAAGACAGACAATCAACCCACC;HbFT2-GSP32nd:
GAAACTGCTGCAAGAAGACGCTAAC;
(3)根據(jù)5’UTR和3’UTR的獲得,設計如下特異引物,進行目標基因HbFT2全長的擴增;HbFT2-F:TGGAAAGCATATTGGCATAGAAAGT;HbFT2-R:
GCATAATTATACTTGTATATCTTTTAAATTTATTTGTATAT。
7.權利要求1或3所述的橡膠樹開花調(diào)控基因HbFT2用于制備促進橡膠樹提前開花的促進劑的應用。
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