[發明專利]一種發酵法生產赤霉素A7

有效

• 申請號: 201710316511.8
• 申請日: 2017-05-08
• 公開（公告）號: CN107177659B
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發明（設計）人: 吳燁飛;陸建衛;沈波
• 申請（專利權）人: 浙江錢江生物化學股份有限公司
• 主分類號: C12P27/00
• 分類號: C12P27/00;C12N1/14;C12R1/77
• 代理公司: 嘉興海創專利代理事務所(普通合伙) 33251
• 代理人: 鄭文濤

本發明公開了一種發酵法生產赤霉素A₇的方法，利用赤霉素A₄發酵生產用菌種通過改變培養基組成、發酵工藝控制，代謝途徑向積累赤霉素A₇轉變，赤霉素A₇發酵水平達到1039mg/L，特別的，赤霉素A₇占赤霉素A₄₊₇混合物的90％以上，所述菌種于2015年7月15日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號：CGMCC NO.11101，分類命名為：藤倉鐮刀菌，菌種拉丁學名為：Fusarium fujikuroi。本發明中根據赤霉素A₄與赤霉素A₇轉化機制，通過改變培養基組成及工藝條件，使其代謝途徑由累積赤霉素A₄向累積赤霉素A₇轉變，使得發酵終產物中赤霉素A₇含量占赤霉素A₄₊₇混合物的90％以上。

技術領域

本發明屬于微生物發酵技術領域，涉及到利用一種原赤霉素A₄生產用菌，通過改變培養基組成及工藝條件，發酵生產赤霉素A₇的方法。特別的，發酵液中赤霉素A₇含量占赤霉素A₄₊₇混合物的比例由10％提升至90％以上。

背景技術

赤霉素(Gibberellins,GA)屬四環二萜類化合物，是一類內源性植物調節物質，廣泛存在于植物中，至今已分離鑒定129種該類物質。該類物質對種子萌發、莖葉生長、抽苔座果和塊莖形成等有顯著調節作用，于糧食、蔬菜水果的種植生產上應用廣泛。

目前，赤霉素A₃及赤霉素A₄₊₇是市面上主要的赤霉素類產品，工業上常用微生物發酵生產。近年來，赤霉素A₄₊₇在經濟作物方面的應用得到關注，如用于保花保果、打破休眠等。但是，在應用過程中赤霉素A₄和赤霉素A₇發揮的作用存在明顯差異，甚至起到反作用。鑒于赤霉素A₄與赤霉素 A₇對作物的不同作用，在實際應用過程中對赤霉素A₄₊₇混合物中兩者的比例有不同要求。目前市場上常見的GA₄₊₇混合物劑型有GA4-rich(80％) mixture ofGA4and GA7，GA4-rich(65％)mixture of GA4and GA7，GA4-rich (60％)mixture ofGA4and GA7，GA7-rich(85％)mixture of GA4and GA7等，其中富含GA₇80％以上的GA₄₊₇劑型市場銷售價格比同含量GA₄劑型高20％以上，經濟價值顯著。

由于發酵工藝所限，目前工業上發酵法直接生產得到的都是赤霉素A₄₊₇的混合物，且赤霉素A₇所占比例普遍在50％左右。為得到高含量赤霉素A₇產品，企業一般采用在提取分離步驟破壞發酵液中赤霉素A₄組份的方法來提高赤霉素A₇含量。由于赤霉素A₇的不穩定性，該方法使下游分離工藝變得復雜，產品總收率低，經濟效益不明顯。而其他如高效液相色譜、薄層層析等分離方法則存在分離速度不好控制、設備昂貴、生產規模不易放大等缺點。高水平的適合于工業生產的發酵法直接生產得到高含量赤霉素A₇產品的菌種及技術方法未見報道。