[發(fā)明專利]一種淀粉樣多肽的純化方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710309635.3
• 申請日: 2017-05-04
• 公開（公告）號: CN107698674A
• 公開（公告）日: 2018-02-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王錫平;張中玉
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州強耀生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K1/20
• 代理公司: 北京科億知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種淀粉樣多肽的純化方法，其特征在于：包括淀粉樣多肽的溶解、反相色譜柱分析和反相制備色譜柱吸附及洗脫收集的步驟。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征在于：所述溶解的步驟包括將淀粉樣多肽溶于溶劑中得到淀粉樣多肽溶液。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的純化方法，其特征在于：所述反相色譜柱分析的步驟包括將所述淀粉樣多肽溶液接反相色譜分析柱進(jìn)行梯度檢測，得到分析圖譜。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的純化方法，其特征在于：所述反相制備色譜柱吸附及洗脫收集包括以下步驟：

(1)根據(jù)所述分析圖譜設(shè)置制備色譜柱的制備梯度；

(2)將淀粉樣多肽溶液接制備色譜柱進(jìn)行進(jìn)樣吸附并洗脫收集。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征在于：所述淀粉樣多肽為Aβ1-42、Aβ1-40、Aβ42-1以及淀粉樣多肽Aβ1-42的衍生物，并分別具有如下的氨基酸序列：

Aβ1-42的氨基酸序列為：

DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA；

Aβ1-42的氨基酸序列為：

DAEFGHDSGFEVRHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA；

Aβ1-40的氨基酸序列為：

DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVV；

Aβ42-1的氨基酸序列為：

AIVVGGVMLGIIAGKNSGVDEAFFVLKQHHVEYGSDHRFEAD；

淀粉樣多肽Aβ1-42的衍生物：

FITC-Aβ1-42：

FITC-DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA。

生物素標(biāo)記的Aβ1-42：

Biotin-DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的純化方法，其特征在于：所述溶劑為水、乙腈、六氟異丙醇、異丙醇、DMSO和甲酸中的一種或幾種。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的純化方法，其特征在于：所述梯度檢測的檢測器為紫外檢測器，且檢測波長200-240nm。

8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的純化方法，其特征在于：所述反相制備色譜柱為C4柱、C8柱和C18柱中的一種或幾種。

9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的純化方法，其特征在于：所述反相制備色譜柱的流速為5-100ml/min。

10.根據(jù)權(quán)利要求4所述的純化方法，其特征在于：所述淀粉樣多肽溶液接制備色譜柱進(jìn)行進(jìn)樣吸附并洗脫收集前在20-35℃下放置8-24h。