[發明專利]一種子宮內膜干細胞制劑及其應用

在審

• 申請號: 201710306817.5
• 申請日: 2017-04-27
• 公開（公告）號: CN107126553A
• 公開（公告）日: 2017-09-05
• 發明（設計）人: 馬穎;馬鐸;陳祥
• 申請（專利權）人: 廣州資生生物科技有限公司
• 主分類號: A61K38/38
• 分類號: A61K38/38;A61P15/00;A61K35/48;A61K38/20;A61K38/18
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司11227
• 代理人: 張春水,唐京橋

技術領域

本發明屬于再生醫學和生物學技術領域，具體涉及一種子宮內膜干細胞制劑及其應用。

背景技術

近年來，臨床中人工流產、藥物流產患者人數逐年增加，短期內多次人工流產容易造成子宮內膜的損傷，使得子宮內膜生長異樣和宮腔粘連，增加了子宮內膜繼發性炎癥的風險，使得繼發性不孕癥的風險顯著增高。目前，應用于瘢痕子宮修復的干細胞制劑主要有自體骨髓干細胞制劑和自體脂肪干細胞制劑，其干細胞來源均需要通過創口進行樣品采集，不僅取樣困難，而且容易給患者造成一定的身體損傷。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種子宮內膜干細胞制劑，應用于制備瘢痕子宮藥物，干細胞來源方便、無創傷性。

本發明的具體技術方案如下：

本發明提供了一種子宮內膜干細胞制劑，包含：子宮內膜干細胞、人血清白蛋白、白介素10和血管內皮細胞生長因子。

子宮內膜干細胞是一種成體干細胞，具有自我更新、多向分化和高度增殖的潛能，致癌風險低，受倫理學爭議少。因此，本領域的相關研究人員認為子宮內膜干細胞可能成為子宮內膜過薄和內膜病變患者進行內膜修復替代治療手段。鑒于子宮內膜干細胞與子宮內膜生長的密切關系，從體外分離培養子宮內膜干細胞，然后移植到子宮內膜內促進子宮瘢痕修復。

優選的，所述子宮內膜干細胞的細胞濃度為5.0×10⁶～2.0×10⁷個/mL。

優選的，所述人血清白蛋白的體積百分比濃度為1％～10％，優選為5％。

在瘢痕子宮修復過程中需要多種生長因子的參與，然而內源性生長因子往往難以滿足需要，因此，適時適量地引入特定的外源性生長因子有助于子宮瘢痕的修復，經過篩選優化，所述外源性生長因子為干細胞生長因子和基質細胞衍生因子。其中，白介素10(IL-10)是一種多細胞源、多功能的細胞因子，調節細胞的生長與分化，參與炎性反應和免疫反應，是目前公認的炎癥與免疫抑制因子；血管內皮細胞生長因子(VEGF)是特異性作用于內皮細胞的糖基化細胞有絲分裂素，在增強血管的滲透性、誘導血管發生和血管生成及內皮細胞生長、促進細胞遷移、抑制細胞凋亡等方面發揮作用。

優選的，所述白介素10的濃度為5～30ng/mL。

優選的，所述血管內皮細胞生長因子的濃度為5～30ng/mL。

優選的，所述子宮內膜干細胞制劑還包括：溶媒，所述溶媒為生理鹽水。

本發明還提供了一種上述子宮內膜干細胞制劑的制備方法，將子宮內膜干細胞、人血清白蛋白、白介素10、血管內皮細胞生長因子和生理鹽水混合，得到所述子宮內膜干細胞制劑。

本發明還提供了上述子宮內膜干細胞制劑或上述制備方法得到的子宮內膜干細胞制劑在制備瘢痕子宮藥物中的應用。

與現有技術相比，本發明的子宮內膜干細胞制劑具有以下優點：

1)本發明選用子宮內膜干細胞作為干細胞來源，取材方便，無創傷性，無倫理限制；而且所述子宮內膜干細胞為自體子宮內膜干細胞，可避免免疫排斥，安全可靠；

2)本發明子宮內膜干細胞制劑還包含白介素10和血管內皮細胞生長因子，兩者協同作用，提高干細胞轉化率，促進瘢痕子宮的修復；

3)本發明制劑選用生理鹽水作為溶劑，其滲透壓與人體的滲透壓一致，可避免損傷子宮組織，低溫保存下其生物活性穩定；

4)本發明制劑的制備步驟簡單，耗時短，可實現規模化生產。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明實施例或現有技術中的技術方案，下面將對實施例或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發明的實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據提供的附圖獲得其他的附圖。

圖1為第二代子宮內膜干細胞的顯微照片；其中，圖1a為第二代子宮內膜干細胞放大40倍的顯微照片，圖1b為第二代子宮內膜干細胞放大100倍的顯微照片；

圖2為子宮內膜干細胞的表面抗原特征的鑒定結果；

圖3為實施例2得到的干細胞制劑中子宮內膜干細胞活力測定的結果。

具體實施方式

通過選用子宮內膜干細胞替代骨髓干細胞和脂肪細胞作為核心細胞，同時優化制劑中的組成成分，本發明提供了一種子宮內膜干細胞制劑，應用于制備瘢痕子宮藥物，干細胞存活率穩定、來源方便、無創傷性，而且制劑的制備時間短、效率高。