[發(fā)明專利]一種通過羧甲基化得到的新型抗腫瘤化合物

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710306160.2
• 申請(qǐng)日: 2017-05-03
• 公開（公告）號(hào): CN108117608A
• 公開（公告）日: 2018-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳奕;聶少平;謝明勇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南昌大學(xué)
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00;A61P37/04;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種通過羧甲基化得到的新型抗腫瘤化合物，其特征在于：制備方法為:

(1)取干燥黑靈芝藥材100g，加95％乙醇室溫浸泡提取48h，過濾，重復(fù)一次，藥渣于室溫下置通風(fēng)處晾干，然后將藥渣與蒸餾水按質(zhì)量體積(kg/L)比為1：20的比例混合，回流提取兩次，每次提取時(shí)間依次為2h，1h，合并提取液，離心分離，減壓濃縮；所得樣品加入適量的95％乙醇使溶液中使得乙醇的體積分?jǐn)?shù)為80％，然后進(jìn)行沉淀，4℃下靜置24h，離心過濾；沉淀物合并，依次以無水乙醇、無水乙醚、丙酮洗滌沉淀物，冷凍干燥得樣品；取得到的干燥樣品，以Sevag法除蛋白，即Sevag試劑(體積比氯仿∶正丁醇＝5∶1)和干燥樣品以質(zhì)量比1∶1混勻，靜置，除去下層蛋白質(zhì)變性層；將樣品濃縮，重復(fù)除蛋白操作10次；濃縮除蛋白樣品后用95％乙醇洗滌，再濃縮，凍干得粗提物樣品；將粗提物樣品使用透析袋透析3天，將袋內(nèi)樣品濃縮至小體積，冷凍干燥，得黑靈芝精提物；

(2)取上述得到的黑靈芝精提物500mg，加入蒸餾水配成濃度為3～5mg/mL的溶液，離心，上清液過凝膠柱層析，使用的層析系統(tǒng)是Purifier 100生物大分子純化系統(tǒng)，凝膠柱Hiload 26/60Superdex-200prep grade，上樣前將樣品和洗脫液過0.22μm微孔濾膜以保護(hù)分離柱，洗脫液為蒸餾水，流速為2mL/min，上樣體積為5mL，分部收集體積為8mL/管，紫外檢測(cè)器和示差折光檢測(cè)器檢測(cè)(RID-10A示差檢測(cè)器)在線監(jiān)測(cè)洗脫情況；取第6-14管合并，濃縮，冷凍干燥得到黑靈芝提取物PSG，為黃色或棕色的絮狀固體；

(3)CM-PSG的制備：300mgPSG樣品懸浮于5mL20％NaOH和12.5mL異丙醇的混合液中，于冰浴中攪拌反應(yīng)3h，然后再分別邊攪拌邊緩慢加入含氯乙酸的異丙醇混合溶液(由1.37g或2.63g氯乙酸，5mL20％NaOH，及12.5mL異丙醇)，于室溫下反應(yīng)3h，然后調(diào)至60℃繼續(xù)反應(yīng)1.5h。冷卻至室溫后，加入0.5mol/L的HCL調(diào)pH值到7，并用蒸餾水透析72小時(shí)，濃縮，濃縮液用95％乙醇沉淀，攪拌靜置后4℃，4000rpm離心30min，收集沉淀，用乙醇，丙酮依次洗滌，冷凍干燥得衍生物，記為CM-PSG。

2.如權(quán)利要求1所述的一種通過羧甲基化得到的新型抗腫瘤化合物，其特征在于：步驟(3)中所述含氯乙酸的異丙醇混合溶液由1.37g氯乙酸，5mL20％NaOH，及12.5mL異丙醇組成。

3.如權(quán)利要求1所述的一種通過羧甲基化得到的新型抗腫瘤化合物，其特征在于：步驟(3)中所述含氯乙酸的異丙醇混合溶液由2.63g氯乙酸，5mL20％NaOH，及12.5mL異丙醇組成。