[發(fā)明專利]用于分析血液受試體的方法、試劑及試劑盒、以及裝置

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201710290121.8
• 申請日: 2017-04-28
• 公開（公告）號: CN107340272A
• 公開（公告）日: 2017-11-10
• 發(fā)明（設計）人: 島綠倫;野上惠嗣;松本智子;筱原翔;新井信夫
• 申請（專利權(quán)）人: 希森美康株式會社;公立大學法人奈良縣立醫(yī)科大學
• 主分類號: G01N21/49
• 分類號: G01N21/49;G01N21/59;G01N21/31
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標事務所11038
• 代理人: 鄭天松

【技術(shù)領(lǐng)域】

本發(fā)明涉及血液受試體的分析方法。另外，本發(fā)明涉及血液受試體分析用試劑及試劑盒。再者，本發(fā)明涉及血液受試體分析裝置。

【背景技術(shù)】

在生物體內(nèi)，由止血或任何病的要因而在血管內(nèi)或組織發(fā)生血栓(纖維蛋白塊)，為了將其除去而纖溶反應發(fā)生。在纖溶反應中，經(jīng)纖溶酶原活化物(PA)及纖溶酶的纖溶系統(tǒng)實現(xiàn)主要的作用。具體而言，作為纖溶酶的前體的纖溶酶原由PA活化而成纖溶酶，此纖溶酶分解血栓中的纖維蛋白而除去血栓。在生物體內(nèi)也存在控制纖溶系統(tǒng)的因子。例如，纖溶酶原活化物抑制劑(PAI)抑制由PA的纖溶酶原的活化。α2-抗纖溶酶(α2AP；也稱為α2-纖溶酶抑制劑)抑制性地控制在纖維蛋白上的纖溶酶的酶活性。

如果纖溶系統(tǒng)中有異常，則助長出血傾向或血栓形成。例如，在缺乏作為PAI的一種的PAI-1的患者中見到出血傾向。在缺乏α2AP的患者中，在受外傷之后盡管暫時止血，血栓的溶解過早而見到被稱為再出血的出血傾向。另外，由于在纖溶酶原異常癥或缺乏癥的患者中纖溶酶原的活性降低，纖溶系統(tǒng)不充分地發(fā)揮功能，有發(fā)生血栓癥的危險性。

在纖溶系統(tǒng)的檢查中主要進行關(guān)聯(lián)的因子的抗原量(蛋白量)的測定和活性的測定。例如，在纖溶酶原的活性的測定中，將受試體中的纖溶酶原用鏈激酶活化之后，與顯色性合成底物反應，從游離的染料的量測定纖溶酶原的活性。也可使用標準曲線從活性值算出纖溶酶原的蛋白量。另外，在美國專利申請公開第2013/0065260號說明書中公開，向血漿添加各自特異于凝血酶及纖溶酶的2種熒光合成底物、組織型纖溶酶原活化物和組織因子而使反應，基于從分解的熒光合成底物發(fā)生的熒光強度測定凝血酶及纖溶酶的生成量及生成速度。

【發(fā)明內(nèi)容】

【發(fā)明要解決的技術(shù)課題】

在以往的纖溶系統(tǒng)的檢查中，不過是測定針對合成底物的酶活性，難以反映在生物體內(nèi)發(fā)生的纖溶反應的狀態(tài)。另外，美國專利申請公開第2013/0065260號說明書中記載的凝血酶和纖溶酶的同時生成試驗可總括地分析凝固和纖溶，但此分析也基于對合成底物的酶活性。另外，至得到結(jié)果要求長達2～4小時的時間。因此，期望開發(fā)能短時間內(nèi)分析與在生物體內(nèi)發(fā)生的纖溶反應更接近的狀態(tài)的手段。

【解決課題的技術(shù)方案】

本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)可由將血液的凝固至纖溶的一系列的過程由凝固波形分析的新穎的方法在短時間內(nèi)分析與在生物體內(nèi)發(fā)生的纖溶反應更接近的狀態(tài)而完成本發(fā)明。

本發(fā)明的第1實施方式提供血液受試體的分析方法。此分析方法包括：在纖溶系統(tǒng)的活化劑的存在下使血液受試體凝固而取得凝固波形的工序；及基于取得的凝固波形，取得關(guān)于血液受試體的纖溶能力的信息的工序。

本發(fā)明的第2實施方式提供含纖溶系統(tǒng)的活化劑和凝固時間測定用試劑的血液受試體分析用試劑。

本發(fā)明的第3實施方式提供含第1試劑和第2試劑的血液受試體分析用試劑盒。在此試劑盒中，第1試劑含凝固系統(tǒng)的活化劑，并且第2試劑含纖溶系統(tǒng)的活化劑及鈣離子，或者，第1試劑含凝固系統(tǒng)的活化劑及纖溶系統(tǒng)的活化劑，并且第2試劑含鈣離子。

本發(fā)明的第4實施方式提供含第1試劑、第2試劑和第3試劑的血液受試體分析用試劑盒。在此試劑盒中，第1試劑含凝固系統(tǒng)的活化劑，第2試劑含纖溶系統(tǒng)的活化劑，第3試劑含鈣離子。

本發(fā)明的第5實施方式提供血液受試體分析裝置。此裝置具備調(diào)制含血液受試體、纖溶系統(tǒng)的活化劑、凝固時間測定用試劑和鈣離子的測定試樣的測定試樣調(diào)制部，從調(diào)制的測定試樣取得凝固波形的信息取得部和控制部。此控制部以從血液受試體、纖溶系統(tǒng)的活化劑、凝固時間測定用試劑和鈣離子調(diào)制測定試樣的方式控制測定試樣調(diào)制部，基于凝固波形，輸出關(guān)于血液受試體的纖溶能力的信息。

【發(fā)明效果】

由本發(fā)明使基于凝固波形取得關(guān)于血液受試體的纖溶的信息變得可能。

【附圖說明】

【圖1A】是測定含正常血漿、纖溶系統(tǒng)的活化劑、凝固時間測定用試劑和鈣離子的測定試樣的透過度而得到的凝固波形的一例。

【圖1B】是對圖1A的凝固波形進行1次微分而得到的速度的波形的一例。

【圖2】是顯示作為關(guān)于凝固波形的微分的參數(shù)的面積的一例的圖。

【圖3A】是測定各自從正常血漿及α2AP缺乏血漿(30％α2AP)調(diào)制的測定試樣的透過度而得到的凝固波形。

【圖3B】是對圖3A的凝固波形進行1次微分而得到的速度的波形。