[發明專利]用于修復胰腺組織的胰腺基質水凝膠的制備方法和用途

在審

• 申請號: 201710289848.4
• 申請日: 2017-04-27
• 公開（公告）號: CN107158463A
• 公開（公告）日: 2017-09-15
• 發明（設計）人: 湯禮軍;孫紅玉;陳濤;戴睿武;黃竹;閆洪濤;崔建峰;梁成霄;周菁;林寧
• 申請（專利權）人: 湯禮軍
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36;A61L27/22;A61L27/52
• 代理公司: 成都頂峰專利事務所(普通合伙)51224
• 代理人: 趙正寅

技術領域

本發明屬于組織工程與再生醫學技術領域，具體涉及一種具有促再生功能的豬組織來源的用于修復胰腺組織的胰腺基質水凝膠的制備方法和用途。

背景技術

重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)病情兇險、進展快、并發癥多，病死率高達30％。該病是由各種致病因素引起的胰腺腺泡損傷，觸發活性胰酶釋放入血，激活巨噬細胞和中性粒細胞而釋放大量炎性因子，導致全身性炎癥反應與代償性抗炎反應的失衡，其中巨噬細胞浸潤與激活在SAP發生、發展和演進過程中扮演著至關重要的角色。業已證實，巨噬細胞具有高度可塑性，可依賴局部微環境刺激產生促炎性巨噬細胞或抗炎性巨噬細胞。目前已有研究采用藥物調控巨噬細胞的功能，然而其治療大多是全身給藥，藥物副作用大，臨床可操作性差。因此，尋找一種安全、有效、簡便的調控巨噬細胞功能策略，恢復受損的胰腺功能，已成為臨床上亟需解決的問題。

生物材料可調控巨噬細胞的命運，研究證實支架材料的特性如形貌、彈性、孔隙度等均可影響巨噬細胞的表型。因此，研發具有促再生功能的材料已成為當今生物材料發展的重要趨勢。在這方面，來源于天然組織/器官的胞外基質(ECM)生物材料，鑒于其具有最接近天然的組織結構、豐富的生物活性成分、組織特異的微環境以及低免疫原性等優點，已成為組織再生領域有應用前景的生物材料。特別是其水凝膠形式，可通過微創注射的方法遞送到組織損傷部位，具有微創、安全、可控性強等優點大大增強了其在臨床上的應用潛力。然而，目前尚無關于胰腺基質水凝膠制備及其用于胰腺再生的報道。

發明內容

本發明的目的在于解決以上現有技術中存在的技術問題的至少一項，本發明提供一種解決現有胰腺組織工程材料在組分、結構和力學彈性方面的不足，提供可適宜胰腺細胞生長的天然微環境，以期達到促進重癥胰腺炎胰腺組織的內源性修復的用于修復胰腺組織的胰腺基質水凝膠的制備方法和用途。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：

豬胰腺基質水凝膠在制備促進胰腺修復的藥物中的用途。

進一步地，豬胰腺基質水凝膠在制備治療壞死性胰腺炎的藥物中的用途。

進一步地，所述藥物為注射劑。

發明人通過將豬的胰腺組織制成豬胰腺基質水凝膠，并將該物質通過注射的方式注入成功造模的實驗用SD大鼠的胰腺位置，24小時后，取材觀察其對胰腺損傷的修復情況表明，胰腺腺泡細胞壞死和炎癥細胞浸潤顯著減少，組織病理學評分也表明，ECM組與SAP相比評分明顯降低。從而，證實本發明對于胰腺損傷和胰腺炎癥等病癥具有較好的改善效果。

進一步地，所述注射劑為含有豬脫細胞胰腺組織的鹽酸-胃蛋白酶溶液。

進一步地，每毫升鹽酸-胃蛋白酶溶液中含有豬脫細胞胰腺組織8mg。

進一步地，所述含有豬脫細胞胰腺組織的鹽酸-胃蛋白酶溶液的pH值為7.4。

一種用于修復胰腺組織的胰腺基質水凝膠的制備方法，包括步驟：

B.豬胰腺基質水凝膠的制備：

將脫細胞胰腺組織冷凍干燥后做成粉末，然后按比例與鹽酸-胃蛋白酶溶液混合，調節 pH值至生理狀態，即得豬胰腺基質水凝膠。

進一步地，所述的用于修復胰腺組織的胰腺基質水凝膠的制備方法，還包括步驟：

A.胰腺的脫細胞化：

(1)將胰腺組織切成薄片，并用生理鹽水漂洗，得到胰腺組織薄片；

(2)將所述胰腺組織薄片浸于含有十二烷基硫酸鈉的生理鹽水溶液中攪拌，得到胰腺組織；

(3)將所述胰腺組織浸于Triton X-100溶液中攪拌至所述胰腺組織透明后，用生理鹽水漂洗后得到脫細胞胰腺組織。

進一步地，所述步驟B中采用濃度為0.1mol/L氫氧化鈉溶液和10x PBS調節pH值至7.4；所述脫細胞胰腺組織與鹽酸-胃蛋白酶溶液的比例關系為：在調節pH值之前，每毫升鹽酸- 胃蛋白酶溶液中含有脫細胞胰腺組織的量為10mg；在調節pH值之后，每毫升鹽酸-胃蛋白酶溶液中含有脫細胞胰腺組織的量為8mg。

進一步地，所述鹽酸-胃蛋白酶溶液中胃蛋白酶的質量占所述鹽酸-胃蛋白酶溶液總重的 1％，所述鹽酸-胃蛋白酶溶液中鹽酸的濃度為0.1mol/L；所述含有十二烷基硫酸鈉的生理鹽水溶液中十二烷基硫酸鈉的重量占含有十二烷基硫酸鈉的生理鹽水溶液總重的0.5％；所述 Triton X-100溶液中Triton X-100的重量百分數為1％。