[發(fā)明專利]一種多糖及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710287165.5
• 申請日: 2017-04-27
• 公開（公告）號: CN107034254B
• 公開（公告）日: 2020-08-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 呂洋;金城
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院微生物研究所
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C08B37/00;C12R1/01
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;白艷

1.一種制備具有保濕和維持細(xì)菌形態(tài)的酸性多糖的方法，包括如下步驟：發(fā)酵嗜鹽古菌（Haloarcula hispanica） ATCC33960，得到具有保濕和維持細(xì)菌形態(tài)的酸性多糖。

所述多糖包括或為如下幾種組分形成的聚合物：1）甘露糖、2）半乳糖、3）葡萄糖、4）1）-3）中至少一種的硫酸化修飾產(chǎn)物；

所述甘露糖、所述半乳糖和所述葡萄糖的摩爾比為55.9:43.2:0.9；所述多糖中硫酸根的質(zhì)量百分含量為26%。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述發(fā)酵的條件為37℃培養(yǎng)至穩(wěn)定期。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：

在所述發(fā)酵后還包括如下步驟：

1）收集發(fā)酵產(chǎn)物的上清液，將上述上清液依次經(jīng)乙醇沉淀、透析、濃縮、干燥，得到干燥產(chǎn)物；

2）將所述干燥產(chǎn)物依次經(jīng)離子交換層析和凝膠層析，得到多糖。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于：所述透析采用截留量為8000-12000分子量的透析袋進行。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于：

所述離子交換層析為將所述干燥產(chǎn)物溶解后，流進離子交換層析柱，再用離子交換層析洗脫緩沖液洗脫，收集離子交換層析產(chǎn)物；

所述離子交換層析洗脫緩沖液為含有0到2.5M NaCl的20mM NaAc水溶液；

所述離子交換層析洗脫的方式為梯度洗脫；

所述離子交換層析柱填充的介質(zhì)為DEAE-Sepharose FastFlow；

所述離子交換層析柱體積為120mL，長30cm；

所述收集離子交換層析產(chǎn)物為收集NaCl濃度在含有1.25 M-1.55 M NaCl的20mM NaAc水溶液；

所述凝膠層析為將所述離子交換層析產(chǎn)物二次透析后，再流進凝膠柱，再用凝膠層析洗脫緩沖液洗脫，收集凝膠層析產(chǎn)物；

所述凝膠層析洗脫緩沖液為水；

所述收集凝膠層析產(chǎn)物為收集2/15-1/3的柱體積洗脫液；

所述凝膠柱填充的介質(zhì)為Sephacryl S-400；

所述二次透析采用截留量為14000Da的透析袋進行；

所述凝膠柱體積為150mL，長100cm。

6.由權(quán)利要求1-5中任一所述方法制備的多糖。

7.權(quán)利要求6所述多糖在制備如下1）-3）中任一種的應(yīng)用：

1）維持細(xì)菌保濕產(chǎn)品；

2）吸附陽離子維持細(xì)菌細(xì)胞形態(tài)產(chǎn)品；

3）細(xì)菌保護屏障產(chǎn)品。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于：所述細(xì)菌為嗜鹽古菌。