[發明專利]一種基于重組枯草桿菌纖溶酶的凍干粉針劑及其制備工藝

在審

• 申請號: 201710285026.9
• 申請日: 2017-04-27
• 公開（公告）號: CN106913534A
• 公開（公告）日: 2017-07-04
• 發明（設計）人: 王業富;董艷山;范青云;胡彪群;高麗;石毅
• 申請（專利權）人: 武漢真福醫藥股份有限公司
• 主分類號: A61K9/19
• 分類號: A61K9/19;A61K38/48;A61K47/26;A61K47/18;A61P7/02
• 代理公司: 北京中北知識產權代理有限公司11253
• 代理人: 李新昂

技術領域

本發明涉及一種凍干粉針劑及其制備工藝，具體是一種基于重組枯草桿菌纖溶酶QK的凍干粉針劑及其制備工藝，屬于藥物制劑技術領域。

背景技術

全世界每年直接和間接死于心腦血管疾病的人數約占世界總死亡人數的1/3，已成為人類健康的頭號殺手。而血栓是導致心腦血管疾病的最主要原因。因此，溶栓是治療心腦血管疾病的關鍵。

目前市場上溶栓產品主要分為兩大類：一類是應用范圍較廣的以尿激酶、鏈激酶和t-PA(組織型纖溶酶原激活劑)為代表的間接溶栓藥物，其通過激活體內纖溶酶原轉化為纖溶酶發揮溶栓功效，但這類藥物價格昂貴，出血率高，半衰期短(以分鐘計算)；另一類是以從蚯蚓中提取的蚓激酶和從蛇毒中提取的溶纖酶為代表的纖溶酶類似蛋白，其可直接溶解血栓中的纖維蛋白，但無特異性，毒副作用過大，應用范圍較小。因此，開發具有溶栓功效、適合長期口服使用、價格低廉，且安全無毒副作用的溶栓藥物將極大提高心腦血管病人的存活率和治愈率。

納豆激酶是日本科學家在1987年首次從大豆發酵食物納豆中分離得到的第一個枯草桿菌纖溶酶。大量研究表明，納豆激酶與血栓中的交聯纖維蛋白具有極高的親和性，能夠直接特異性地降解纖維蛋白，還可以通過其它途徑達到間接溶栓的效果。此外，更重要的一點是，該酶具有非常好的安全性，基本不會引起毒副作用。然而，不管是枯草芽胞桿菌固體發酵還是液體發酵，得到的纖溶酶含量均不高，且蛋白成分復雜，純化成本極其高昂。

發明內容

針對上述現有技術存在的技術問題，本發明提供一種基于重組枯草桿菌纖溶酶的凍干粉針劑及其制備工藝，該QK凍干粉針劑，能夠直接特異性地降解纖維蛋白，還可以通過其它途徑達到間接溶栓的效果，安全且基本不會引起毒副作用。

本發明通過以下技術方案來實現上述目的：一種基于重組枯草桿菌纖溶酶的凍干粉針劑，其特征在于：所述凍干粉針劑包括重組枯草桿菌纖溶酶和賦形劑。

進一步，所述賦形劑為甘露醇、山梨醇、乳糖、蔗糖、麥芽糖或甘氨酸的一種。

進一步，所述賦形劑為甘露醇，添加濃度為0.5-2％。

進一步，所述甘露醇的添加濃度為：1％。

一種基于重組枯草桿菌纖溶酶凍干粉針劑的制備工藝，所述制備工藝包為：向重組枯草桿菌纖溶酶原液中加入處方量的甘露醇，攪拌溶解后過濾，分裝，凍干。

優選地，所述凍干過程包括：先進行預凍，在一定溫度下保持數小時；然后，每升溫5℃，再保持一定時間；最后，升溫至預定溫度并保溫。

本發明的有益效果是：與現有技術相比，本發明提供的重組枯草桿菌纖溶酶QK凍干粉針劑成品率高且外觀疏松均勻，安全穩定；此外，本發明提供的制備工藝簡單，易行，適合工業大規模生產。

具體實施方式

下面將結合本發明實施例，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。

一種基于重組枯草桿菌纖溶酶的凍干粉針劑，所述凍干粉針劑包括重組枯草桿菌纖溶酶和賦形劑。

所述賦形劑為甘露醇、山梨醇、乳糖、蔗糖、麥芽糖或甘氨酸的一種。所述賦形劑為甘露醇，添加濃度為0.5-2％。優選甘露醇的添加濃度為：1％。

一種基于重組枯草桿菌纖溶酶凍干粉針劑的制備工藝，所述制備工藝包括：1)向重組枯草桿菌纖溶酶QK原液中加入處方量的甘露醇，充分攪拌溶解后用0.22μm的微孔濾膜過濾；2)溶液分裝于10ml規格的西林瓶中，每瓶的裝樣量為3ml；3)將灌裝好的產品進行凍干，壓塞即得所述的重組枯草桿菌纖溶酶QK凍干粉針劑，其中，所述凍干過程如下：先將灌裝好的產品進行預凍，-35℃保持3小時；然后每升溫5℃保持1.5小時；最后升溫至30℃并保溫3小時。

實施例一：

本實施例是基于從上千株菌種中篩選得到一株高表達纖溶酶的枯草芽胞桿菌Bacillus Subtilis QK，表達分泌的纖溶酶命名為枯草桿菌纖溶酶QK；通過基因工程技術進行QK基因優化，構建表達載體，并在畢赤酵母中實現了高效表達，再經過簡單、高效的分離純化工藝可得到純度高于98％的重組枯草桿菌纖溶酶QK。

重組枯草桿菌纖溶酶QK原液1000mL