[發(fā)明專利]一種生產(chǎn)S?誘抗素的發(fā)酵方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710253267.5
• 申請(qǐng)日: 2017-04-18
• 公開（公告）號(hào): CN106906250A
• 公開（公告）日: 2017-06-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉健;譚虎;熊仁科;左建英;侯永春
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川龍蟒福生科技有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C12P7/42
• 分類號(hào): C12P7/42;C12R1/645
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司11227
• 代理人: 王學(xué)強(qiáng),羅滿

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑領(lǐng)域，具體涉及一種生產(chǎn)S-誘抗素的發(fā)酵方法。

背景技術(shù)

S-誘抗素，通用名稱脫落酸(abscisic acid，ABA)作為植物五大內(nèi)源激素之一，最早被認(rèn)識(shí)的作用是促進(jìn)植物衰老、休眠或器官脫落，故名脫落酸。但隨著研究的深入，其更多的作用被逐步認(rèn)識(shí)，到目前為止，已被證實(shí)的生理作用有：促進(jìn)作物均衡生長(zhǎng)，增強(qiáng)作物抗逆性，促進(jìn)氣孔關(guān)閉，提高抗旱能力，影響開花，影響性分化，維持種子和芽休眠，促進(jìn)果實(shí)與葉的脫落等。在農(nóng)業(yè)上它可用于抑制種子發(fā)芽、抗作物倒伏、增強(qiáng)作物對(duì)環(huán)境逆因子如干旱、寒冷等的抵抗能力等。

S-誘抗素是一種植物的生長(zhǎng)平衡因子，是所有綠色植物均含有的純天然產(chǎn)物，是平衡植物內(nèi)源激素和有關(guān)生長(zhǎng)活性物質(zhì)代謝的關(guān)鍵因子。其具有促進(jìn)植物平衡吸收水、肥和協(xié)調(diào)體內(nèi)代謝的能力?？捎行д{(diào)控植物的根/冠和營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)與生殖生長(zhǎng)，對(duì)提高農(nóng)作物的品質(zhì)、產(chǎn)量具有重要作用。

目前，S-誘抗素的制備方法有兩種。一種為從植物體中直接提取，盡管其在植物中廣泛分布，但其含量非常低，據(jù)報(bào)道，從200kg棉桃中才提取到9mg的S-誘抗素晶體，因此難以使用直接提取法獲得；使用化學(xué)合成法制備S-誘抗素時(shí)，合成的外消旋型S-誘抗素是天然型和非天然型誘抗素的混合物，不僅價(jià)格昂貴，而且合成的生理活性低。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明提供一種生產(chǎn)S-誘抗素的發(fā)酵方法，工藝簡(jiǎn)單、成本低廉、發(fā)酵周期較短并且得到的S-誘抗素具有產(chǎn)量高、生理活性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。

為解決以上技術(shù)問題，本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N生產(chǎn)S-誘抗素的發(fā)酵方法，包括：

1)將種子液在第一培養(yǎng)基中培養(yǎng)70-85h，得到種子培養(yǎng)液；所述第一培養(yǎng)基的有效成分選自碳源、有機(jī)氮源、天然油脂、多元醇、微量元素中的一種或多種；

2)將所述種子培養(yǎng)液在第二培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)17-22天，得到發(fā)酵液；所述第二培養(yǎng)基的有效成分為碳源、有機(jī)氮源、無機(jī)磷酸鹽或多元醇中的一種或多種，控制第二培養(yǎng)基的pH值在4.0-7.0；

3)將所述發(fā)酵液進(jìn)行滅活處理后，儲(chǔ)存。

優(yōu)選的，步驟1)中所述第一培養(yǎng)基包括一級(jí)培養(yǎng)基和二級(jí)培養(yǎng)基，所述種子液在一級(jí)培養(yǎng)基中經(jīng)50-55h培養(yǎng)后轉(zhuǎn)入二級(jí)培養(yǎng)基中，在二級(jí)培養(yǎng)基中培養(yǎng)20-30h后待用。

優(yōu)選的，一級(jí)培養(yǎng)基的有效成分包括：碳源、有機(jī)氮源、天然油脂和多元醇，其重量比例為(1-5)：(15-25)：(5-10)：(1-5)；二級(jí)培養(yǎng)基的有效成分包括：碳源、有機(jī)氮源、天然油脂、多元醇、微量元素，其重量比例為(1-5)：(15-25)：(1-5)：(1-5)：(1-5)。

優(yōu)選的，所述微量元素選自鐵、鋅、銅、錳、氟、鈷、碘、硒、鉬或鈷元素中的一種或多種。

優(yōu)選的，所述微量元素選自鐵、鋅、銅、錳、碘、鉬或鈷中的一種或多種。

優(yōu)選的，一級(jí)培養(yǎng)基與二級(jí)培養(yǎng)基的碳源選自蔗糖、葡萄糖、甘露醇、淀粉或乳酸中的一種或多種；有機(jī)氮源選自玉米粉、大豆蛋白、花生餅粉、棉籽餅粉、玉米漿、尿素或甘酪素中的一種或多種；天然油脂選自色拉油、菜籽油、花生油、大豆油或棕櫚仁油中的一種或多種；多元醇選自甘油、乙二醇、聚丙二醇、聚碳酸酯二元醇、聚醚二元醇中的一種或多種。

優(yōu)選的，步驟2)中所述第二培養(yǎng)基的有效成分碳源、有機(jī)氮源、無機(jī)磷酸鹽和多元醇的重量比例為(1-5)：(1-5)：(1-5)：(0.5-3)。

優(yōu)選的，一級(jí)培養(yǎng)基有效成分的重量比例為(2-5)：(18-25)：(6-10)：(2-5)；二級(jí)培養(yǎng)基有效成分的重量比例為(2-5)：(15-22)：(1-4)：(2-5)：(1-4)。

優(yōu)選的，一級(jí)培養(yǎng)基有效成分的重量比例為(4-5)：(18-22)：(7-10)：(3-5)；二級(jí)培養(yǎng)基有效成分的重量比例為(3-5)：(18-22)：(2-4)：(3-5)：(1-3)。

優(yōu)選的，第二培養(yǎng)基中有效成分的重量比例為(2-5)：(1-4)：(1-4)：(1-3)。

優(yōu)選的，第二培養(yǎng)基中有效成分的重量比例為(3-5)：(3-4)：(1-2)：(1-2)。

優(yōu)選的，一級(jí)培養(yǎng)基的有效成分還包括維生素、硫酸鹽或金屬鹽中的一種或多種；二級(jí)培養(yǎng)基的有效成分還包括金屬鹽或硫酸鹽中的一種或多種。

優(yōu)選的，所述金屬鹽選自鈉鹽、鈣鹽、鐵鹽、鎂鹽或鋅鹽中的一種或多種。

優(yōu)選的，第二培養(yǎng)基的有效成分還包括微量元素或金屬鹽中的一種或多種。