[發明專利]一種適配體過氧化物模擬酶可視化檢測沙門氏菌的方法有效
| 申請號： | 201710253103.2 | 申請日： | 2017-04-18 |
| 公開（公告）號： | CN107084976B | 公開（公告）日： | 2019-07-30 |
| 發明（設計）人： | 吳世嘉;段諾;王周平;劉麗紅 | 申請（專利權）人： | 江南大學;江蘇大學 |
| 主分類號： | G01N21/78 | 分類號： | G01N21/78;G01N21/65;G01N33/531;G01N33/569 |
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| 地址： | 214122 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 基于 適配體 識別 過氧化物 模擬 可視化 檢測 沙門氏菌 方法 | ||
1.一種適配體過氧化物模擬酶可視化檢測沙門氏菌的方法，其特征在于：通過以固定于微孔板的適配體1為捕獲探針，以適配體2修飾的鐵酸鋅/還原氧化石墨烯為過氧化物模擬酶，當體系中存在沙門氏菌時，適配體與沙門氏菌發生特異性結合從而形成適配體1-沙門氏菌-適配體2/鐵酸鋅/還原氧化石墨烯的三明治夾心結構，加入顯色底物TMB-H2O2，鐵酸鋅/還原氧化石墨烯復合納米材料可以作為過氧化物模擬酶，催化H2O2氧化TMB發生顯色反應，在一定濃度范圍內，沙門氏菌的數量與相對吸光值呈正相關，從而實現對沙門氏菌的檢測。
2.如權利要求1所述的一種適配體過氧化物模擬酶可視化檢測沙門氏菌的方法，其特征在制備鐵酸鋅/還原氧化石墨烯作為過氧化物模擬酶，催化底物TMB-H2O2顯色，鐵酸鋅/還原氧化石墨烯制備方法為：稱取20mg氧化石墨烯溶于60mL乙醇中并超聲分散2h，同時稱取149mg Zn(NO3)2·6H2O和404mg Fe(NO3)3·9H2O溶解于20mL無水乙醇中，室溫下磁力攪拌30min；逐滴向氧化石墨稀分散液中滴入Zn(NO3)2·6H2O和Fe(NO3)3·9H2O的乙醇溶液，繼續攪拌30min；用6M的NaOH水溶液調節混合溶液pH至10，繼續攪拌30min；將混合液轉入100mL高壓反應釜中180℃反應12h，冷卻至室溫后，棄去上清液，所得黑色固體產物用去離子水洗5次，得到鐵酸鋅/還原氧化石墨烯復合納米材料，于50℃烘箱中干燥備用。
3.如權利要求1所述的一種適配體過氧化物模擬酶可視化檢測沙門氏菌的方法，其特征在于：生物素化修飾的沙門氏菌適配體1序列為5’-biotin-AGTAATGCCCGGTAGTTATTCAAAGATGAGTAGGAAAAGA-3’，沙門氏菌適配體2序列為5’-AAAAAAAAAAAAAGTAATGCCCGGTAGTTATTCAAAGATGAGTAGGAAAAGA-3’。
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