[發(fā)明專(zhuān)利]一種用于房顫易感基因檢測(cè)的SNP分型試劑盒及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710249119.6
• 申請(qǐng)日: 2017-04-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107083429B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-06-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李小方;葛斌文;謝麗艷
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 江蘇蘇博生物醫(yī)學(xué)科技南京有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/6883
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 南京天翼專(zhuān)利代理有限責(zé)任公司 32112
• 代理人: 李建芳

本發(fā)明公開(kāi)了一種用于房顫易感基因檢測(cè)的SNP分型試劑盒及其應(yīng)用，用于房顫易感基因檢測(cè)的SNP分型試劑盒，包括如下易感基因的6個(gè)SNP位點(diǎn)的引物：KCNN3基因上的RS13376333位點(diǎn)、ZFHX3基因上的RS7193343位點(diǎn)、CAV1基因上的RS3807989位點(diǎn)、TBX5基因上的RS3825214位點(diǎn)、4q25上的RS2200733和RS10033464兩個(gè)位點(diǎn)。該試劑盒具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、耗時(shí)短、通量高可實(shí)現(xiàn)批量檢測(cè)等諸多優(yōu)點(diǎn)；該試劑盒不僅可以快速檢測(cè)出待測(cè)者的房顫易感基因型，還可以從基因水平上評(píng)估待測(cè)者的房顫遺傳易感性，為房顫的預(yù)防提供一定的指導(dǎo)意見(jiàn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種用于房顫易感基因檢測(cè)的SNP分型試劑盒及其應(yīng)用，屬于生物學(xué)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

心房顫動(dòng)(atrial fibrillation，AF，簡(jiǎn)稱房顫)是指規(guī)則有序的心房電活動(dòng)喪失，代之以快速無(wú)序的顫動(dòng)波，是當(dāng)今最常見(jiàn)的持續(xù)性心律失常，在人群中的發(fā)病率約為1％～2％。目前，全球房顫患病人數(shù)達(dá)3350萬(wàn)，我國(guó)現(xiàn)患病人數(shù)已達(dá)1000萬(wàn)以上，預(yù)計(jì)到2060年將增加2倍。房顫嚴(yán)重危害人類(lèi)健康，有較高的致殘率和致死率，可引起腦卒中、心力衰竭、心動(dòng)過(guò)速性心肌病、室性心律失常、血栓栓塞、死亡等嚴(yán)重后果，是二十一世紀(jì)亟待解決的心臟疾病領(lǐng)域重大課題之一。

自房顫被發(fā)現(xiàn)以來(lái)，關(guān)于房顫的研究就從未停止過(guò)，近十年來(lái)，科學(xué)界則將研究重心轉(zhuǎn)移到對(duì)房顫的遺傳學(xué)發(fā)病機(jī)制上來(lái)，這些研究為證明房顫為遺傳疾病提供了重要的依據(jù)，尤其是以大樣本研究為依據(jù)的全基因組關(guān)聯(lián)分析(GWAS)為心房顫動(dòng)的遺傳機(jī)制提供了新的思路。在關(guān)聯(lián)分析方面，各研究中心發(fā)表了很多與房顫相關(guān)的位點(diǎn)，其中與房顫顯著相關(guān)的主要有染色體4q25上的RS2200733和RS10033464兩個(gè)位點(diǎn)、KCNN3基因上的RS13376333位點(diǎn)、ZFHX3基因上的RS7193343位點(diǎn)、CAV1基因上的RS3807989位點(diǎn)、TBX5基因上的RS3825214位點(diǎn)等。

單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polynorphism，SNP)是人類(lèi)基因組DNA序列變異的主要形式，是決定人類(lèi)疾病(尤其是多基因疾病)易感性和藥物反應(yīng)性差異的核心信息。ARMS-PCR是Newton等首先建立用來(lái)檢測(cè)已知突變的方法。其原理是在DNA序列一端的突變處設(shè)計(jì)兩個(gè)引物，突變位點(diǎn)位于引物的3'末端，一個(gè)相應(yīng)于正常等位基因序列引物，一個(gè)相應(yīng)于突變基因序列引物，再在DNA另一端設(shè)計(jì)一個(gè)共用引物，從而用PCR對(duì)突變基因進(jìn)行檢測(cè)。目前，用于房顫易感基因檢測(cè)的方法主要有測(cè)序法以及基因芯片法，存在操作復(fù)雜、耗時(shí)長(zhǎng)、成本高等缺點(diǎn)。例如：申請(qǐng)?zhí)枮?01210184474.7，名稱為房顫易感基因基因無(wú)創(chuàng)檢測(cè)試劑盒的中國(guó)專(zhuān)利，具體涉及DNA測(cè)序技術(shù)，該方法操作步驟繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)、不利于批量檢測(cè)；申請(qǐng)?zhí)枮?01110338262.5，名稱為用于預(yù)測(cè)迷宮手術(shù)治療房顫療效的基因芯片的中國(guó)專(zhuān)利，具體涉及基因芯片技術(shù)，該方法雖能檢測(cè)多個(gè)房顫相關(guān)SNP位點(diǎn)，但涉及DNA提取及多次PCR擴(kuò)增，操作步驟較多。

房顫，尤其是孤立性房顫的發(fā)病存在明顯的家族聚集性。除了家族性房顫外，人群中散發(fā)的房顫患者存在一定的遺傳易感性。因此，深入了解房顫的分子遺傳學(xué)機(jī)制將有助于對(duì)這一疾病的預(yù)防和診治。房顫給患者和社會(huì)帶來(lái)的巨大健康和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，使得我們?cè)絹?lái)越意識(shí)到對(duì)房顫前期篩查、早期預(yù)防和有效治療的重要性和迫切性；越來(lái)越意識(shí)到只有從發(fā)生機(jī)制上深入認(rèn)識(shí)房顫，才能更好地防治房顫。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種用于房顫易感基因檢測(cè)的SNP分型試劑盒及其應(yīng)用，該試劑盒具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、耗時(shí)短、通量高可實(shí)現(xiàn)批量檢測(cè)等諸多優(yōu)點(diǎn)；該試劑盒不僅可以快速檢測(cè)出待測(cè)者的房顫易感基因型，還可以從基因水平上評(píng)估待測(cè)者的房顫遺傳易感性，為房顫的預(yù)防提供一定的指導(dǎo)意見(jiàn)。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：