[發明專利]一種HOCs的被動加標方法及其在效應導向分析中的應用

有效

• 申請號: 201710244276.8
• 申請日: 2017-04-14
• 公開（公告）號: CN106970171B
• 公開（公告）日: 2019-06-21
• 發明（設計）人: 李慧珍;游靜;祁紅學
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 北京科家知識產權代理事務所(普通合伙) 11427
• 代理人: 陳娟

本發明公開了一種HOCs的被動加標方法及其在效應導向分析中的應用,包括以下步驟：步驟一，PDMS膜的制備；步驟二，被動加標載樣；步驟三，效應導向分析；步驟四，毒性組分中有機污染物的定性與定量分析；步驟五，毒性確認。本發明基于平衡分配原理，使載入聚合物PDMS的HOCs不斷釋放進入水體，彌補水體中HOCs隨時間的損耗，能夠有效維持相對恒定的HOCs水濃度，有效克服常規溶劑加標方法在HOCs水毒性測試中濃度不穩定的問題，同時考慮HOCs的生物可利用性；在效應導向分析中，可提供更為準確的生物毒性測試數據。

技術領域

本發明涉及一種HOCs的被動加標方法及其在效應導向分析中的應用，屬于有機污染物毒性測定技術領域。

背景技術

水污染嚴重威脅水生生態系統平衡和人類健康，亟需開展水生生態風險評價的研究，制定相應的水質基準；準確可靠的毒性數據是建立有效水質基準的前提，而毒性數據主要通過加標目標污染物到水體，利用模式生物進行毒性測試來獲取。

傳統的溶劑加標方法將待測化合物配制成目標濃度的有機溶液，然后加入水體；對于疏水性有機污染物(hydrophobic organic contaminants,HOCs)，由于其揮發降解、容器壁吸附、毒性測試中生物體的攝取等因素，毒性測試過程中污染物水體濃度逐漸降低。這導致水體暴露濃度變化大，污染物的劑量-效應關系不明，直接影響毒性測試數據的準確性。

另外，環境污染因素復雜，多種污染物共存，鑒定主要致毒物是關鍵也是難點；效應導向分析(effect-directed analysis,EDA)結合化學分離分析方法和生物毒性測試技術，以有機污染物為篩選對象，可確定主要毒性貢獻者；針對當前HOCs污染嚴重、對水生生物毒性強的特點，有必要發展并完善EDA在毒性鑒定評價中的方法，發展能夠有效維持毒性測試過程中HOCs水濃度，同時考慮污染物生物可利用性的加標方法是有效開展EDA的基礎。

本發明以聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)為聚合物，HOCs為目標污染物，水為測試介質，燒杯為測試體系；基于平衡分配理論，使提前載入聚合物的HOCs不斷釋放進入水體，彌補水體中HOCs隨時間的損耗，有效克服溶劑加標方法在HOCs水毒性測試中濃度不穩定的問題，并考慮毒性測試中污染物的生物可利用性。

發明內容

為解決上述問題，本發明提出了一種HOCs的被動加標方法及其在效應導向分析中的應用，能夠有效維持相對恒定的HOCs水濃度，同時考慮HOCs的生物可利用性，為開展EDA中生物毒性測試提供保障。

本發明的HOCs的被動加標方法及其在效應導向分析中的應用，包括以下步驟：

步驟一，PDMS膜的制備，

第一步，將硅酮前聚物和固化劑充分混合，以一定厚度均勻涂布在干凈的不銹鋼板上，涂布厚度為0.1～0.5mm，去除其中氣泡，保持710mm汞柱30～40min；

第二步，23～25℃固化72～96h后，將膜揭下，裁剪成一定大小的片狀；

第三步，用丙酮超聲3～4次去除雜質，超聲時間為15～30min；

第四步，用純凈水超聲3～4次去除丙酮，自然風干，得到PDMS膜，所得PDMS膜的密度為1.15～1.20g/ml；

步驟二，被動加標載樣，

第一步，取一片步驟一制備的空白PDMS膜浸泡于含有目標HOCs的甲醇溶液，在23～25℃水平搖動，控制水平搖動速率為200～220rpm，每隔一段時間加入純凈水，至少加8次，促使HOCs轉移到PDMS膜中，至48～72h完成載樣；

第二步，取出PDMS膜，用純凈水洗凈甲醇，在23～25℃自然風干，得到載樣PDMS膜；

步驟三，效應導向分析，