[發明專利]一種包含溶菌酶的飼料添加劑

有效

• 申請號: 201710243612.7
• 申請日: 2017-04-14
• 公開（公告）號: CN108719607B
• 公開（公告）日: 2021-07-06
• 發明（設計）人: 潘宏濤;盧亞萍
• 申請（專利權）人: 浙江伊杰斯生物科技有限公司
• 主分類號: A23K20/189
• 分類號: A23K20/189;A23K10/30;A23K50/30;A61K38/47;A61P1/12;A61K36/71
• 代理公司: 常州佰業騰飛專利代理事務所(普通合伙) 32231
• 代理人: 劉娟娟

本發明涉及一種包含溶菌酶的飼料添加劑，其中所述溶菌酶采用發酵工藝制備，具體步驟如下：取液體培養基置于三角瓶中，按4％v/v的接種量接入灰色鏈霉菌的菌體種子，進行搖瓶發酵，發酵條件為20?40℃，150?300r/min，發酵培養24h后，將發酵液離心去除菌體，取上清液依次用硫酸銨鹽析法、凝膠柱層析法和陽離子交換柱層析法純化后，冷凍干燥即得。使用上述發酵工藝獲得的溶菌酶飼料添加劑對仔豬腹瀉具有良好的防治效果，配合中藥提取物使用效果更佳。

技術領域

本發明涉及飼料領域，具體涉及一種包含溶菌酶的飼料添加劑。

背景技術

近年來，隨著畜牧產業的高度集約化生產，畜禽疾病的發生也日趨上升，由于疾病造成的死亡率逐年增加，給畜牧業造成重大的經濟損失。腹瀉是影響仔豬成活率和生長發育的主要因素之一，傳統預防和治療措施是使用抗生素。雖然抗生素在畜禽飼料中的使用對于有效控制疾病、提高飼料轉化率、保障畜產品的穩定供應發揮了重要作用，但是由于飼料生產中抗生素的超范圍、高劑量或多品種、低劑量的長期使用，以及養殖過程中抗生素濫用和亂用，帶來的細菌耐藥性問題顯得尤為突出。隨著歐盟2006年全面禁止在飼料中使用抗生素和美國公告2017年1月1日全面禁止在飼料中使用抗生素后，抗生素替代物研發一直是動物營養研究的熱點。

溶菌酶(Lysozyme)，又稱細胞壁水解酶，能專一性地作用于細菌細胞壁肽聚糖分子，能使N-乙酰胞壁酸與乙酰葡萄糖氨之間的β-1,4糖苷鍵斷裂，使細菌細胞壁變得松馳而達到溶解細菌的效果。溶菌酶廣泛分布于高等動植物組織及其分泌物、原生動物、昆蟲、植物以及各種微生物中。

溶菌酶作為人體正常體液及組織中的非特異免疫因子之一，具有多種藥理作用，參與機體多種免疫反應，有抗菌、抗病毒的功效，在機體正常防御功能和非特異免疫中，具有保持機體生理平衡的重要作用。它可以改善和增強巨噬細胞吞噬和消化功能，激活白細胞吞噬功能，并能改善細胞抑制劑所導致的白細胞減少，從而增強機體的抵抗力。溶菌酶能直接水解革蘭氏陽性菌，在分泌型免疫球蛋白A、補體的參與下，還能水解革蘭氏陰性菌如大腸桿菌等。對耐藥性細菌同樣具有溶菌作用，而且具有療效顯著和對人體副作用小的特點，因而是一種較為理想的藥用酶。溶菌酶能與帶負電荷的病毒蛋白直接作用，與DNA、RNA、脫輔基蛋白形成復鹽，使病毒失活。溶菌酶作為酶類抗菌藥，能參與粘多糖代謝，在配合內服和外用藥的同時，可起到強力消炎作用，它還可與各種誘發炎癥的酸性物質結合使其失活，并能夠增強抗生素和其它藥物的療效，改善組織基質的粘多糖代謝，從而達到消炎、修復組織的目的。

溶菌酶是基因工程、細胞工程、發酵工程中必不可少的工具酶。在國外，溶菌酶多用于菌體內物質的提取。只要把對敏感的菌體懸液在適當緩沖液中，用溶菌酶處理，再結合使用超聲波、冷凍離心等手段就可得到無細胞提取液，進一步精制可得到所需的菌體物質如蛋白質、核酸、酶及活性多肽等，因此生物工業的發展對溶菌酶制劑的需求將與日俱增。

目前，市場上見到最多的溶菌酶是蛋清溶菌酶，但其僅對革蘭氏陽性菌有作用，限制了其應用范圍。近年來國內外對多種來源的溶菌酶進行了廣泛的研究，但有關發酵方法制備微生物溶菌酶的研究報道較少，導致此類非蛋清溶菌酶在實際工業化大生產上應用有限。

中藥在抗菌同時具有改善和調節機體狀態的特性，因此利用我國特有的中醫理論和豐富的植物藥資源開發控制仔豬腹瀉制劑已經成為維持和發展養豬業的重要課題。

白頭翁為多年生毛茛科植物，高達50cm，全株密被白色長柔毛，主根粗壯呈圓錐形，有時扭曲，外皮黃褐色。白頭翁性寒，歸大腸經，有清熱解毒、涼血止瀉之功效，常用于除腸胃濕熱，為熱毒血痢之良藥。此外，也可用于治療瘧疾，或煎湯外洗用于外陰癢、陰腫的治療，近年來用于治療細菌性痢疾和阿米巴痢疾均有良效。白頭翁抗菌性廣泛，其提取物有較好的鎮靜、止痛作用，其中常用的有效成分為皂苷和白頭翁素。