[發(fā)明專利]檢測PITX1表達量的試劑在制備胃癌預后評估試劑盒中的應用

有效

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• 申請日: 2017-04-05
• 公開（公告）號: CN106990245B
• 公開（公告）日: 2018-07-31
• 發(fā)明（設計）人: 樊紅;喬鳳昌;沈小慧;李懿萍
• 申請（專利權）人: 東南大學
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 南京眾聯(lián)專利代理有限公司 32206
• 代理人: 張慧清

本發(fā)明涉及檢測PITX1表達量的試劑在制備胃癌預后評估試劑盒中的應用，屬于生物技術領域，特別是涉及醫(yī)學診斷領域。本發(fā)明中我們公開了檢測PITX1表達量的試劑在制備胃癌預后評估試劑盒中的應用。可以通過對胃癌預后預測和胃癌化療耐藥評估進行標記，并利用免疫組化化學技術檢測PITX1基因的表達水平，從而獲得預測胃癌預后和化療耐藥的情況，且PITX1基因的引入方式簡單，整個預測評估簡便易行，可行性高。

技術領域

本發(fā)明涉及檢測PITX1表達量的試劑在制備胃癌預后評估試劑盒中的應用，屬于生物技術領域，特別是涉及醫(yī)學診斷領域。

背景技術

胃癌是嚴重危害我國人民健康的疾病，到目前為止尚無較好的靶向藥物，造成患者治療效果差，預后不良。另外，胃癌是一個異質性很高的疾病，不同患者的病因不同，造成診斷和治療上的差別。尤其是不同遺傳基礎，可能造成患者化療用藥的療效差別。 目前國內(nèi)外尚沒有可以有效對這種化療用藥療效差別進行預后判斷的技術手段。

建立有效的術后預后預測標志物、發(fā)掘化療耐藥相關分子對于確證哪些患者術后可能出現(xiàn)復發(fā)轉移并且需及時開展術后放化療治療，哪些患者對于化療會產(chǎn)生抵抗，需要選擇個體化治療（如分子靶向治療）具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于針對胃癌提供一種可靠的預后評估試劑盒，從而可以監(jiān)控胃癌患者的預后情況，使其能夠及時就診；同時利用預后評估結果指定個體化治療方案，合理應用化療藥物，避免無效的化療，提高有效治愈率。

為了實現(xiàn)這一發(fā)明目的，我們公開了檢測PITX1表達量的試劑在制備胃癌預后評估試劑盒中的應用。

胃癌細胞PITX1基因的表達水平與5氟尿嘧啶、順鉑等化療藥物的治療效果有關，可以通過檢測患者該基因的表達水平指導臨床胃癌化療用藥，提高療效。據(jù)此，我們提出PITX1基因檢測可以應用于胃癌預后判定與化療耐藥評估。從而可以精確地預測胃癌預后，并且可以基于預測的預后有效地建立最佳的個體治療方案，以顯著減少由胃癌引起的死亡。

進一步地，我們公開了用于檢測PITX1表達量的試劑（包括但不限于）選自：對PITX1具有檢測特異性的探針、基因芯片或PCR引物。

更為具體地，在本發(fā)明中我們公開了對PITX1采用免疫組化方法檢測。

利用免疫組化方法檢測中我們所采用的檢測試劑主要是由PITX1多克隆抗體、HRP標記二抗和組化試劑盒DAB顯色劑組成。

其中多克隆抗體具體來說是指1:200 (Abcam，兔源性，ab72640)，HRP標記二抗是指DAKO、K5007即用型，組化試劑盒DAB顯色劑是指DAKO、K5007, 1:100。

試劑盒中包含有檢測生物樣品中檢測PITX1表達量的試劑，用于該檢測的生物樣品為福爾馬林固定和/或石蠟包埋的胃癌組織。

所述的檢測試劑盒，通過以下步驟用于胃癌的預后判斷：（a）.檢測生物樣品中的PITX1表達量，（b）.根據(jù)（a）中檢測到的PITX1表達量將結果分為低表達（或者為不表達）和高表達兩種，（1）PITX1不/低表達患者：5-FU化療同時輔以PITX1基因治療（PITX1的引入并不會誘發(fā)胃正常上皮細胞毒性），同時因其預后差，要密切隨訪病人，及時復查相應的腫瘤指征及PDCD5的表達水平，合理調整化療的劑量時間；（2）PITX1高表達患者：預后雖較不/低表達患者好，但其對5-FU易耐藥，故一旦發(fā)現(xiàn)控制效果不明顯，應及時更換其他化療藥物。

這里所說的低表達是指陰性、假陽性和弱陽性，高表達是指陽性和強陽性。

由于胃癌細胞PITX1基因的表達水平與5氟尿嘧啶、順鉑等化療藥物的作用效果有關，可以通過檢測患者該基因的表達水平指導臨床制定個體化的化療方案，提高療效。